東北大学研究者紹介

研究者詳細

ホーム

日本語 English

顔写真

ナカヤマ　ケイコ

中山　啓子

Keiko Nakayama

所属

大学院医学系研究科　創生応用医学研究センター　細胞増殖制御分野

職名

教授

学位

医学博士（東京医科歯科大学）

researchmap

https://researchmap.jp/Tohoku_KEIKON

J-GLOBAL ID

200901043258496930

経歴 11

2018年10月～継続中

東北大学　未来型医療創造卓越大学院プログラムプログラムコーディネーター
2003年1月～継続中

東北大学大学院医学系研究科　教授
2012年4月～ 2015年3月

東北大学メディカル・メガバンク機構　人材育成部門長
1997年5月～ 2003年1月

九州大学生体防御医学研究所　助教授
1997年5月～ 2002年12月

九州大学生体防御医学研究所　助教授
1996年8月～ 1997年4月

東京医科歯科大学医学部付属病院　医院
1996年6月～ 1997年4月

東京医科歯科大学　医員
1995年7月～ 1996年7月

日本ロシュ株式会社　研究員
1995年7月～ 1996年5月

日本ロシュ　主任研究員
1991年4月～ 1995年6月

米国ワシントン大学　ポストドクタルフェロー
1991年4月～ 1995年6月

ワシントン大学医学部内科アレルギー免疫部門　博士研究員

︎全件表示 ︎最初の5件までを表示

学歴 2

東京医科歯科大学　医学研究科　内科学

～ 1991年3月
東京医科歯科大学　医学部　医学科

～ 1986年3月

委員歴 2

復興促進プログラム（A－STEP）評価委員会　委員

2014年4月～ 2015年3月
復興促進プログラム（A－STEP）評価委員会　委員

2014年4月～ 2015年3月

所属学協会 5

日本癌学会(2007/04-2007/09 プログラム委員)
日本細胞生物学会(2007/05-2010/04 プログラム委員)
日本細胞生物学会(2006/11-2007/05 将来検討委員)
日本分子生物学会(1996/04-)
日本癌学会(1999/04-)

研究キーワード 3

発生工学
タンパク質分解
細胞周期

研究分野 3

ライフサイエンス / 発生生物学 /
ライフサイエンス / 細胞生物学 /
ライフサイエンス / 分子生物学 /

受賞 3

FIRSTシンポジウム「『科学技術が拓く2030年』へのシナリオ」内NEXTライフ・イノベーション・ポスターセッション銅賞

2013年2月28日　RIRSTプログラム公開活動実行委員会
平成１９年度医学部・医学系研究科「教育貢献賞」

2008年3月　東北大学医学部長、医学系研究科長
東京医科歯科大学研究奨励賞

1992年4月　東京医科歯科大学

論文 283

Biallelic variants/mutations of IL1RAP in patients with steroid-sensitive nephrotic syndrome. 国際誌査読有り

Sou Niitsuma, Hiroki Kudo, Atsuo Kikuchi, Takaya Hayashi, Satoshi Kumakura, Shuhei Kobayashi, Yuko Okuyama, Naonori Kumagai, Tetsuya Niihori, Yoko Aoki, Takanori So, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Matsuyuki Shirota, Shuji Kondo, Shoji Kagami, Hiroyasu Tsukaguchi, Kazumoto Iijima, Shigeo Kure, Naoto Ishii

International immunology　32　(4)　283-292　2019年12月24日

DOI： 10.1093/intimm/dxz081 　

詳細を見る詳細を閉じる

Nephrotic syndrome (NS) is a renal disease characterized by severe proteinuria and hypoproteinemia. Although several single-gene mutations have been associated with steroid-resistant NS, causative genes for steroid-sensitive NS (SSNS) have not been clarified. While seeking to identify causative genes associated with SSNS by whole-exome sequencing, we found compound heterozygous variants/mutations (c.524T>C; p.I175T and c.662G>A; p.R221H) of the interleukin-1 receptor accessory protein (IL1RAP) gene in two siblings with SSNS. The siblings' parents are healthy, and each parent carries a different heterozygous IL1RAP variant/mutation. Since IL1RAP is a critical subunit of the functional interleukin-1 receptor (IL-1R), we investigated the effect of these variants on IL-1R subunit function. When stimulated with IL-1β, peripheral blood mononuclear cells from the siblings with SSNS produced markedly lower levels of cytokines compared with cells from healthy family members. Moreover, IL-1R with a variant IL1RAP subunit, reconstituted on a hematopoietic cell line, had impaired binding ability and low reactivity to IL-1β. Thus, the amino acid substitutions in IL1RAP found in these NS patients are dysfunctional variants/mutations. Furthermore, in the kidney of Il1rap-/- mice, the number of myeloid-derived suppressor cells, which require IL-1β for their differentiation, was markedly reduced although these mice did not show significantly increased proteinuria in acute nephrotic injury with lipopolysaccharide treatment. Together, these results identify two IL1RAP variants/mutations in humans for the first time and suggest that IL1RAP might be a causative gene for familial NS.
Heme regulates protein interactions and phosphorylation of BACH2 intrinsically disordered region in humoral response

Miki Watanabe-Matsui, Shun Kadoya, Kei Segawa, Hiroki Shima, Tadashi Nakagawa, Yuko Nagasawa, Shuichiro Hayashi, Mitsuyo Matsumoto, Mariko Ikeda, Akihiko Muto, Kyoko Ochiai, Long C. Nguyen, Katsumi Doh-Ura, Mikako Shirouzu, Keiko Nakayama, Kazutaka Murayama, Kazuhiko Igarashi

iScience　28　(1)　111529-111529　2025年1月
出版者・発行元： Elsevier BV
DOI： 10.1016/j.isci.2024.111529 　

ISSN：2589-0042
Updated Genetic Analysis of Japanese Familial ALS Patients Carrying SOD1 Variants Revealed Phenotypic Differences for Common Variants. 国際誌

Ayumi Nishiyama, Tetsuya Niihori, Naoki Suzuki, Rumiko Izumi, Tetsuya Akiyama, Masaaki Kato, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Hitoshi Warita, Yoko Aoki, Masashi Aoki

Neurology. Genetics　10　(6)　e200196　2024年12月

DOI： 10.1212/NXG.0000000000200196 　

詳細を見る詳細を閉じる

BACKGROUND AND OBJECTIVES: Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is an adult-onset progressive neurodegenerative disease. Approximately 10% of ALS cases are familial, and more than 20 causative genes have been identified. As we have previously reported, SOD1 variants are the most common causes of familial ALS in Japan. Because antisense oligonucleotides for SOD1-linked ALS are being used in practical applications, the types of variants and the clinical features of patients need to be updated. METHODS: We consecutively recruited 160 families with familial ALS in Japan. We performed genetic analyses, focusing on SOD1-linked ALS as the most common in our cohort, updated their genotypes, and characterized clinical phenotypes. RESULTS: A total of 26 SOD1 variants in 56 patients and 49 families (30.6%) were collected, with the 3 most common (p.His47Arg [the conventional numbering; H46R], p.Leu127Ser [L126S], p.Asn87Ser [N86S]) accounting for 38.8% of all families. We also identified 2 novel variants (p.Ile36Phe [I35F] and p.Asn132Argfs*3 [N131Rfs*3]). The mean age at onset was 48.9 ± 12.2 (mean ± SD) years for all patients with SOD1-linked ALS. Lower limb onset comprised 70% of cases. The mean disease duration was 64.7 ± 82 months, and the median survival was 71.5 months. Some variants led to a relatively homogeneous phenotype, although clinical characteristics differed among types of variants and families. Patients with p.His47Arg (H46R) showed slower progression with lower limb onset and a predominance of lower motor neuron involvement. The p.Leu127Ser (L126S) variant led to varying degrees of progression in heterozygous or homozygous states and presented incomplete penetrance. Intrafamilial phenotypic differences were observed in families carrying p.Asn87Ser (N86S). Four variants (p.Cys7Gly [C6G], p.His44Arg [H43R], p.Leu85Val [L84V], and p.Cys147Arg [C146R]) were found to be associated with rapid disease progression. DISCUSSION: The genetic basis of familial ALS, at least for SOD1 variants, still differed by geographic and ethnic background. Understanding these clinical profiles will help optimize evaluation in targeted gene therapy worldwide and benefit efficient diagnosis, leading to precise application in clinical practice.
Calreticulin exposure induced by anticancer drugs is associated with the p53 signaling pathway in colorectal cancer cells

Satoru Naito, Taiki Kajiwara, Hideaki Karasawa, Tomoyuki Ono, Tatsushi Saito, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Shinobu Ohnuma, Michiaki Unno

Biochemical and Biophysical Research Communications　733　150665-150665　2024年11月
出版者・発行元： Elsevier BV
DOI： 10.1016/j.bbrc.2024.150665 　

ISSN：0006-291X
ALS-associated RNA binding proteins converge onUNC13Atranscription through regulation of REST

Yasuaki Watanabe, Naoki Suzuki, Tadashi Nakagawa, Masaki Hosogane, Tetsuya Akiyama, Hitoshi Warita, Masashi Aoki, Keiko Nakayama

2024年10月23日

DOI： 10.1101/2024.10.22.619761 　
Accelerated plasma-cell differentiation in Bach2-deficient mouse B cells is caused by altered IRF4 functions. 国際誌

Kyoko Ochiai, Hiroki Shima, Toru Tamahara, Nao Sugie, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Tomohiro Kurosaki, Kazuhiko Igarashi

The EMBO journal　2024年4月11日

DOI： 10.1038/s44318-024-00077-6 　

詳細を見る詳細を閉じる

Transcription factors BACH2 and IRF4 are both essential for antibody class-switch recombination (CSR) in activated B lymphocytes, while they oppositely regulate the differentiation of plasma cells (PCs). Here, we investigated how BACH2 and IRF4 interact during CSR and plasma-cell differentiation. We found that BACH2 organizes heterochromatin formation of target gene loci in mouse splenic B cells, including targets of IRF4 activation such as Aicda, an inducer of CSR, and Prdm1, a master plasma-cell regulator. Release of these gene loci from heterochromatin in response to B-cell receptor stimulation was coupled to AKT-mTOR pathway activation. In Bach2-deficient B cells, PC genes' activation depended on IRF4 protein accumulation, without an increase in Irf4 mRNA. Mechanistically, a PU.1-IRF4 heterodimer in activated B cells promoted BACH2 function by inducing gene expression of Bach2 and Pten, a negative regulator of AKT signaling. Elevated AKT activity in Bach2-deficient B cells resulted in IRF4 protein accumulation. Thus, BACH2 and IRF4 mutually modulate the activity of each other, and BACH2 inhibits PC differentiation by both the repression of PC genes and the restriction of IRF4 protein accumulation.
TANK Binding Kinase 1 Promotes BACH1 Degradation through Both Phosphorylation-Dependent and -Independent Mechanisms without Relying on Heme and FBXO22. 国際誌

Liang Liu, Mitsuyo Matsumoto, Miki Watanabe-Matsui, Tadashi Nakagawa, Yuko Nagasawa, Jingyao Pang, Bert K K Callens, Akihiko Muto, Kyoko Ochiai, Hirotaka Takekawa, Mahabub Alam, Hironari Nishizawa, Mikako Shirouzu, Hiroki Shima, Keiko Nakayama, Kazuhiko Igarashi

International journal of molecular sciences　25　(8)　2024年4月9日

DOI： 10.3390/ijms25084141 　

詳細を見る詳細を閉じる

BTB and CNC homology 1 (BACH1) represses the expression of genes involved in the metabolism of iron, heme and reactive oxygen species. While BACH1 is rapidly degraded when it is bound to heme, it remains unclear how BACH1 degradation is regulated under other conditions. We found that FBXO22, a ubiquitin ligase previously reported to promote BACH1 degradation, polyubiquitinated BACH1 only in the presence of heme in a highly purified reconstitution assay. In parallel to this regulatory mechanism, TANK binding kinase 1 (TBK1), a protein kinase that activates innate immune response and regulates iron metabolism via ferritinophagy, was found to promote BACH1 degradation when overexpressed in 293T cells. While TBK1 phosphorylated BACH1 at multiple serine and threonine residues, BACH1 degradation was observed with not only the wild-type TBK1 but also catalytically impaired TBK1. The BACH1 degradation in response to catalytically impaired TBK1 was not dependent on FBXO22 but involved both autophagy-lysosome and ubiquitin-proteasome pathways judging from its suppression by using inhibitors of lysosome and proteasome. Chemical inhibition of TBK1 in hepatoma Hepa1 cells showed that TBK1 was not required for the heme-induced BACH1 degradation. Its inhibition in Namalwa B lymphoma cells increased endogenous BACH1 protein. These results suggest that TBK1 promotes BACH1 degradation in parallel to the FBXO22- and heme-dependent pathway, placing BACH1 as a downstream effector of TBK1 in iron metabolism or innate immune response.
Downregulation of ABCC3 activates MAPK signaling through accumulation of deoxycholic acid in colorectal cancer cells. 国際誌

Yukihiro Sato, Minoru Kobayashi, Masahiro Ohira, Ryo Funayama, Masamitsu Maekawa, Hideaki Karasawa, Ryosuke Kashiwagi, Yayoi Aoyama, Nariyasu Mano, Shinobu Ohnuma, Michiaki Unno, Keiko Nakayama

Cancer science　2024年4月2日

DOI： 10.1111/cas.16132 　

詳細を見る詳細を閉じる

ABCC3 (also known as MRP3) is an ATP binding cassette transporter for bile acids, whose expression is downregulated in colorectal cancer through the Wnt/β-catenin signaling pathway. However, it remained unclear how downregulation of ABCC3 expression contributes to colorectal carcinogenesis. We explored the role of ABCC3 in the progression of colorectal cancer-in particular, focusing on the regulation of bile acid export. Gene expression analysis of colorectal adenoma isolated from familial adenomatous polyposis patients revealed that genes related to bile acid secretion including ABCC3 were downregulated as early as at the stage of adenoma formation. Knockdown or overexpression of ABCC3 increased or decreased intracellular concentration of deoxycholic acid, a secondary bile acid, respectively, in colorectal cancer cells. Forced expression of ABCC3 suppressed deoxycholic acid-induced activation of MAPK signaling. Finally, we found that nonsteroidal anti-inflammatory drugs increased ABCC3 expression in colorectal cancer cells, suggesting that ABCC3 could be one of the targets for therapeutic intervention of familial adenomatous polyposis. Our data thus suggest that downregulation of ABCC3 expression contributes to colorectal carcinogenesis through the regulation of intracellular accumulation of bile acids and activity of MAPK signaling.
Nuclear pore pathology underlying multisystem proteinopathy type 3-related inclusion body myopathy. 国際誌

Rumiko Izumi, Kensuke Ikeda, Tetsuya Niihori, Naoki Suzuki, Matsuyuki Shirota, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Hitoshi Warita, Maki Tateyama, Yoko Aoki, Masashi Aoki

Annals of clinical and translational neurology　2023年12月29日

DOI： 10.1002/acn3.51977 　

詳細を見る詳細を閉じる

OBJECTIVE: Multisystem proteinopathy type 3 (MSP3) is an inherited, pleiotropic degenerative disorder caused by a mutation in heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1 (hnRNPA1), which can affect the muscle, bone, and/or nervous system. This study aimed to determine detailed histopathological features and transcriptomic profile of HNRNPA1-mutated skeletal muscles to reveal the core pathomechanism of hereditary inclusion body myopathy (hIBM), a predominant phenotype of MSP3. METHODS: Histopathological analyses and RNA sequencing of HNRNPA1-mutated skeletal muscles harboring a c.940G > A (p.D314N) mutation (NM_031157) were performed, and the results were compared with those of HNRNPA1-unlinked hIBM and control muscle tissues. RESULTS: RNA sequencing revealed aberrant alternative splicing events that predominantly occurred in myofibril components and mitochondrial respiratory complex. Enrichment analyses identified the nuclear pore complex (NPC) and nucleocytoplasmic transport as suppressed pathways. These two pathways were linked by the hub genes NUP50, NUP98, NUP153, NUP205, and RanBP2. In immunohistochemistry, these nucleoporin proteins (NUPs) were mislocalized to the cytoplasm and aggregated mostly with TAR DNA-binding protein 43 kDa and, to a lesser extent, with hnRNPA1. Based on ultrastructural observation, irregularly shaped myonuclei with deep invaginations were frequently observed in atrophic fibers, consistent with the disorganization of NPCs. Additionally, regarding the expression profiles of overall NUPs, reduced expression of NUP98, NUP153, and RanBP2 was shared with HNRNPA1-unlinked hIBMs. INTERPRETATION: The shared subset of altered NUPs in amyotrophic lateral sclerosis (ALS), as demonstrated in prior research, HNRNPA1-mutated, and HNRNPA1-unlinked hIBM muscle tissues may provide evidence regarding the underlying common nuclear pore pathology of hIBM, ALS, and MSP.
Neonatal developmental and epileptic encephalopathy with movement disorders and arthrogryposis: A case report with a novel missense variant of SCN1A. 国際誌

Yukimune Okubo, Moriei Shibuya, Haruhiko Nakamura, Aritomo Kawashima, Kaori Kodama, Wakaba Endo, Takehiko Inui, Noriko Togashi, Yu Aihara, Matsuyuki Shirota, Ryo Funayama, Tetsuya Niihori, Atsushi Fujita, Keiko Nakayama, Yoko Aoki, Naomichi Matsumoto, Shigeo Kure, Atsuo Kikuchi, Kazuhiro Haginoya

Brain & development　2023年7月11日

DOI： 10.1016/j.braindev.2023.06.009 　

詳細を見る詳細を閉じる

Variants of SCN1A represent the archetypal channelopathy associated with several epilepsy syndromes. The clinical phenotypes have recently expanded from Dravet syndrome. CASE REPORT: We present a female patient with the de novo SCN1A missense variant, c.5340G > A (p. Met1780Ile). The patient had various clinical features with neonatal onset SCN1A epileptic encephalopathy, arthrogryposis multiplex congenita, thoracic hypoplasia, thoracic scoliosis, and hyperekplexia. CONCLUSION: Our findings are compatible with neonatal developmental and epileptic encephalopathy with movement disorders and arthrogryposis; the most severe phenotype probably caused by gain-of-function variant of SCN1A. The efficacy of sodium channel blocker was also discussed. Further exploration of the phenotype-genotype relationship of SCN1A variants may lead to better pharmacological treatments and family guidance.
Genomic adaptive potential to cold environments in the invasive red swamp crayfish

Daiki X. Sato, Yuki Matsuda, Nisikawa Usio, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Takashi Makino

iScience　107267-107267　2023年7月
出版者・発行元： Elsevier BV
DOI： 10.1016/j.isci.2023.107267 　

ISSN：2589-0042
Sex-Specific Differences in the Transcriptome of the Human Dorsolateral Prefrontal Cortex in Schizophrenia. 国際誌

Zhiqian Yu, Kazuko Ueno, Ryo Funayama, Mai Sakai, Naoki Nariai, Kaname Kojima, Yoshie Kikuchi, Xue Li, Chiaki Ono, Junpei Kanatani, Jiro Ono, Kazuya Iwamoto, Kenji Hashimoto, Kengo Kinoshita, Keiko Nakayama, Masao Nagasaki, Hiroaki Tomita

Molecular neurobiology　60　(2)　1083-1098　2022年11月22日

DOI： 10.1007/s12035-022-03109-6 　

詳細を見る詳細を閉じる

Schizophrenia presents clinical and biological differences between males and females. This study investigated transcriptional profiles in the dorsolateral prefrontal cortex (DLPFC) using postmortem data from the largest RNA-sequencing (RNA-seq) database on schizophrenic cases and controls. Data for 154 male and 113 female controls and 160 male and 93 female schizophrenic cases were obtained from the CommonMind Consortium. In the RNA-seq database, the principal component analysis showed that sex effects were small in schizophrenia. After we analyzed the impact of sex-specific differences on gene expression, the female group showed more significantly changed genes compared with the male group. Based on the gene ontology analysis, the female sex-specific genes that changed were overrepresented in the mitochondrion, ATP (phosphocreatine and adenosine triphosphate)-, and metal ion-binding relevant biological processes. An ingenuity pathway analysis revealed that the differentially expressed genes related to schizophrenia in the female group were involved in midbrain dopaminergic and γ-aminobutyric acid (GABA)-ergic neurons and microglia. We used methylated DNA-binding domain-sequencing analyses and microarray to investigate the DNA methylation that potentially impacts the sex differences in gene transcription using a maternal immune activation (MIA) murine model. Among the sex-specific positional genes related to schizophrenia in the PFC of female offspring from MIA, the changes in the methylation and transcriptional expression of loci ACSBG1 were validated in the females with schizophrenia in independent postmortem samples by real-time PCR and pyrosequencing. Our results reveal potential genetic risks in the DLPFC for the sex-dependent prevalence and symptomology of schizophrenia.
A novel variant in the transmembrane 4 domain of ANO3 identified in a two-year-old girl with developmental delay and tremor. 国際誌

Yu Aihara, Matsuyuki Shirota, Atsuo Kikuchi, Yu Katata, Yu Abe, Tetsuya Niihori, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Yoko Aoki, Shigeo Kure

Journal of human genetics　2022年9月27日

DOI： 10.1038/s10038-022-01082-5 　

詳細を見る詳細を閉じる

ANO3 encodes Anoctamin-3, also known as TMEM16C, a calcium-activated chloride channel. Heterozygous variants of ANO3 can cause dystonia 24, an adult-onset focal dystonia. Some pediatric cases have been reported, but most patients were intellectually normal with some exceptions. Here, we report a two-year-old girl who showed mild to moderate developmental delay, tremor, and ataxic gait, but no obvious dystonia. Trio exome sequencing identified a heterozygous de novo missense variant NM_031418.4:c.1809T>G, p.(Asn603Lys) in the ANO3 gene. Three cases with ANO3 variants and intellectual disability have been reported, including the present case. These variants were predicted to face in the same direction on the same alpha-helix (the transmembrane 4 domain), suggesting an association between these variants and childhood-onset movement disorder with intellectual disability. In pediatric cases with developmental delay and movement disorders such as tremor and ataxia, specific variants in the transmembrane 4 domain of ANO3 may be a cause, even in the absence of dystonia.
High levels of chromosomal instability facilitate the tumor growth and sphere formation. 国際誌

Kenji Iemura, Hayato Anzawa, Ryo Funayama, Runa Iwakami, Keiko Nakayama, Kengo Kinoshita, Kozo Tanaka

Cancer science　2022年6月5日

DOI： 10.1111/cas.15457 　

詳細を見る詳細を閉じる

Most cancer cells show chromosomal instability (CIN), a condition in which chromosome missegregation occurs at high rates. Growing evidence suggests that CIN is not just a consequence, but a driving force for oncogenic transformation, although the relationship between CIN and tumorigenesis has not been fully elucidated. Here we found that conventional two-dimensional (2D) culture of HeLa cells, a cervical cancer-derived cell line, is a heterogenous population containing cells with different CIN levels. Although cells with high CIN levels (high-CIN cells) grew slower than cells with low CIN levels (low-CIN cells) in 2D monolayer culture, they formed tumors in nude mice and larger spheres in three-dimensional (3D) culture, which is more representative of the in vivo environment. The duration of mitosis was longer in high-CIN cells, implicating their higher mitotic defects. Single cell genome sequencing revealed that high-CIN cells exhibit a higher karyotype heterogeneity compared with low-CIN cells. Intriguingly, the karyotype heterogeneity was reduced in the spheres formed by high-CIN cells, suggesting that cells with growth advantages were selected, although genomic copy number changes specific for spheres were not identified. When we examined gene expression profiles, genes related to K-ras signaling were upregulated, while those related to unfolded protein response were downregulated in high-CIN cells in 3D culture compared with 2D culture, suggesting the relevance of these genes for their survival. Our data suggest that although CIN is disadvantageous in monolayer culture, it promotes the selection of cells with growth advantages under in vivo environments, which may lead to tumorigenesis.
Novel POLE mutations identified in patients with IMAGE-I syndrome cause aberrant subcellular localisation and protein degradation in the nucleus. 国際誌

Tomohiro Nakano, Yoji Sasahara, Atsuo Kikuchi, Kunihiko Moriya, Hidetaka Niizuma, Tetsuya Niihori, Matsuyuki Shirota, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Yoko Aoki, Shigeo Kure

Journal of medical genetics　59　(11)　1116-22　2022年5月9日

DOI： 10.1136/jmedgenet-2021-108300 　

詳細を見る詳細を閉じる

BACKGROUND: DNA replisome is a molecular complex that plays indispensable roles in normal DNA replication. IMAGE-I syndrome is a DNA replisome-associated genetic disease caused by biallelic mutations in the gene encoding DNA polymerase epsilon catalytic subunit 1 (POLE). However, the underlying molecular mechanisms remain largely unresolved. METHODS: The clinical manifestations in two patients with IMAGE-I syndrome were characterised. Whole-exome sequencing was performed and altered mRNA splicing and protein levels of POLE were determined. Subcellular localisation, cell cycle analysis and DNA replication stress were assessed using fibroblasts and peripheral blood from the patients and transfected cell lines to determine the functional significance of POLE mutations. RESULTS: Both patients presented with growth retardation, adrenal insufficiency, immunodeficiency and complicated diffuse large B-cell lymphoma. We identified three novel POLE mutations: namely, a deep intronic mutation, c.1226+234G>A, common in both patients, and missense (c.2593T>G) and in-frame deletion (c.711_713del) mutations in each patient. The unique deep intronic mutation produced aberrantly spliced mRNAs. All mutants showed significantly reduced, but not null, protein levels. Notably, the mutants showed severely diminished nuclear localisation, which was rescued by proteasome inhibitor treatment. Functional analysis revealed impairment of cell cycle progression and increase in the expression of phospho-H2A histone family member X in both patients. CONCLUSION: These findings provide new insights regarding the mechanism via which POLE mutants are highly susceptible to proteasome-dependent degradation in the nucleus, resulting in impaired DNA replication and cell cycle progression, a characteristic of DNA replisome-associated diseases.
SPT16 ubiquitylation by DCAF14-CRL4 regulates FACT binding to histones. 国際誌

Tadashi Nakagawa, Akane Morohoshi, Yuko Nagasawa, Makiko Nakagawa, Masaki Hosogane, Yasuhiro Noda, Toru Hosoi, Keiko Nakayama

Cell reports　38　(12)　110541-110541　2022年3月22日

DOI： 10.1016/j.celrep.2022.110541 　

詳細を見る詳細を閉じる

The histone chaperone complex FACT comprises SPT16 and SSRP1 and contributes to DNA replication, transcription, and repair, but how it plays such various roles is unclear. Here, we show that human SPT16 is ubiquitylated at lysine-674 (K674) by the DCAF14-CRL4 ubiquitin ligase. K674 is located in the middle domain of SPT16, and the corresponding residue of the yeast ortholog is critical for binding to histone H3.1-H4. We show that the middle domain of human SPT16 binds to histone H3.1-H4 and that this binding is inhibited by K674 ubiquitylation. Cells with heterozygous knockin of a K674R mutant of SPT16 manifest reduction of both SPT16 ubiquitylation and H3.1 in chromatin, a reduced population in mid S phase, impaired proliferation, and increased susceptibility to S phase stress. Our data thus indicate that SPT16 ubiquitylation by DCAF14-CRL4 regulates FACT binding to histones and may thereby control DNA replication-coupled histone incorporation into chromatin.
幅広い臨床症状を呈したMECOM遺伝子変異を同定した2家系

新堀哲也, 田野島玲大, 笹原洋二, 佐藤篤, 入江正寛, 南條由佳, 舟山亮, 城田松之, 阿部太紀, 奥山祐子, 石井直人, 中山啓子, 呉繁夫, 今泉益栄, 青木洋子

日本小児科学会雑誌　126　(2)　230-230　2022年2月
出版者・発行元： (公社)日本小児科学会
ISSN：0001-6543
Heterozygous calcyclin-binding protein/Siah1-interacting protein (CACYBP/SIP) gene pathogenic variant linked to a dominant family with paucity of interlobular bile duct. 国際誌

Miyako Kanno, Mitsuyoshi Suzuki, Ken Tanikawa, Chikahiko Numakura, Shu-Ichi Matsuzawa, Tetsuya Niihori, Yoko Aoki, Yoichi Matsubara, Satoshi Makino, Gen Tamiya, Satoshi Nakano, Ryo Funayama, Matsuyuki Shirota, Keiko Nakayama, Tetsuo Mitsui, Kiyoshi Hayasaka

Journal of human genetics　67　(7)　393-397　2022年1月28日

DOI： 10.1038/s10038-022-01017-0 　

詳細を見る詳細を閉じる

Paucity of interlobular bile ducts (PILBD) is a heterogeneous disorder classified into two categories, syndromic and non-syndromic bile duct paucity. Syndromic PILBD is characterized by the presence of clinical manifestations of Alagille syndrome. Non-syndromic PILBD is caused by multiple diseases, such as metabolic and genetic disorders, infectious diseases, and inflammatory and immune disorders. We evaluated a family with a dominantly inherited PILBD, who presented with cholestasis at 1-2 months of age but spontaneously improved by 1 year of age. Next-generation sequencing analysis revealed a heterozygous CACYBP/SIP p.E177Q pathogenic variant. Calcyclin-binding protein and Siah1 interacting protein (CACYBP/SIP) form a ubiquitin ligase complex and induce proteasomal degradation of non-phosphorylated β-catenin. Immunohistochemical analysis revealed a slight decrease in CACYBP and β-catenin levels in the liver of patients in early infancy, which almost normalized by 13 months of age. The CACYBP/SIP p.E177Q pathogenic variant may form a more active or stable ubiquitin ligase complex that enhances the degradation of β-catenin and delays the maturation of intrahepatic bile ducts. Our findings indicate that accurate regulation of the β-catenin concentration is essential for the development of intrahepatic bile ducts and CACYBP/SIP pathogenic variant is a novel cause of PILDB.
Phenotypic heterogeneity in individuals with MECOM variants in 2 families. 国際誌

Tetsuya Niihori, Reo Tanoshima, Yoji Sasahara, Atsushi Sato, Masahiro Irie, Yuka Saito-Nanjo, Ryo Funayama, Matsuyuki Shirota, Taiki Abe, Yuko Okuyama, Naoto Ishii, Keiko Nakayama, Shigeo Kure, Masue Imaizumi, Yoko Aoki

Blood advances　6　(18)　5257-5261　2022年1月12日

DOI： 10.1182/bloodadvances.2020003812 　

詳細を見る詳細を閉じる

MECOM encodes the transcriptional regulators, EVI1 and MDS1-EVI1, from two distinct transcription start sites. EVI1 plays important roles in hematopoiesis and stem cell self-renewal. Recently, our group and others revealed that individuals with MECOM variants present diverse hematological and skeletal defects, including radioulnar synostosis (RUS). In the present study, we analyzed two families suspected with MECOM-associated syndrome. In family 1, a MECOM splicing variant (c.2285+1G>A) was identified in an individual with bone marrow failure (TRS4) without RUS and her mother, who had mild leukocytopenia, thrombocytopenia, and bilateral RUS. A copy neutral loss of heterozygosity decreasing the variant allele frequency was observed in the bone marrow of TRS4 and the peripheral blood leukocytes of her mother. However, TRS4 remained transfusion-dependent. In family 2, a MECOM variant (c.2208-4A>G), which was predicted to cause a cryptic acceptor site that results in a 3-base insertion (an insertion of Ser) in the mRNA, was identified in the proband, with bone marrow failure; this variant was also observed in her brother and father, both of whom have skeletal malformations, but no cytopenia. RT-PCR using leukocytes revealed a transcript with a 3-bp insertion in the proband, her brother, and the father, suggesting that the transcript variant with a 3-bp insertion is independent of blood phenotype. Collectively, these results suggest the presence of intrafamilial clinical heterogeneity in both families with MECOM splicing variants. Somatic genetic event may complicate the understanding of clinical variability among family members.
Neurobehavioral characteristics of mice with SETD5 mutations as models of IDD23 and KBG syndromes. 国際誌

Tadashi Nakagawa, Satoko Hattori, Toru Hosoi, Keiko Nakayama

Frontiers in genetics　13　1022339-1022339　2022年

DOI： 10.3389/fgene.2022.1022339 　

詳細を見る詳細を閉じる

Genomic analysis has revealed that the genes for various chromatin regulators are mutated in many individuals with neurodevelopmental disorders (NDDs), emphasizing the important role of chromatin regulation in nervous system development and function. Chromatin regulation is mediated by writers, readers, and erasers of histone and DNA modifications, with such proteins being defined by specific domains. One of these domains is the SET domain, which is present in enzymes that catalyze histone methylation. Heterozygous loss-of-function mutations of the SETD5 (SET domain containing 5) gene have been identified in individuals with an NDD designated IDD23 (intellectual developmental disorder, autosomal dominant 23). KBG syndrome (named after the initials of the last names of the first three families identified with the condition) is characterized by features that either overlap with or are distinct from those of IDD23 and was initially thought to be caused only by mutations in the ANKRD11 (ankyrin repeat domain containing 11) gene. However, recent studies have identified SETD5 mutations in some KBG syndrome patients without ANKRD11 mutations. Here we summarize the neurobehavioral characterization of Setd5 +/- mice performed by four independent research groups, compare IDD23 and KBG phenotypes, and address the utility and future development of mouse models for elucidation of the mechanisms underlying NDD pathogenesis, with a focus on SETD5 and its related proteins.
Wnt5a in cancer-associated fibroblasts promotes colorectal cancer progression. 国際誌

Tomoaki Hirashima, Hideaki Karasawa, Takashi Aizawa, Takashi Suzuki, Akihiro Yamamura, Hideyuki Suzuki, Taiki Kajiwara, Hiroaki Musha, Ryo Funayama, Matsuyuki Shirota, Shinobu Ohnuma, Keiko Nakayama, Michiaki Unno

Biochemical and biophysical research communications　568　37-42　2021年9月3日

DOI： 10.1016/j.bbrc.2021.06.062 　

詳細を見る詳細を閉じる

Cancer-associated fibroblasts (CAFs) are a major component of the tumor microenvironment and have been shown to promote cancer aggressiveness. In our previous study, analysis of expression profiles obtained from paired CAFs and normal fibroblasts from colorectal cancer (CRC) tissue revealed that gene sets related to the Wnt signaling pathway were highly enriched in colorectal CAFs. Furthermore, among the components of the β-catenin-independent Wnt pathway, Wnt5a was highly expressed in CAFs. Since Wnt5a is considered to be a regulator of CRC progression in CAFs, we performed immunohistochemical analysis on Wnt5a in 171 patients who underwent surgery for CRC. Positive staining for Wnt5a was often found in cancer stroma, particularly in fibromatous areas, although the immunoreactivity for Wnt5a was weak in cancer cells. Wnt5a status in CAFs was significantly associated with tumor size, depth of invasion, lymphatic and vascular invasion, lymph node metastasis, TNM stage, and recurrence. Subsequent in vitro analyses using human recombinant Wnt5a protein revealed that cancer cell proliferation and migration were significantly increased by stimulation with Wnt5a. Our findings suggest that Wnt5a-derived CAFs play a crucial role in CRC progression and have potential as a target of anti-cancer therapies.
LSS欠損症における組織特異的モデルマウスを用いた代謝および病理プロファイル

和田陽一, 菊池敦生, 加賀元宗, 清水直紀, 伊藤隼哉, 新堀哲也, 佐藤孝太, 中澤徹, 中山啓子, 青木洋子, 仲川清隆, 呉繁夫

日本先天代謝異常学会雑誌　37　126-126　2021年9月
出版者・発行元： (一社)日本先天代謝異常学会
ISSN：0912-0122
幹細胞から赤血球への通り道メチオニン代謝によるエピゲノム調節をかいした赤血球造血制御(Methionine metabolism controls erythropoiesis by epigenetic regulation)

加藤浩貴, Long Nugyen, 石井悠翔, 松本光代, 三枝大輔, 舟山亮, 岡江寛明, 藤原亨, 武藤哲彦, 中山啓子, 有馬隆博, Scadden David, 五十嵐和彦, 張替秀郎

日本血液学会学術集会　83回　PSY-4　2021年9月
出版者・発行元： (一社)日本血液学会
LSS欠損症における組織特異的モデルマウスを用いた代謝および病理プロファイル

和田陽一, 菊池敦生, 加賀元宗, 清水直紀, 伊藤隼哉, 新堀哲也, 佐藤孝太, 中澤徹, 中山啓子, 青木洋子, 仲川清隆, 呉繁夫

日本先天代謝異常学会雑誌　37　126-126　2021年9月
出版者・発行元： (一社)日本先天代謝異常学会
ISSN：0912-0122
Alternative microexon splicing by RBFOX2 and PTBP1 is associated with metastasis in colorectal cancer. 国際誌

Yasushi Mochizuki, Ryo Funayama, Matsuyuki Shirota, Yuna Kikukawa, Masahiro Ohira, Hideaki Karasawa, Minoru Kobayashi, Shinobu Ohnuma, Michiaki Unno, Keiko Nakayama

International journal of cancer　149　(10)　1787-1800　2021年8月4日

DOI： 10.1002/ijc.33758 　

詳細を見る詳細を閉じる

The splicing of microexons (very small exons) is frequently dysregulated in the brain of individuals with autism spectrum disorder. However, little is known of the patterns, regulatory mechanisms, and roles of microexon splicing in cancer. We here examined the transcriptome-wide profile of microexon splicing in matched colorectal cancer (CRC) and normal tissue specimens. Out of 1492 microexons comprising 3 to 15 nucleotides, 21 (1%) manifested differential splicing between CRC and normal tissue. The 21 genes harboring the differentially spliced microexons were enriched in gene ontology terms related to cell adhesion and migration. RNA interference-mediated knockdown experiments identified two splicing factors, RBFOX2 and PTBP1, as regulators of microexon splicing in CRC cells. RBFOX2 and PTBP1 were found to directly bind to microexon-containing pre-mRNAs and to control their splicing in such cells. Differential microexon splicing was shown to be due, at least in part, to altered expression of RBFOX2 and PTBP1 in CRC tissue compared with matched normal tissue. Finally, we found that changes in the pattern of microexon splicing were associated with CRC metastasis. Our data thus suggest that altered expression of RBFOX2 and PTBP1 might influence CRC metastasis through the regulation of microexon splicing.
Reduced PHOX2B stability causes axonal growth impairment in motor neurons with TARDBP mutations. 国際誌

Shio Mitsuzawa, Naoki Suzuki, Tetsuya Akiyama, Mitsuru Ishikawa, Takefumi Sone, Jiro Kawada, Ryo Funayama, Matsuyuki Shirota, Hiroaki Mitsuhashi, Satoru Morimoto, Kensuke Ikeda, Tomomi Shijo, Akiyuki Ohno, Naoko Nakamura, Hiroya Ono, Risako Ono, Shion Osana, Tadashi Nakagawa, Ayumi Nishiyama, Rumiko Izumi, Shohei Kaneda, Yoshiho Ikeuchi, Keiko Nakayama, Teruo Fujii, Hitoshi Warita, Hideyuki Okano, Masashi Aoki

Stem cell reports　16　(6)　1527-1541　2021年6月8日

DOI： 10.1016/j.stemcr.2021.04.021 　

詳細を見る詳細を閉じる

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is an adult-onset incurable motor neuron (MN) disease. The reasons for selective MN vulnerability in ALS are unknown. Axonal pathology is among the earliest signs of ALS. We searched for novel modulatory genes in human MN axon shortening affected by TARDBP mutations. In transcriptome analysis of RNA present in the axon compartment of human-derived induced pluripotent stem cell (iPSC)-derived MNs, PHOX2B (paired-like homeobox protein 2B) showed lower expression in TARDBP mutant axons, which was consistent with axon qPCR and in situ hybridization. PHOX2B mRNA stability was reduced in TARDBP mutant MNs. Furthermore, PHOX2B knockdown reduced neurite length in human MNs. Finally, phox2b knockdown in zebrafish induced short spinal axons and impaired escape response. PHOX2B is known to be highly express in other types of neurons maintained after ALS progression. Collectively, TARDBP mutations induced loss of axonal resilience, which is an important ALS-related phenotype mediated by PHOX2B downregulation.
A novel deletion in the C-terminal region of HSPB8 in a family with rimmed vacuolar myopathy. 国際誌

Aya Inoue-Shibui, Tetsuya Niihori, Michio Kobayashi, Naoki Suzuki, Rumiko Izumi, Hitoshi Warita, Kenju Hara, Matsuyuki Shirota, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Ichizo Nishino, Masashi Aoki, Yoko Aoki

Journal of human genetics　66　(10)　965-972　2021年3月20日

DOI： 10.1038/s10038-021-00916-y 　

詳細を見る詳細を閉じる

Heat shock protein family B member 8, encoded by HSPB8, is an essential component of the chaperone-assisted selective autophagy complex, which maintains muscle function by degrading damaged proteins in the cells. Mutations in HSPB8 have been reported to cause Charcot-Marie-Tooth type 2L, distal hereditary motor neuropathy IIa, and rimmed vacuolar myopathies (RVM). In this study, we identified a novel heterozygous frameshift variant c.525_529del in HSPB8 in a large Japanese family with RVM, using whole exome sequencing. Three affected individuals had severe respiratory failure, which has not been addressed by previous studies. Muscle atrophy in the paraspinal muscles was also a clinical feature of the individuals affected with RVM in this study. The frameshift mutation was located in the last coding exon, and the mutated protein was predicted to harbor an isoleucine-leucine-valine (ILV) sequence, which corresponds to the IXI/V (isoleucine, X amino acids, and isoleucine or valine) motif. The IXI/V motif is essential for assembly into larger oligomers in other small heat shock proteins and all frameshift mutants of HSPB8 were predicted to share the ILV sequence in the C-terminal extension. The in silico prediction tools showed low protein solubility and increased aggregation propensity for the region around the ILV sequence. The IXI/V motif might be associated with the pathogenesis of HSPB8-related RVM.
Senolysis by glutaminolysis inhibition ameliorates various age-associated disorders. 国際誌査読有り

Johmura Y, Yamanaka T, Omori S, Wang T, Sugiura Y, Matsumoto M, Suzuki N, Kumamoto S, Yamaguchi K, Hatakeyama S, Takami T, Yamaguchi R, Shimizu E, Ikeda K, Okahashi N, Mikawa R, Suematsu M, Arita M, Sugimoto M, Nakayama K, Furukawa Y, Imoto S, Nakanishi M

Science　371　(6526)　265-270　2021年1月15日

DOI： 10.1126/science.abb5916 　
Chromatin Protein PC4 Orchestrates B Cell Differentiation by Collaborating with IKAROS and IRF4. 国際誌

Kyoko Ochiai, Mari Yamaoka, Amrutha Swaminathan, Hiroki Shima, Hitoshi Hiura, Mitsuyo Matsumoto, Daisuke Kurotaki, Jun Nakabayashi, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Takahiro Arima, Tomokatsu Ikawa, Tomohiko Tamura, Roger Sciammas, Philippe Bouvet, Tapas K Kundu, Kazuhiko Igarashi

Cell reports　33　(12)　108517-108517　2020年12月22日

DOI： 10.1016/j.celrep.2020.108517 　

詳細を見る詳細を閉じる

The chromatin protein positive coactivator 4 (PC4) has multiple functions, including chromatin compaction. However, its role in immune cells is largely unknown. We show that PC4 orchestrates chromatin structure and gene expression in mature B cells. B-cell-specific PC4-deficient mice show impaired production of antibody upon antigen stimulation. The PC4 complex purified from B cells contains the transcription factors (TFs) IKAROS and IRF4. IKAROS protein is reduced in PC4-deficient mature B cells, resulting in de-repression of their target genes in part by diminished interactions with gene-silencing components. Upon activation, the amount of IRF4 protein is not increased in PC4-deficient B cells, resulting in reduction of plasma cells. Importantly, IRF4 reciprocally induces PC4 expression via a super-enhancer. PC4 knockdown in human B cell lymphoma and myeloma cells reduces IKAROS protein as an anticancer drug, lenalidomide. Our findings establish PC4 as a chromatin regulator of B cells and a possible therapeutic target adjoining IKAROS in B cell malignancies.
がん研究における女性研究者(WSCR) 大腸がん患者から学んだこと

中山啓子, 舟山亮, 望月保志, 小林実

日本癌学会総会記事　79回　SS2-6　2020年10月
出版者・発行元： (一社)日本癌学会
ISSN：0546-0476
An Amyotrophic Lateral Sclerosis-Associated Mutant of C21ORF2 Is Stabilized by NEK1-Mediated Hyperphosphorylation and the Inability to Bind FBXO3. 国際誌

Yasuaki Watanabe, Tadashi Nakagawa, Tetsuya Akiyama, Makiko Nakagawa, Naoki Suzuki, Hitoshi Warita, Masashi Aoki, Keiko Nakayama

iScience　23　(9)　101491-101491　2020年8月21日

DOI： 10.1016/j.isci.2020.101491 　

詳細を見る詳細を閉じる

C21ORF2 and NEK1 have been identified as amyotrophic lateral sclerosis (ALS)-associated genes. Both genes are also mutated in certain ciliopathies, suggesting that they might contribute to the same signaling pathways. Here we show that FBXO3, the substrate receptor of an SCF ubiquitin ligase complex, binds and ubiquitylates C21ORF2, thereby targeting it for proteasomal degradation. C21ORF2 stabilizes the kinase NEK1, with the result that loss of FBXO3 stabilizes not only C21ORF2 but also NEK1. Conversely, NEK1-mediated phosphorylation stabilizes C21ORF2 by attenuating its interaction with FBXO3. We found that the ALS-associated V58L mutant of C21ORF2 is more susceptible to phosphorylation by NEK1, with the result that it is not ubiquitylated by FBXO3 and therefore accumulates together with NEK1. Expression of C21ORF2(V58L) in motor neurons induced from mouse embryonic stem cells impaired neurite outgrowth. We suggest that inhibition of NEK1 activity is a potential therapeutic approach to ALS associated with C21ORF2 mutation.
Correction: Biallelic GALM pathogenic variants cause a novel type of galactosemia. 国際誌

Yoichi Wada, Atsuo Kikuchi, Natsuko Arai-Ichinoi, Osamu Sakamoto, Yusuke Takezawa, Shinya Iwasawa, Tetsuya Niihori, Hiromi Nyuzuki, Yoko Nakajima, Erika Ogawa, Mika Ishige, Hiroki Hirai, Hideo Sasai, Ryoji Fujiki, Matsuyuki Shirota, Ryo Funayama, Masayuki Yamamoto, Tetsuya Ito, Osamu Ohara, Keiko Nakayama, Yoko Aoki, Seizo Koshiba, Toshiyuki Fukao, Shigeo Kure

Genetics in medicine : official journal of the American College of Medical Genetics　22　(7)　1281-1281　2020年7月

DOI： 10.1038/s41436-020-0836-z 　

詳細を見る詳細を閉じる

An amendment to this paper has been published and can be accessed via a link at the top of the paper.
Variants That Affect Function of Calcium Channel TRPV6 Are Associated With Early-Onset Chronic Pancreatitis. 国際誌査読有り

Atsushi Masamune, Hiroshi Kotani, Franziska Lena Sörgel, Jian-Min Chen, Shin Hamada, Reiko Sakaguchi, Emmanuelle Masson, Eriko Nakano, Yoichi Kakuta, Tetsuya Niihori, Ryo Funayama, Matsuyuki Shirota, Tatsuya Hirano, Tetsuya Kawamoto, Atsuki Hosokoshi, Kiyoshi Kume, Lara Unger, Maren Ewers, Helmut Laumen, Peter Bugert, Masayuki X Mori, Volodymyr Tsvilovskyy, Petra Weißgerber, Ulrich Kriebs, Claudia Fecher-Trost, Marc Freichel, Kalliope N Diakopoulos, Alexandra Berninger, Marina Lesina, Kentaro Ishii, Takao Itoi, Tsukasa Ikeura, Kazuichi Okazaki, Tom Kaune, Jonas Rosendahl, Masao Nagasaki, Yasuhito Uezono, Hana Algül, Keiko Nakayama, Yoichi Matsubara, Yoko Aoki, Claude Férec, Yasuo Mori, Heiko Witt, Tooru Shimosegawa

Gastroenterology　158　(6)　1626-1641　2020年5月

DOI： 10.1053/j.gastro.2020.01.005 　

詳細を見る詳細を閉じる

BACKGROUND & AIMS: Changes in pancreatic calcium levels affect secretion and might be involved in development of chronic pancreatitis (CP). We investigated the association of CP with the transient receptor potential cation channel subfamily V member 6 gene (TRPV6), which encodes a Ca2+-selective ion channel, in an international cohort of patients and in mice. METHODS: We performed whole-exome DNA sequencing from a patient with idiopathic CP and from his parents, who did not have CP. We validated our findings by sequencing DNA from 300 patients with CP (not associated with alcohol consumption) and 1070 persons from the general population in Japan (control individuals). In replication studies, we sequenced DNA from patients with early-onset CP (20 years or younger) not associated with alcohol consumption from France (n = 470) and Germany (n = 410). We expressed TRPV6 variants in HEK293 cells and measured their activity using Ca2+ imaging assays. CP was induced by repeated injections of cerulein in TRPV6mut/mut mice. RESULTS: We identified the variants c.629C>T (p.A210V) and c.970G>A (p.D324N) in TRPV6 in the index patient. Variants that affected function of the TRPV6 product were found in 13 of 300 patients (4.3%) and 1 of 1070 control individuals (0.1%) from Japan (odds ratio [OR], 48.4; 95% confidence interval [CI], 6.3-371.7; P = 2.4 × 10-8). Twelve of 124 patients (9.7%) with early-onset CP had such variants. In the replication set from Europe, 18 patients with CP (2.0%) carried variants that affected the function of the TRPV6 product compared with 0 control individuals (P = 6.2 × 10-8). Variants that did not affect the function of the TRPV6 product (p.I223T and p.D324N) were overrepresented in Japanese patients vs control individuals (OR, 10.9; 95% CI, 4.5-25.9; P = 7.4 × 10-9 for p.I223T and P = .01 for p.D324N), whereas the p.L299Q was overrepresented in European patients vs control individuals (OR, 3.0; 95% CI, 1.9-4.8; P = 1.2 × 10-5). TRPV6mut/mut mice given cerulein developed more severe pancreatitis than control mice, as shown by increased levels of pancreatic enzymes, histologic alterations, and pancreatic fibrosis. CONCLUSIONS: We found that patients with early-onset CP not associated with alcohol consumption carry variants in TRPV6 that affect the function of its product, perhaps by altering Ca2+ balance in pancreatic cells. TRPV6 regulates Ca2+ homeostasis and pancreatic inflammation.
Longitudinal plasma amino acid profiling with maternal genomic background throughout human pregnancy 国際誌査読有り

Matsuyuki Shirota, Daisuke Saigusa, Riu Yamashita, Yasutake Kato, Mitsuyo Matsumoto, Junya Yamagishi, Noriko Ishida, Kazuki Kumada, Yuji Oe, Hisaaki Kudo, Junji Yokozawa, Yoko Kuroki, Ikuko Motoike, Fumiki Katsuoka, Masao Nagasaki, Seizo Koshiba, Keiko Nakayama, Osamu Tanabe, Jun Yasuda, Shigeo Kure, Kengo Kinoshita, Hirohito Metoki, Shinichi Kuriyama, Nobuo Yaegashi, Masayuki Yamamoto, Junichi Sugawara

Medical Mass Spectrometry　4　(1)　36-49　2020年4月16日

DOI： 10.24508/mms.2020.06.001 　
The Autism-Related Protein SETD5 Controls Neural Cell Proliferation through Epigenetic Regulation of rDNA Expression. 国際誌査読有り

Tadashi Nakagawa, Satoko Hattori, Risa Nobuta, Ryuichi Kimura, Makiko Nakagawa, Masaki Matsumoto, Yuko Nagasawa, Ryo Funayama, Tsuyoshi Miyakawa, Toshifumi Inada, Noriko Osumi, Keiichi I Nakayama, Keiko Nakayama

iScience　23　(4)　101030-101030　2020年4月6日

DOI： 10.1016/j.isci.2020.101030 　

詳細を見る詳細を閉じる

Haploinsufficiency of SETD5 is implicated in syndromic autism spectrum disorder (ASD), but the molecular mechanism underlying the pathological role of this protein has remained unclear. We have now shown that Setd5+/- mice manifest ASD-related behavioral phenotypes and that the expression of ribosomal protein genes and rDNA is disturbed in the brain of these mice. SETD5 recruited the HDAC3 complex to the rDNA promoter, resulting in removal of the histone mark H4K16ac and its reader protein TIP5, a repressor of rDNA expression. Depletion of SETD5 attenuated rDNA expression, translational activity, and neural cell proliferation, whereas ablation of TIP5 in SETD5-deficient cells rescued these effects. Translation of cyclin D1 mRNA was specifically down-regulated in SETD5-insufficient cells. Our results thus suggest that SETD5 positively regulates rDNA expression via an HDAC3-mediated epigenetic mechanism and that such regulation is essential for translation of cyclin D1 mRNA and neural cell proliferation.
BACH1 Promotes Pancreatic Cancer Metastasis by Repressing Epithelial Genes and Enhancing Epithelial-Mesenchymal Transition. 国際誌査読有り

Masaki Sato, Mitsuyo Matsumoto, Yuriko Saiki, Mahabub Alam, Hironari Nishizawa, Masahiro Rokugo, Andrey Brydun, Shinji Yamada, Mika K Kaneko, Ryo Funayama, Mamoru Ito, Yukinari Kato, Keiko Nakayama, Michiaki Unno, Kazuhiko Igarashi

Cancer research　80　(6)　1279-1292　2020年3月15日

DOI： 10.1158/0008-5472.CAN-18-4099 　

詳細を見る詳細を閉じる

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is among the cancers with the poorest prognoses due to its highly malignant features. BTB and CNC homology 1 (BACH1) has been implicated in RAS-driven tumor formation. We focused on the role of BACH1 in PDAC, more than 90% of which have KRAS mutation. Knockdown of BACH1 in PDAC cell lines reduced cell migration and invasion, in part, by increasing E-cadherin expression, whereas its overexpression showed opposite effects. BACH1 directly repressed the expression of FOXA1 that is known to activate the expression of CDH1 encoding E-cadherin and to inhibit epithelial-to-mesenchymal transition. BACH1 also directly repressed the expression of genes important for epithelial cell adhesion including CLDN3 and CLDN4. In a mouse orthotopic implantation model, BACH1 was required for the high metastatic ability of AsPC-1 cells. IHC analysis of clinical specimens with a newly developed anti-BACH1 mAb revealed that high expression of BACH1 is a poor prognostic factor. These results suggest that the gene regulatory network of BACH1 and downstream genes including CDH1 contribute to the malignant features of PDAC by regulating epithelial-to-mesenchymal transition. SIGNIFICANCE: Greater understanding of the gene regulatory network involved in epithelial-to-mesenchymal transition of pancreatic cancer cells will provide novel therapeutic targets and diagnostic markers.
Metabolic and pathologic profiles of human LSS deficiency recapitulated in mice. 国際誌査読有り

Yoichi Wada, Atsuo Kikuchi, Akimune Kaga, Naoki Shimizu, Junya Ito, Ryo Onuma, Fumiyoshi Fujishima, Eriko Totsune, Ryo Sato, Tetsuya Niihori, Matsuyuki Shirota, Ryo Funayama, Kota Sato, Toru Nakazawa, Keiko Nakayama, Yoko Aoki, Setsuya Aiba, Kiyotaka Nakagawa, Shigeo Kure

PLoS genetics　16　(2)　e1008628　2020年2月

DOI： 10.1371/journal.pgen.1008628 　

詳細を見る詳細を閉じる

Skin lesions, cataracts, and congenital anomalies have been frequently associated with inherited deficiencies in enzymes that synthesize cholesterol. Lanosterol synthase (LSS) converts (S)-2,3-epoxysqualene to lanosterol in the cholesterol biosynthesis pathway. Biallelic mutations in LSS have been reported in families with congenital cataracts and, very recently, have been reported in cases of hypotrichosis. However, it remains to be clarified whether these phenotypes are caused by LSS enzymatic deficiencies in each tissue, and disruption of LSS enzymatic activity in vivo has not yet been validated. We identified two patients with novel biallelic LSS mutations who exhibited congenital hypotrichosis and midline anomalies but did not have cataracts. We showed that the blockade of the LSS enzyme reaction occurred in the patients by measuring the (S)-2,3-epoxysqualene/lanosterol ratio in the forehead sebum, which would be a good biomarker for the diagnosis of LSS deficiency. Epidermis-specific Lss knockout mice showed neonatal lethality due to dehydration, indicating that LSS could be involved in skin barrier integrity. Tamoxifen-induced knockout of Lss in the epidermis caused hypotrichosis in adult mice. Lens-specific Lss knockout mice had cataracts. These results confirmed that LSS deficiency causes hypotrichosis and cataracts due to loss-of-function mutations in LSS in each tissue. These mouse models will lead to the elucidation of the pathophysiological mechanisms associated with disrupted LSS and to the development of therapeutic treatments for LSS deficiency.
Cohort Profile: Tohoku Medical Megabank Project Birth and Three-Generation Cohort Study (TMM BirThree Cohort Study): rationale, progress and perspective. 国際誌査読有り

Shinichi Kuriyama, Hirohito Metoki, Masahiro Kikuya, Taku Obara, Mami Ishikuro, Chizuru Yamanaka, Masato Nagai, Hiroko Matsubara, Tomoko Kobayashi, Junichi Sugawara, Gen Tamiya, Atsushi Hozawa, Naoki Nakaya, Naho Tsuchiya, Tomohiro Nakamura, Akira Narita, Mana Kogure, Takumi Hirata, Ichiro Tsuji, Fuji Nagami, Nobuo Fuse, Tomohiko Arai, Yoshio Kawaguchi, Shinichi Higuchi, Masaki Sakaida, Yoichi Suzuki, Noriko Osumi, Keiko Nakayama, Kiyoshi Ito, Shinichi Egawa, Koichi Chida, Eiichi Kodama, Hideyasu Kiyomoto, Tadashi Ishii, Akito Tsuboi, Hiroaki Tomita, Yasuyuki Taki, Hiroshi Kawame, Kichiya Suzuki, Naoto Ishii, Soichi Ogishima, Satoshi Mizuno, Takako Takai-Igarashi, Naoko Minegishi, Jun Yasuda, Kazuhiko Igarashi, Ritsuko Shimizu, Masao Nagasaki, Osamu Tanabe, Seizo Koshiba, Hiroaki Hashizume, Hozumi Motohashi, Teiji Tominaga, Sadayoshi Ito, Kozo Tanno, Kiyomi Sakata, Atsushi Shimizu, Jiro Hitomi, Makoto Sasaki, Kengo Kinoshita, Hiroshi Tanaka, Tadao Kobayashi, Shigeo Kure, Nobuo Yaegashi, Masayuki Yamamoto

International journal of epidemiology　49　(1)　18-19　2020年2月1日

DOI： 10.1093/ije/dyz169 　

ISSN：0300-5771
Study profile of The Tohoku Medical Megabank Community-Based Cohort Study. 査読有り

Atsushi Hozawa, Kozo Tanno, Naoki Nakaya, Tomohiro Nakamura, Naho Tsuchiya, Takumi Hirata, Akira Narita, Mana Kogure, Kotaro Nochioka, Ryohei Sasaki, Nobuyuki Takanashi, Kotaro Otsuka, Kiyomi Sakata, Shinichi Kuriyama, Masahiro Kikuya, Osamu Tanabe, Junichi Sugawara, Kichiya Suzuki, Yoichi Suzuki, Eiichi N Kodama, Nobuo Fuse, Hideyasu Kiyomoto, Hiroaki Tomita, Akira Uruno, Yohei Hamanaka, Hirohito Metoki, Mami Ishikuro, Taku Obara, Tomoko Kobayashi, Kazuyuki Kitatani, Takako Takai-Igarashi, Soichi Ogishima, Mamoru Satoh, Hideki Ohmomo, Akito Tsuboi, Shinichi Egawa, Tadashi Ishii, Kiyoshi Ito, Sadayoshi Ito, Yasuyuki Taki, Naoko Minegishi, Naoto Ishii, Masao Nagasaki, Kazuhiko Igarashi, Seizo Koshiba, Ritsuko Shimizu, Gen Tamiya, Keiko Nakayama, Hozumi Motohashi, Jun Yasuda, Atsushi Shimizu, Tsuyoshi Hachiya, Yuh Shiwa, Teiji Tominaga, Hiroshi Tanaka, Kotaro Oyama, Ryoichi Tanaka, Hiroshi Kawame, Akimune Fukushima, Yasushi Ishigaki, Tomoharu Tokutomi, Noriko Osumi, Tadao Kobayashi, Fuji Nagami, Hiroaki Hashizume, Tomohiro Arai, Yoshio Kawaguchi, Shinichi Higuchi, Masaki Sakaida, Ryujin Endo, Satoshi Nishizuka, Ichiro Tsuji, Jiro Hitomi, Motoyuki Nakamura, Kuniaki Ogasawara, Nobuo Yaegashi, Kengo Kinoshita, Shigeo Kure, Akio Sakai, Seiichiro Kobayashi, Kenji Sobue, Makoto Sasaki, Masayuki Yamamoto

Journal of epidemiology　31　(1)　65-76　2020年1月11日

DOI： 10.2188/jea.JE20190271 　

詳細を見る詳細を閉じる

BackgroundWe established a community-based cohort study to assess the long-term impact of the Great East Japan Earthquake on disaster victims and gene-environmental interactions on the incidence of major diseases such as cancer and cardiovascular diseases.MethodsWe asked participants to join our cohort in the health check-up settings and assessment center based settings. Inclusion criteria was aged 20 years or over and living in Miyagi or Iwate Prefecture. We obtained information on lifestyle, effect of disaster, blood, and urine information (Type 1 survey), and some detailed measurements (Type 2 survey), for example, carotid echography, calcaneal ultrasound bone mineral density, and so on. All participants agreed to measure genome information and to distribute their information widely.ResultsAs a result, 87,865 gave their informed consent to join our study. Participation rate at health check-up site was about 70%. The participants with Type 1 survey were more likely to have psychological distress than those of Type 2 survey, and women were more likely to have psychological distress than men. Additionally, coastal residents were more likely to have higher degrees of psychological distress than inland residents regardless of sex.ConclusionThis cohort comprised large sample size and it contains information on disaster, genome information, and metabolome information. This cohort also had several detailed measurements. Using this cohort enabled us to clarify the long-term effect of disaster and also to establish personalized prevention based on genome, metabolome, and other omics information.
Knockout Mouse Models Provide Insight into the Biological Functions of CRL1 Components. 国際誌査読有り

Tadashi Nakagawa, Keiko Nakayama, Keiichi I Nakayama

Advances in experimental medicine and biology　1217　147-171　2020年

DOI： 10.1007/978-981-15-1025-0_10 　

詳細を見る詳細を閉じる

The CRL1 complex, also known as the SCF complex, is a ubiquitin ligase that in mammals consists of an adaptor protein (SKP1), a scaffold protein (CUL1), a RING finger protein (RBX1, also known as ROC1), and one of about 70 F-box proteins. Given that the F-box proteins determine the substrate specificity of the CRL1 complex, the variety of these proteins allows the generation of a large number of ubiquitin ligases that promote the degradation or regulate the function of many substrate proteins and thereby control numerous key cellular processes. The physiological and pathological functions of these many CRL1 ubiquitin ligases have been studied by the generation and characterization of knockout mouse models that lack specific CRL1 components. In this chapter, we provide a comprehensive overview of these mouse models and discuss the role of each CRL1 component in mouse physiology and pathology.
Pathogenic mutations in the ALS gene CCNF cause cytoplasmic mislocalization of Cyclin F and elevated VCP ATPase activity. 国際誌査読有り

Yujiao Yu, Tadashi Nakagawa, Akane Morohoshi, Makiko Nakagawa, Noriko Ishida, Naoki Suzuki, Masashi Aoki, Keiko Nakayama

Human molecular genetics　28　(20)　3486-3497　2019年10月15日

DOI： 10.1093/hmg/ddz119 　

ISSN：0964-6906

詳細を見る詳細を閉じる

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is an adult-onset motor neuron disease characterized by a progressive decline in motor function. Genetic analyses have identified several genes mutated in ALS patients, and one of them is Cyclin F gene (CCNF), the product of which (Cyclin F) serves as the substrate-binding module of a SKP1-CUL1-F-box protein (SCF) ubiquitin ligase complex. However, the role of Cyclin F in ALS pathogenesis has remained unclear. Here, we show that Cyclin F binds to valosin-containing protein (VCP), which is also reported to be mutated in ALS, and that the two proteins colocalize in the nucleus. VCP was found to bind to the NH2-terminal region of Cyclin F and was not ubiquitylated by SCFCyclin F in transfected cells. Instead, the ATPase activity of VCP was enhanced by Cyclin F in vitro. Furthermore, whereas ALS-associated mutations of CCNF did not affect the stability of Cyclin F or disrupt formation of the SCFCyclin F complex, amino acid substitutions in the VCP binding region increased the binding ability of Cyclin F to VCP and activity of VCP as well as mislocalization of the protein in the cytoplasm. We also provided evidence that the ATPase activity of VCP promotes cytoplasmic aggregation of transactivation responsive region (TAR) DNA-binding protein 43, which is commonly observed in degenerating neurons in ALS patients. Given that mutations of VCP identified in ALS patients also increase its ATPase activity, our results suggest that Cyclin F mutations may contribute to ALS pathogenesis by increasing the ATPase activity of VCP in the cytoplasm, which in turn increases TDP-43 aggregates.
Cancer-associated fibroblasts secrete Wnt2 to promote cancer progression in colorectal cancer. 国際誌査読有り

Takashi Aizawa, Hideaki Karasawa, Ryo Funayama, Matsuyuki Shirota, Takashi Suzuki, Shimpei Maeda, Hideyuki Suzuki, Akihiro Yamamura, Takeshi Naitoh, Keiko Nakayama, Michiaki Unno

Cancer medicine　8　(14)　6370-6382　2019年10月

DOI： 10.1002/cam4.2523 　

詳細を見る詳細を閉じる

Recent studies have shown that the tumor microenvironment plays a significant role in the progression of solid tumors. As an abundant component of the tumor microenvironment, cancer-associated fibroblasts (CAFs) have been shown to promote tumorigenesis and cancer aggressiveness, but their molecular characteristics remain poorly understood. In the present study, paired CAFs and normal fibroblasts (NFs) were isolated from five colorectal cancer (CRC) tissues from patients who underwent surgical resection. The gene expression profiles of CAFs and NFs identified by RNA sequencing were compared to understand the complex role of CAFs in cancer progression. Gene Set Enrichment Analysis revealed that the gene sets related to the Wnt signaling pathway were highly enriched in CAFs, as well as TGFβ signaling, which is considered to be a regulator of CAFs. Among the components of this pathway, Wnt2 was specifically expressed. The observations led us to speculate that Wnt2 is extremely involved in regulating CRC progression by CAFs. Thus, we performed immunohistochemical analysis on Wnt2 in 171 patients who underwent surgery for colorectal adenocarcinoma. Positive staining for Wnt2 was mainly observed in cancer stroma, although the immunoreactivity was weak in cancer cells. Wnt2 expression in CAFs was significantly correlated with depth of tumor (P < .001), lymph node metastasis (P = .044), TNM stage (P = .010), venous invasion (P < .001), and recurrence (P = .013). Subsequent in vitro analyses were conducted using conditioned medium (CM) from immortalized CAFs transfected with siRNA targeting Wnt2. As a result, cancer cell invasion and migration were significantly decreased in the CM from immortalized CAFs transfected with siRNA targeting Wnt2. Our findings indicated that Wnt2 protein released from CAFs enhances CRC cell invasion and migration. In conclusion, Wnt2 secreted by CAFs plays a key role in cancer progression and is a potential therapeutic target for CRC.
Detection of NRAS mutation in cell-free DNA biological fluids from patients with kaposiform lymphangiomatosis. 国際誌査読有り

Michio Ozeki, Yoko Aoki, Akifumi Nozawa, Shiho Yasue, Saori Endo, Yumiko Hori, Kentaro Matsuoka, Tetsuya Niihori, Ryo Funayama, Matsuyuki Shirota, Keiko Nakayama, Toshiyuki Fukao

Orphanet journal of rare diseases　14　(1)　215-215　2019年9月11日

DOI： 10.1186/s13023-019-1191-5 　

詳細を見る詳細を閉じる

BACKGROUND: Kaposiform lymphangiomatosis (KLA) has recently been distinguished as a novel subtype of generalized lymphatic anomaly (GLA) with foci of spindle endothelial cells. All cases of KLA involve multiple organs and have an unfavorable prognosis. However, the molecular pathogenesis is unknown, and there are no useful biomarkers. In the present study, we performed genetic analysis to elucidate the cause of this disease and detect biomarkers for it. METHODS: We performed whole-exome sequencing of DNA samples from leukocytes and a biopsy specimen and analyzed cell-free DNA (cfDNA) from plasma and pleural effusion of patients to identify the NRAS c.182A > G (p.Q61R) mutation using the droplet digital polymerase chain reaction (ddPCR). RESULTS: All KLA patients (patients 1-5) had invasive and aggressive features (hemorrhagic pleural effusions, coagulation disorder, and thrombocytopenia) and characteristic findings of KLA in their pathological examinations. In whole exome sequencing for patient 1, c.182A > G missense variant (p.Q61R) in NRAS was identified in fresh frozen samples of a mass on the left chest wall at a frequency of 5% of total alleles but not in his blood leukocytes. Furthermore, the same mutation was detected in cfDNA isolated from plasma and pleural effusion by using ddPCR. ddPCR analysis of plasma/pleural effusion samples from an additional four KLA patients showed that the same mutation was detected in isolated cfDNA in three of the four, as well as in a tissue sample from one of the three plasma/effusion-positive patients that had been obtained to confirm the mutation. CONCLUSION: These results provide the first evidence that NRAS oncogenic variant was identified in DNA samples from KLA patients from not only two affected lesions but also plasma and pleural effusion.
ペルオキシソーム形成異常による小脳形態形成障害の病態発症機構

阿部雄一, 本庄雅則, 伊藤竜太, 藤谷昌司, 中山啓子, 大城遼平, 中山敬一, 山下俊英, 藤木幸夫

日本生化学会大会プログラム・講演要旨集　92回　[1T04a-06]　2019年9月
出版者・発行元： (公社)日本生化学会
Aberrant axon branching via Fos-B dysregulation in FUS-ALS motor neurons. 国際誌査読有り

Tetsuya Akiyama, Naoki Suzuki, Mitsuru Ishikawa, Koki Fujimori, Takefumi Sone, Jiro Kawada, Ryo Funayama, Fumiyoshi Fujishima, Shio Mitsuzawa, Kensuke Ikeda, Hiroya Ono, Tomomi Shijo, Shion Osana, Matsuyuki Shirota, Tadashi Nakagawa, Yasuo Kitajima, Ayumi Nishiyama, Rumiko Izumi, Satoru Morimoto, Yohei Okada, Takayuki Kamei, Mayumi Nishida, Masahiro Nogami, Shohei Kaneda, Yoshiho Ikeuchi, Hiroaki Mitsuhashi, Keiko Nakayama, Teruo Fujii, Hitoshi Warita, Hideyuki Okano, Masashi Aoki

EBioMedicine　45　362-378　2019年7月

DOI： 10.1016/j.ebiom.2019.06.013 　

詳細を見る詳細を閉じる

BACKGROUND: The characteristic structure of motor neurons (MNs), particularly of the long axons, becomes damaged in the early stages of amyotrophic lateral sclerosis (ALS). However, the molecular pathophysiology of axonal degeneration remains to be fully elucidated. METHOD: Two sets of isogenic human-induced pluripotent stem cell (hiPSCs)-derived MNs possessing the single amino acid difference (p.H517D) in the fused in sarcoma (FUS) were constructed. By combining MN reporter lentivirus, MN specific phenotype was analyzed. Moreover, RNA profiling of isolated axons were conducted by applying the microfluidic devices that enable axon bundles to be produced for omics analysis. The relationship between the target gene, which was identified as a pathological candidate in ALS with RNA-sequencing, and the MN phenotype was confirmed by intervention with si-RNA or overexpression to hiPSCs-derived MNs and even in vivo. The commonality was further confirmed with other ALS-causative mutant hiPSCs-derived MNs and human pathology. FINDINGS: We identified aberrant increasing of axon branchings in FUS-mutant hiPSCs-derived MN axons compared with isogenic controls as a novel phenotype. We identified increased level of Fos-B mRNA, the binding target of FUS, in FUS-mutant MNs. While Fos-B reduction using si-RNA or an inhibitor ameliorated the observed aberrant axon branching, Fos-B overexpression resulted in aberrant axon branching even in vivo. The commonality of those phenotypes was further confirmed with other ALS causative mutation than FUS. INTERPRETATION: Analyzing the axonal fraction of hiPSC-derived MNs using microfluidic devices revealed that Fos-B is a key regulator of FUS-mutant axon branching. FUND: Japan Agency for Medical Research and development; Japanese Ministry of Education, Culture, Sports, Science and Technology Clinical Research, Innovation and Education Center, Tohoku University Hospital; Japan Intractable Diseases (Nanbyo) Research Foundation; the Kanae Foundation for the Promotion of Medical Science; and "Inochi-no-Iro" ALS research grant.
Germline-Activating RRAS2 Mutations Cause Noonan Syndrome. 国際誌査読有り

Tetsuya Niihori, Koki Nagai, Atsushi Fujita, Hirofumi Ohashi, Nobuhiko Okamoto, Satoshi Okada, Atsuko Harada, Hirotaka Kihara, Thomas Arbogast, Ryo Funayama, Matsuyuki Shirota, Keiko Nakayama, Taiki Abe, Shin-Ichi Inoue, I-Chun Tsai, Naomichi Matsumoto, Erica E Davis, Nicholas Katsanis, Yoko Aoki

American journal of human genetics　104　(6)　1233-1240　2019年6月6日

DOI： 10.1016/j.ajhg.2019.04.014 　

ISSN：0002-9297

詳細を見る詳細を閉じる

Noonan syndrome (NS) is characterized by distinctive craniofacial appearance, short stature, and congenital heart disease. Approximately 80% of individuals with NS harbor mutations in genes whose products are involved in the RAS/mitogen-activating protein kinase (MAPK) pathway. However, the underlying genetic causes in nearly 20% of individuals with NS phenotype remain unexplained. Here, we report four de novo RRAS2 variants in three individuals with NS. RRAS2 is a member of the RAS subfamily and is ubiquitously expressed. Three variants, c.70_78dup (p.Gly24_Gly26dup), c.216A>T (p.Gln72His), and c.215A>T (p.Gln72Leu), have been found in cancers; our functional analyses showed that these three changes induced elevated association of RAF1 and that they activated ERK1/2 and ELK1. Notably, prominent activation of ERK1/2 and ELK1 by p.Gln72Leu associates with the severe phenotype of the individual harboring this change. To examine variant pathogenicity in vivo, we generated zebrafish models. Larvae overexpressing c.70_78dup (p.Gly24_Gly26dup) or c.216A>T (p.Gln72His) variants, but not wild-type RRAS2 RNAs, showed craniofacial defects and macrocephaly. The same dose injection of mRNA encoding c.215A>T (p.Gln72Leu) caused severe developmental impairments and low dose overexpression of this variant induced craniofacial defects. In contrast, the RRAS2 c.224T>G (p.Phe75Cys) change, located on the same allele with p.Gln72His in an individual with NS, resulted in no aberrant in vitro or in vivo phenotypes by itself. Together, our findings suggest that activating RRAS2 mutations can cause NS and expand the involvement of RRAS2 proto-oncogene to rare germline disorders.
Biallelic GALM pathogenic variants cause a novel type of galactosemia. 国際誌査読有り

Yoichi Wada, Atsuo Kikuchi, Natsuko Arai-Ichinoi, Osamu Sakamoto, Yusuke Takezawa, Shinya Iwasawa, Tetsuya Niihori, Hiromi Nyuzuki, Yoko Nakajima, Erika Ogawa, Mika Ishige, Hiroki Hirai, Hideo Sasai, Ryoji Fujiki, Matsuyuki Shirota, Ryo Funayama, Masayuki Yamamoto, Tetsuya Ito, Osamu Ohara, Keiko Nakayama, Yoko Aoki, Seizo Koshiba, Toshiyuki Fukao, Shigeo Kure

Genetics in medicine : official journal of the American College of Medical Genetics　21　(6)　1286-1294　2019年6月

DOI： 10.1038/s41436-018-0340-x 　

ISSN：1098-3600

詳細を見る詳細を閉じる

PURPOSE: Galactosemia is caused by metabolic disturbances at various stages of galactose metabolism, including deficiencies in enzymes involved in the Leloir pathway (GALT, GALK1, and GALE). Nevertheless, the etiology of galactosemia has not been identified in a subset of patients. This study aimed to explore the causes of unexplained galactosemia. METHODS: Trio-based exome sequencing and/or Sanger sequencing was performed in eight patients with unexplained congenital galactosemia. In vitro enzymatic assays and immunoblot assays were performed to confirm the pathogenicity of the variants. RESULTS: The highest blood galactose levels observed in each patient were 17.3-41.9 mg/dl. Bilateral cataracts were observed in two patients. In all eight patients, we identified biallelic variants (p.Arg82*, p.Ile99Leufs*46, p.Gly142Arg, p.Arg267Gly, and p.Trp311*) in the GALM encoding galactose mutarotase, which catalyzes epimerization between β- and α-D-galactose in the first step of the Leloir pathway. GALM enzyme activities were undetectable in lymphoblastoid cell lines established from two patients. Immunoblot analysis showed the absence of the GALM protein in the patients' peripheral blood mononuclear cells. In vitro GALM expression and protein stability assays revealed altered stabilities of the variant GALM proteins. CONCLUSION: Biallelic GALM pathogenic variants cause galactosemia, suggesting the existence of type IV galactosemia.
Recurrent de novo MAPK8IP3 variants cause neurological phenotypes. 国際誌査読有り

Shinya Iwasawa, Kumiko Yanagi, Atsuo Kikuchi, Yasuko Kobayashi, Kazuhiro Haginoya, Hiroshi Matsumoto, Kenji Kurosawa, Masayuki Ochiai, Yasunari Sakai, Atsushi Fujita, Noriko Miyake, Tetsuya Niihori, Matsuyuki Shirota, Ryo Funayama, Shigeaki Nonoyama, Shouichi Ohga, Hiroshi Kawame, Keiko Nakayama, Yoko Aoki, Naomichi Matsumoto, Tadashi Kaname, Yoichi Matsubara, Wataru Shoji, Shigeo Kure

Annals of neurology　85　(6)　927-933　2019年6月

DOI： 10.1002/ana.25481 　

ISSN：0364-5134

詳細を見る詳細を閉じる

c-Jun-amino-terminal kinase-interacting protein 3 (JIP3), encoded by MAPK8IP3, is an adaptor protein of the kinesin-1 complex and essential for axonal transport in neurons. However, an association between MAPK8IP3 variants and human disease has not been established. We identified 5 individuals from four families with recurrent de novo variants c.1732C>T (p.Arg578Cys) and c.3436C>T (p.Arg1146Cys) in MAPK8IP3. The core phenotype includes spastic diplegia, intellectual disability, cerebral atrophy, and corpus callosum hypoplasia. Zebrafish embryos overexpressing human mutant JIP3 showed axon varicosities of the posterior lateral line nerve, suggesting an adverse effect on the developing axons. Our results suggest that MAPK8IP3 variants cause a neurodevelopmental disease. ANN NEUROL 2019;85:927-933.
遺伝学的分析から特定された17患者中9名における病原性変異の候補(Genomic analysis identified candidate pathogenic variants in 9 of 17 patients)

Takezawa Yusuke, Kikuchi Atsuo, Haginoya Kazuhiro, Niihari Tetsuya, Numata-Uematsu Yurika, Inui Takehiko, Yamamura-Suzuki Saeko, Miyabayashi Takuya, Anzai Mai, Suzuki-Muromoto Sato, Okubo Yukimune, Endo Wakaba, Togashi Noriko, Kobayashi Yasuko, Onuma Akira, Funayama Ryo, Shirota Matsuyuki, Nakayama Keiko, Aoki Yoko, Kure Shigeo

日本小児科学会雑誌　123　(2)　292-292　2019年2月
出版者・発行元： (公社)日本小児科学会
ISSN：0001-6543
Peroxisome biogenesis deficiency attenuates the BDNF-TrkB pathway-mediated development of the cerebellum. 国際誌査読有り

Yuichi Abe, Masanori Honsho, Ryota Itoh, Ryoko Kawaguchi, Masashi Fujitani, Kazushirou Fujiwara, Masaaki Hirokane, Takashi Matsuzaki, Keiko Nakayama, Ryohei Ohgi, Toshihiro Marutani, Keiichi I Nakayama, Toshihide Yamashita, Yukio Fujiki

Life science alliance　1　(6)　e201800062　2018年12月

DOI： 10.26508/lsa.201800062 　

詳細を見る詳細を閉じる

Peroxisome biogenesis disorders (PBDs) manifest as neurological deficits in the central nervous system, including neuronal migration defects and abnormal cerebellum development. However, the mechanisms underlying pathogenesis remain enigmatic. Here, to investigate how peroxisome deficiency causes neurological defects of PBDs, we established a new PBD model mouse defective in peroxisome assembly factor Pex14p, termed Pex14 ΔC/ΔC mouse. Pex14 ΔC/ΔC mouse manifests a severe symptom such as disorganization of cortical laminar structure and dies shortly after birth, although peroxisomal biogenesis and metabolism are partially defective. The Pex14 ΔC/ΔC mouse also shows malformation of the cerebellum including the impaired dendritic development of Purkinje cells. Moreover, extracellular signal-regulated kinase and AKT signaling are attenuated in this mutant mouse by an elevated level of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) together with the enhanced expression of TrkB-T1, a dominant-negative isoform of the BDNF receptor. Our results suggest that dysregulation of the BDNF-TrkB pathway, an essential signaling for cerebellar morphogenesis, gives rise to the pathogenesis of the cerebellum in PBDs.
Novel IARS2 mutations in Japanese siblings with CAGSSS, Leigh, and West syndrome. 国際誌査読有り

Yusuke Takezawa, Hiromi Fujie, Atsuo Kikuchi, Tetsuya Niihori, Ryo Funayama, Matsuyuki Shirota, Keiko Nakayama, Yoko Aoki, Masayuki Sasaki, Shigeo Kure

Brain & development　40　(10)　934-938　2018年11月

DOI： 10.1016/j.braindev.2018.06.010 　

ISSN：0387-7604

詳細を見る詳細を閉じる

BACKGROUND: IARS2 encodes isoleucine-tRNA synthetase, which is aclass-1 amino acyl-tRNA synthetase. IARS2 mutations are reported to cause Leigh syndrome or cataracts, growth hormone deficiency, sensory neuropathy, sensorineural hearing loss, and skeletal dysphasia syndrome (CAGSSS). To our knowledge, IARS2 mutations and diseases related to it have only been reported in three families. Here we report a case of two Japanese siblings with Leigh syndrome, some features of CAGSSS, and West syndrome that are found to have compound heterozygous novel IARS2 mutations. CASE REPORT: A 7-month-old Japanese girl presented with infantile spasms. Brain magnetic resonance imaging (MRI) revealed diffuse brain atrophy and hyperintensity in the bilateral basal ganglia. Three years later, her younger sister also presented with infantile spasms. MRI revealed diffuse brain atrophy and hyperintensity of the bilateral ganglia, suggesting Leigh syndrome. The siblings were identified with compound heterozygous missense mutations in IARS2, p.[(Phe227Ser)];[(Arg817His)]. CONCLUSION: This is the first case study reporting Leigh syndrome concomitant with some features of CAGSSS in siblings with novel IARS2 mutations, thereby broadening the phenotypic spectrum of IARS2-related disorders. Further studies are warranted to elucidate the nature of these disorders.
The ubiquitin ligase subunit β-TrCP in Sertoli cells is essential for spermatogenesis in mice. 査読有り

Morohoshi A, Nakagawa T, Nakano S, Nagasawa Y, Nakayama K

Developmental biology　445　(2)　178-188　2018年11月

DOI： 10.1016/j.ydbio.2018.10.023 　

ISSN：0012-1606
Bone marrow PDGFRα+Sca-1+-enriched mesenchymal stem cells support survival of and antibody production by plasma cells in vitro through IL-6. 査読有り

Kayaba A, Itoh-Nakadai A, Niibe K, Shirota M, Funayama R, Sugahara-Tobinai A, Wong YL, Inui M, Nakayama K, Takai T

International immunology　30　(6)　241-253　2018年5月24日
出版者・発行元：
DOI： 10.1093/intimm/dxy018 　

ISSN：1460-2377 0953-8178
Mutations in six nephrosis genes delineate a pathogenic pathway amenable to treatment. 国際誌査読有り

Shazia Ashraf, Hiroki Kudo, Jia Rao, Atsuo Kikuchi, Eugen Widmeier, Jennifer A Lawson, Weizhen Tan, Tobias Hermle, Jillian K Warejko, Shirlee Shril, Merlin Airik, Tilman Jobst-Schwan, Svjetlana Lovric, Daniela A Braun, Heon Yung Gee, David Schapiro, Amar J Majmundar, Carolin E Sadowski, Werner L Pabst, Ankana Daga, Amelie T van der Ven, Johanna M Schmidt, Boon Chuan Low, Anjali Bansal Gupta, Brajendra K Tripathi, Jenny Wong, Kirk Campbell, Kay Metcalfe, Denny Schanze, Tetsuya Niihori, Hiroshi Kaito, Kandai Nozu, Hiroyasu Tsukaguchi, Ryojiro Tanaka, Kiyoshi Hamahira, Yasuko Kobayashi, Takumi Takizawa, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Yoko Aoki, Naonori Kumagai, Kazumoto Iijima, Henry Fehrenbach, Jameela A Kari, Sherif El Desoky, Sawsan Jalalah, Radovan Bogdanovic, Nataša Stajić, Hildegard Zappel, Assel Rakhmetova, Sharon-Rose Wassmer, Therese Jungraithmayr, Juergen Strehlau, Aravind Selvin Kumar, Arvind Bagga, Neveen A Soliman, Shrikant M Mane, Lewis Kaufman, Douglas R Lowy, Mohamad A Jairajpuri, Richard P Lifton, York Pei, Martin Zenker, Shigeo Kure, Friedhelm Hildebrandt

Nature communications　9　(1)　1960-1960　2018年5月17日

DOI： 10.1038/s41467-018-04193-w 　

詳細を見る詳細を閉じる

No efficient treatment exists for nephrotic syndrome (NS), a frequent cause of chronic kidney disease. Here we show mutations in six different genes (MAGI2, TNS2, DLC1, CDK20, ITSN1, ITSN2) as causing NS in 17 families with partially treatment-sensitive NS (pTSNS). These proteins interact and we delineate their roles in Rho-like small GTPase (RLSG) activity, and demonstrate deficiency for mutants of pTSNS patients. We find that CDK20 regulates DLC1. Knockdown of MAGI2, DLC1, or CDK20 in cultured podocytes reduces migration rate. Treatment with dexamethasone abolishes RhoA activation by knockdown of DLC1 or CDK20 indicating that steroid treatment in patients with pTSNS and mutations in these genes is mediated by this RLSG module. Furthermore, we discover ITSN1 and ITSN2 as podocytic guanine nucleotide exchange factors for Cdc42. We generate Itsn2-L knockout mice that recapitulate the mild NS phenotype. We, thus, define a functional network of RhoA regulation, thereby revealing potential therapeutic targets.
Rett-like features and cortical visual impairment in a Japanese patient with HECW2 mutation. 国際誌査読有り

Haruhiko Nakamura, Mitsugu Uematsu, Yurika Numata-Uematsu, Yu Abe, Wakaba Endo, Atsuo Kikuchi, Yusuke Takezawa, Ryo Funayama, Matsuyuki Shirota, Keiko Nakayama, Tetsuya Niihori, Yoko Aoki, Kazuhiro Haginoya, Shigeo Kure

Brain & development　40　(5)　410-414　2018年5月

DOI： 10.1016/j.braindev.2017.12.015 　

ISSN：0387-7604

詳細を見る詳細を閉じる

Numerous genetic syndromes that include intellectual disability (ID) have been reported. Recently, HECW2 mutations were detected in patients with ID and growth development disorders. Four de novo missense mutations have been reported. Here, we report a Japanese girl with Rett-like symptoms of severe ID, hypotonia, refractory epilepsy, and stereotypical hand movement (hand tapping, flapping, and wringing) after the age of 1 year. Characteristically, she had cortical visual impairment. She had difficulty swallowing since the age of 4 years, and diminished activity was noticeable since the age of 12 years, suggesting neurodevelopmental regression. She has no acquired microcephaly, and brain magnetic resonance imaging showed non-specific mild cerebral and cerebellar atrophy without progression over time. Genetic analyses of MECP2, CDKL5, and FOXG1 were negative. Whole-exome sequencing analysis revealed a known de novo mutation (c.3988C > T) in HECW2. The characteristics of her clinical symptoms are severe cortical visual impairment and Rett-like phenotype such as involuntary movements and regression. This is the first report that patients with HECW2 mutation could show Rett-like feature.
Genomic analysis identifies masqueraders of full-term cerebral palsy. 国際誌査読有り

Yusuke Takezawa, Atsuo Kikuchi, Kazuhiro Haginoya, Tetsuya Niihori, Yurika Numata-Uematsu, Takehiko Inui, Saeko Yamamura-Suzuki, Takuya Miyabayashi, Mai Anzai, Sato Suzuki-Muromoto, Yukimune Okubo, Wakaba Endo, Noriko Togashi, Yasuko Kobayashi, Akira Onuma, Ryo Funayama, Matsuyuki Shirota, Keiko Nakayama, Yoko Aoki, Shigeo Kure

Annals of clinical and translational neurology　5　(5)　538-551　2018年5月

DOI： 10.1002/acn3.551 　

詳細を見る詳細を閉じる

Objective: Cerebral palsy is a common, heterogeneous neurodevelopmental disorder that causes movement and postural disabilities. Recent studies have suggested genetic diseases can be misdiagnosed as cerebral palsy. We hypothesized that two simple criteria, that is, full-term births and nonspecific brain MRI findings, are keys to extracting masqueraders among cerebral palsy cases due to the following: (1) preterm infants are susceptible to multiple environmental factors and therefore demonstrate an increased risk of cerebral palsy and (2) brain MRI assessment is essential for excluding environmental causes and other particular disorders. Methods: A total of 107 patients-all full-term births-without specific findings on brain MRI were identified among 897 patients diagnosed with cerebral palsy who were followed at our center. DNA samples were available for 17 of the 107 cases for trio whole-exome sequencing and array comparative genomic hybridization. We prioritized variants in genes known to be relevant in neurodevelopmental diseases and evaluated their pathogenicity according to the American College of Medical Genetics guidelines. Results: Pathogenic/likely pathogenic candidate variants were identified in 9 of 17 cases (52.9%) within eight genes: CTNNB1,CYP2U1,SPAST,GNAO1,CACNA1A,AMPD2,STXBP1, and SCN2A. Five identified variants had previously been reported. No pathogenic copy number variations were identified. The AMPD2 missense variant and the splice-site variants in CTNNB1 and AMPD2 were validated by in vitro functional experiments. Interpretation: The high rate of detecting causative genetic variants (52.9%) suggests that patients diagnosed with cerebral palsy in full-term births without specific MRI findings may include genetic diseases masquerading as cerebral palsy.
Bach2 promotes B cell receptor–induced proliferation of b lymphocytes and represses cyclin-dependent kinase inhibitors 査読有り

Yuichi Miura, Mizuho Morooka, Nicolas Sax, Rahul Roychoudhuri, Ari Itoh-Nakadai, Andrey Brydun, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Susumu Satomi, Mitsuyo Matsumoto, Kazuhiko Igarashi, Akihiko Muto

Journal of Immunology　200　(8)　2882-2893　2018年4月15日
出版者・発行元： American Association of Immunologists
DOI： 10.4049/jimmunol.1601863 　

ISSN：1550-6606 0022-1767
Zinc finger-IRF composite elements bound by Ikaros/IRF4 complexes function as gene repression in plasma cell. 査読有り

Ochiai K, Kondo H, Okamura Y, Shima H, Kurokochi Y, Kimura K, Funayama R, Nagashima T, Nakayama K, Yui K, Kinoshita K, Igarashi K

Blood advances　2　(8)　883-894　2018年4月

DOI： 10.1182/bloodadvances.2017010413 　

ISSN：2473-9529
Transforming Growth Factor β-Induced Proliferative Arrest Mediated by TRIM26-Dependent TAF7 Degradation and Its Antagonism by MYC. 査読有り

Nakagawa T, Hosogane M, Nakagawa M, Morohoshi A, Funayama R, Nakayama K

Molecular and cellular biology　38　(5)　pii: e00449-17　2018年3月1日
出版者・発行元：
DOI： 10.1128/MCB.00449-17 　

ISSN：1098-5549 0270-7306
Glucose deprivation induces primary cilium formation through mTORC1 inactivation 査読有り

Kengo Takahashi, Tomoaki Nagai, Shuhei Chiba, Keiko Nakayama, Kensaku Mizuno

Journal of Cell Science　131　(1)　pii: jcs208769　2018年1月1日
出版者・発行元： Company of Biologists Ltd
DOI： 10.1242/jcs.208769 　

ISSN：1477-9137 0021-9533
Inferring evolutionary responses of Anolis carolinensis introduced into the Ogasawara archipelago using whole genome sequence data 査読有り

Satoshi Tamate, Watal M. Iwasaki, Kenneth L. Krysko, Brian J. Camposano, Hideaki Mori, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Takashi Makino, Masakado Kawata

SCIENTIFIC REPORTS　7　(1)　18008　2017年12月

DOI： 10.1038/s41598-017-17852-7 　

ISSN：2045-2322
NOTCH2 Hajdu-Cheney Mutations Escape SCFFBW7-Dependent Proteolysis to Promote Osteoporosis. 国際誌査読有り

Hidefumi Fukushima, Kouhei Shimizu, Asami Watahiki, Seira Hoshikawa, Tomoki Kosho, Daiju Oba, Seiji Sakano, Makiko Arakaki, Aya Yamada, Katsuyuki Nagashima, Koji Okabe, Satoshi Fukumoto, Eijiro Jimi, Anna Bigas, Keiichi I Nakayama, Keiko Nakayama, Yoko Aoki, Wenyi Wei, Hiroyuki Inuzuka

Molecular cell　68　(4)　645-658　2017年11月16日

DOI： 10.1016/j.molcel.2017.10.018 　

詳細を見る詳細を閉じる

Hajdu-Cheney syndrome (HCS), a rare autosomal disorder caused by heterozygous mutations in NOTCH2, is clinically characterized by acro-osteolysis, severe osteoporosis, short stature, neurological symptoms, cardiovascular defects, and polycystic kidneys. Recent studies identified that aberrant NOTCH2 signaling and consequent osteoclast hyperactivity are closely associated with the bone-related disorder pathogenesis, but the exact molecular mechanisms remain unclear. Here, we demonstrate that sustained osteoclast activity is largely due to accumulation of NOTCH2 carrying a truncated C terminus that escapes FBW7-mediated ubiquitination and degradation. Mice with osteoclast-specific Fbw7 ablation revealed osteoporotic phenotypes reminiscent of HCS, due to elevated Notch2 signaling. Importantly, administration of Notch inhibitors in Fbw7 conditional knockout mice alleviated progressive bone resorption. These findings highlight the molecular basis of HCS pathogenesis and provide clinical insights into potential targeted therapeutic strategies for skeletal disorders associated with the aberrant FBW7/NOTCH2 pathway as observed in patients with HCS.
Inflammatory responses induce an identity crisis of alveolar macrophages, leading to pulmonary alveolar proteinosis 査読有り

Risa Ebina-Shibuya, Mitsuyo Matsumoto, Makoto Kuwahara, Kyoung-Jin Jang, Manabu Sugai, Yoshiaki Ito, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Yuki Sato, Naoto Ishii, Yasunobu Okamura, Kengo Kinoshita, Kohei Kometani, Tomohiro Kurosaki, Akihiko Muto, Masakazu Ichinose, Masakatsu Yamashita, Kazuhiko Igarashi

JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY　292　(44)　18098-18112　2017年11月

DOI： 10.1074/jbc.M117.808535 　

ISSN：0021-9258

eISSN：1083-351X
Regulation of mitosis-meiosis transition by the ubiquitin ligase beta-TrCP in male germ cells 査読有り

Tadashi Nakagawa, Teng Zhang, Ryo Kushi, Seiji Nakano, Takahiro Endo, Makiko Nakagawa, Noriko Yanagihara, David Zarkower, Keiko Nakayama

DEVELOPMENT　144　(22)　4137-4147　2017年11月

DOI： 10.1242/dev.158485 　

ISSN：0950-1991

eISSN：1477-9129
Long-term outcome of a 26-year-old woman with West syndrome and an nuclear receptor subfamily 2 group F member 1 gene (NR2F1) mutation. 国際誌査読有り

Naomi Hino-Fukuyo, Atsuo Kikuchi, Hiroyuki Yokoyama, Kazuie Iinuma, Mieko Hirose, Kazuhiro Haginoya, Tetsuya Niihori, Keiko Nakayama, Yoko Aoki, Shigeo Kure

Seizure　50　144-146　2017年8月

DOI： 10.1016/j.seizure.2017.06.018 　

詳細を見る詳細を閉じる

Long-term outcome of West syndrome with a NR2F1 mutation.
Exome sequencing deciphers a germline MET mutation in familial epidermal growth factor receptor-mutant lung cancer. 国際誌査読有り

Naoki Tode, Toshiaki Kikuchi, Tomohiro Sakakibara, Taizou Hirano, Akira Inoue, Shinya Ohkouchi, Tsutomu Tamada, Tatsuma Okazaki, Akira Koarai, Hisatoshi Sugiura, Tetsuya Niihori, Yoko Aoki, Keiko Nakayama, Kunio Matsumoto, Yoichi Matsubara, Masayuki Yamamoto, Akira Watanabe, Toshihiro Nukiwa, Masakazu Ichinose

Cancer science　108　(6)　1263-1270　2017年6月

DOI： 10.1111/cas.13233 　

詳細を見る詳細を閉じる

Lung cancer accompanied by somatic activating mutations in the epidermal growth factor receptor (EGFR) gene, which is associated with a significant clinical response to the targeted therapy, is frequently found in never-smoking Asian women with adenocarcinoma. Although this implies genetic factors underlying the carcinogenesis, the etiology remains unclear. To gain insight into the pathogenic mechanisms, we sequenced the exomes in the peripheral-blood DNA from six siblings, four affected and two unaffected siblings, of a family with familial EGFR-mutant lung adenocarcinoma. We identified a heterozygous missense mutation in MET proto-oncogene, p.Asn375Lys, in all four affected siblings. Combined with somatic loss of heterozygosity for MET, the higher allele frequency in a Japanese sequencing database supports a causative role of the MET mutation in EGFR-mutant lung cancer. Functional assays showed that the mutation reduces the binding affinity of MET for its ligand, hepatocyte growth factor, and damages the subsequent cellular processes, including proliferation, clonogenicity, motility and tumorigenicity. The MET mutation was further observed to abrogate the ERBB3-mediated AKT signal transduction, which is shared downstream by EGFR. These findings provide an etiological view that the MET mutation is involved in the pathogenesis of EGFR-mutant lung cancer because it generates oncogenic stress that induces compensatory EGFR activation. The identification of MET in a family with familial EGFR-mutant lung cancer is insightful to explore the pathogenic mechanism of not only familial, but also sporadic EGFR-mutant lung cancer by underscoring MET-related signaling molecules.
Hippo Signaling Suppresses Cell Ploidy and Tumorigenesis through Skp2 査読有り

Shihao Zhang, Qinghua Chen, Qingxu Liu, Yuxi Li, Xiufeng Sun, Lixin Hong, Suyuan Ji, Chengyan Liu, Jing Geng, Weiji Zhang, Zhonglei Lu, Zhen-Yu Yin, Yuanyuan Zeng, Kwang-Huei Lin, Qiao Wu, Qiyuan Li, Keiko Nakayama, Keiich I. Nakayama, Xianming Deng, Randy L. Johnson, Liang Zhu, Daming Gao, Lanfen Chen, Dawang Zhou

CANCER CELL　31　(5)　669-+　2017年5月

DOI： 10.1016/j.ccell.2017.04.004 　

ISSN：1535-6108

eISSN：1878-3686
Regulatory signatures of liver regeneration distilled by integrative analysis of mRNA, histone methylation, and proteomics 査読有り

Yoshihiro Sato, Yasutake Katoh, Mitsuyo Matsumoto, Masaki Sato, Masayuki Ebina, Ari Itoh-Nakadai, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Michiaki Unno, Kazuhiko Igarashi

JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY　292　(19)　8019-+　2017年5月

DOI： 10.1074/jbc.M116.774547 　

ISSN：0021-9258

eISSN：1083-351X
Dramatic response after functional hemispherectomy in a patient with epileptic encephalopathy carrying a de novo COL4A1 mutation. 国際誌査読有り

Naomi Hino-Fukuyo, Atsuo Kikuchi, Masaki Iwasaki, Yuko Sato, Yuki Kubota, Tomoko Kobayashi, Tojo Nakayama, Kazuhiro Haginoya, Natsuko Arai-Ichinoi, Tetsuya Niihori, Ryo Sato, Tasuku Suzuki, Hiroki Kudo, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Yoko Aoki, Shigeo Kure

Brain & development　39　(4)　337-340　2017年4月

DOI： 10.1016/j.braindev.2016.11.006 　

詳細を見る詳細を閉じる

We describe the first case of a successful functional hemispherectomy in a patient with epileptic encephalopathy and a de novo collagen type IV alpha 1 (COL4A1) mutation. A 4-year-old girl was COL4A1 mutation-positive and suffered from drug-resistant epilepsy, hemiplegia, and developmental delay. Magnetic resonance imaging detected no porencephaly, and she had no cataract or renal abnormality. Following a presurgical evaluation for epilepsy, she underwent a functional hemispherectomy. She has been seizure free with no intracranial hemorrhage or other perioperative complications. Patients with a COL4A1 mutation have an increased risk for intracranial hemorrhage because of disrupted integrity in the vascular basement membrane due to the mutation. After weighing the risks and benefits to these patients, epilepsy surgery may not be absolutely contraindicated. Furthermore, pediatric neurologists should be aware of an undiagnosed COL4A1 mutation when a patient presents with an unexplained neurological phenotype, such as mild hemiparesis, even in the absence of porencephaly.
Protein-arginine deiminase 2 suppresses proliferation of colon cancer cells through protein citrullination 査読有り

Ryo Funayama, Hajime Taniguchi, Masamichi Mizuma, Fumiyoshi Fujishima, Minoru Kobayashi, Shinobu Ohnuma, Michiaki Unno, Keiko Nakayama

CANCER SCIENCE　108　(4)　713-718　2017年4月

DOI： 10.1111/cas.13179 　

ISSN：1349-7006
Geminin is an indispensable inhibitor of Cdt1 in mouse embryonic stem cells 査読有り

Masaki Hosogane, Lena Bosu, Emiko Fukumoto, Hidetoshi Yamada, Soichiro Sato, Keiko Nakayama

GENES TO CELLS　22　(4)　360-375　2017年4月

DOI： 10.1111/gtc.12482 　

ISSN：1356-9597

eISSN：1365-2443
A large-scale targeted proteomics assay resource based on an in vitro human proteome 査読有り

Masaki Matsumoto, Fumiko Matsuzaki, Kiyotaka Oshikawa, Naoki Goshima, Masatoshi Mori, Yoshifumi Kawamura, Koji Ogawa, Eriko Fukuda, Hirokazu Nakatsumi, Tohru Natsume, Kazuhiko Fukui, Katsuhisa Horimoto, Takeshi Nagashima, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama

NATURE METHODS　14　(3)　251-+　2017年3月

DOI： 10.1038/NMETH.4116 　

ISSN：1548-7091

eISSN：1548-7105
A Bach2-Cebp Gene Regulatory Network for the Commitment of Multipotent Hematopoietic Progenitors 査読有り

Ari Itoh-Nakadai, Mitsuyo Matsumoto, Hiroki Kato, Junichi Sasaki, Yukihiro Uehara, Yuki Sato, Risa Ebina-Shibuya, Mizuho Morooka, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Kyoko Ochiai, Akihiko Muto, Kazuhiko Igarashi

CELL REPORTS　18　(10)　2401-2414　2017年3月

DOI： 10.1016/j.celrep.2017.02.029 　

ISSN：2211-1247
A Homeostatic Shift Facilitates Endoplasmic Reticulum Proteostasis through Transcriptional Integration of Proteostatic Stress Response Pathways 査読有り

Liam Baird, Tadayuki Tsujita, Eri H. Kobayashi, Ryo Funayama, Takeshi Nagashima, Keiko Nakayama, Masayuki Yamamoto

MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY　37　(4)　E00651-U199　2017年2月

DOI： 10.1128/MCB.00439.16 　

ISSN：0270-7306

eISSN：1098-5549
Ubiquitylation of Ku80 by RNF126 Promotes Completion of Nonhomologous End Joining-Mediated DNA Repair 査読有り

Noriko Ishida, Tadashi Nakagawa, Shun-Ichiro Iemura, Akira Yasui, Hiroki Shima, Yasutake Katoh, Yuko Nagasawa, Toru Natsume, Kazuhiko Igarashi, Keiko Nakayama

MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY　37　(4)　e00347-16　2017年2月

DOI： 10.1128/MCB.00347-16 　

ISSN：0270-7306

eISSN：1098-5549
The aryl hydrocarbon receptor AhR links atopic dermatitis and air pollution via induction of the neurotrophic factor artemin 査読有り

Takanori Hidaka, Eisaku Ogawa, Eri H. Kobayashi, Takafumi Suzuki, Ryo Funayama, Takeshi Nagashima, Taku Fujimura, Setsuya Aiba, Keiko Nakayama, Ryuhei Okuyama, Masayuki Yamamoto

NATURE IMMUNOLOGY　18　(1)　64-73　2017年1月

DOI： 10.1038/ni.3614 　

ISSN：1529-2908

eISSN：1529-2916
The SCF beta-TRCP E3 ubiquitin ligase complex targets Lipin1 for ubiquitination and degradation to promote hepatic lipogenesis 査読有り

Kouhei Shimizu, Hidefumi Fukushima, Kohei Ogura, Evan C. Lien, Naoe Taira Nihira, Jinfang Zhang, Brian J. North, Ailan Guo, Katsuyuki Nagashima, Tadashi Nakagawa, Seira Hoshikawa, Asami Watahiki, Koji Okabe, Aya Yamada, Alex Toker, John M. Asara, Satoshi Fukumoto, Keiichi I. Nakayama, Keiko Nakayama, Hiroyuki Inuzuka, Wenyi Wei

SCIENCE SIGNALING　10　(460)　2017年1月

DOI： 10.1126/scisignal.aah4117 　

ISSN：1945-0877

eISSN：1937-9145
Wnt--catenin signaling regulates ABCC3 (MRP3) transporter expression in colorectal cancer 査読有り

Minoru Kobayashi, Ryo Funayama, Shinobu Ohnuma, Michiaki Unno, Keiko Nakayama

CANCER SCIENCE　107　(12)　1776-1784　2016年12月

DOI： 10.1111/cas.13097 　

ISSN：1347-9032

eISSN：1349-7006
The double knockout of Bach1 and Bach2 in mice reveals shared compensatory mechanisms in regulating alveolar macrophage function and lung surfactant homeostasis 査読有り

Risa Ebina-Shibuya, Miki Watanabe-Matsui, Mitsuyo Matsumoto, Ari Itoh-Nakadai, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Akihiko Muto, Kazuhiko Igarashi

JOURNAL OF BIOCHEMISTRY　160　(6)　333-344　2016年12月

DOI： 10.1093/jb/mvw041 　

ISSN：0021-924X

eISSN：1756-2651
大腸癌で発現が抑制されるPeptidylarginine deiminase 2の機能解析査読有り

谷口肇, 舟山亮, 小林実, 高館達之, 阿部友哉, 水間正道, 藤島史喜, 大沼忍, 内藤剛, 海野倫明, 中山啓子

日本癌学会総会記事　75回　P-1267　2016年10月
出版者・発行元：日本癌学会
ISSN：0546-0476
Lack of genetic variation prevents adaptation at the geographic range margin in a damselfly 査読有り

Yuma Takahashi, Yoshihisa Suyama, Yu Matsuki, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Masakado Kawata

MOLECULAR ECOLOGY　25　(18)　4450-4460　2016年9月

DOI： 10.1111/mec.13782 　

ISSN：0962-1083

eISSN：1365-294X
The Tohoku Medical Megabank Project: Design and Mission 査読有り

Shinichi Kuriyama, Nobuo Yaegashi, Fuji Nagami, Tomohiko Arai, Yoshio Kawaguchi, Noriko Osumi, Masaki Sakaida, Yoichi Suzuki, Keiko Nakayama, Hiroaki Hashizume, Gen Tamiya, Hiroshi Kawame, Kichiya Suzuki, Atsushi Hozawa, Naoki Nakaya, Masahiro Kikuya, Hirohito Metoki, Ichiro Tsuji, Nobuo Fuse, Hideyasu Kiyomoto, Junichi Sugawara, Akito Tsuboi, Shinichi Egawa, Kiyoshi Ito, Koichi Chida, Tadashi Ishii, Hiroaki Tomita, Yasuyuki Taki, Naoko Minegishi, Naoto Ishii, Jun Yasuda, Kazuhiko Igarashi, Ritsuko Shimizu, Masao Nagasaki, Seizo Koshiba, Kengo Kinoshita, Soichi Ogishima, Takako Takai-Igarashi, Teiji Tominaga, Osamu Tanabe, Noriaki Ohuchi, Toru Shimosegawa, Shigeo Kure, Hiroshi Tanaka, Sadayoshi Ito, Jiro Hitomi, Kozo Tanno, Motoyuki Nakamura, Kuniaki Ogasawara, Seiichiro Kobayashi, Kiyomi Sakata, Mamoru Satoh, Atsushi Shimizu, Makoto Sasaki, Ryujin Endo, Kenji Sobue, Masayuki Yamamoto

JOURNAL OF EPIDEMIOLOGY　26　(9)　493-511　2016年9月

DOI： 10.2188/jea.JE20150268 　

ISSN：0917-5040
Lack of Transcription Triggers H3K27me3 Accumulation in the Gene Body 査読有り

Masaki Hosogane, Ryo Funayama, Matsuyuki Shirota, Keiko Nakayama

CELL REPORTS　16　(3)　696-706　2016年7月

DOI： 10.1016/j.celrep.2016.06.034 　

ISSN：2211-1247
Human genetic variation database, a reference database of genetic variations in the Japanese population. 国際誌査読有り

Koichiro Higasa, Noriko Miyake, Jun Yoshimura, Kohji Okamura, Tetsuya Niihori, Hirotomo Saitsu, Koichiro Doi, Masakazu Shimizu, Kazuhiko Nakabayashi, Yoko Aoki, Yoshinori Tsurusaki, Shinichi Morishita, Takahisa Kawaguchi, Osuke Migita, Keiko Nakayama, Mitsuko Nakashima, Jun Mitsui, Maiko Narahara, Keiko Hayashi, Ryo Funayama, Daisuke Yamaguchi, Hiroyuki Ishiura, Wen-Ya Ko, Kenichiro Hata, Takeshi Nagashima, Ryo Yamada, Yoichi Matsubara, Akihiro Umezawa, Shoji Tsuji, Naomichi Matsumoto, Fumihiko Matsuda

Journal of human genetics　61　(6)　547-53　2016年6月

DOI： 10.1038/jhg.2016.12 　

詳細を見る詳細を閉じる

Whole-genome and -exome resequencing using next-generation sequencers is a powerful approach for identifying genomic variations that are associated with diseases. However, systematic strategies for prioritizing causative variants from many candidates to explain the disease phenotype are still far from being established, because the population-specific frequency spectrum of genetic variation has not been characterized. Here, we have collected exomic genetic variation from 1208 Japanese individuals through a collaborative effort, and aggregated the data into a prevailing catalog. In total, we identified 156 622 previously unreported variants. The allele frequencies for the majority (88.8%) were lower than 0.5% in allele frequency and predicted to be functionally deleterious. In addition, we have constructed a Japanese-specific major allele reference genome by which the number of unique mapping of the short reads in our data has increased 0.045% on average. Our results illustrate the importance of constructing an ethnicity-specific reference genome for identifying rare variants. All the collected data were centralized to a newly developed database to serve as useful resources for exploring pathogenic variations. Public access to the database is available at http://www.genome.med.kyoto-u.ac.jp/SnpDB/.
Genomewide approaches for BACH1 target genes in mouse embryonic fibroblasts showed BACH1-Pparg pathway in adipogenesis 査読有り

Mitsuyo Matsumoto, Keiichi Kondo, Takuma Shiraki, Andrey Brydun, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Nobuo Yaegashi, Hideki Katagiri, Kazuhiko Igarashi

GENES TO CELLS　21　(6)　553-567　2016年6月

DOI： 10.1111/gtc.12365 　

ISSN：1356-9597

eISSN：1365-2443
Nrf2 suppresses macrophage inflammatory response by blocking proinflammatory cytokine transcription. 国際誌査読有り

Eri H Kobayashi, Takafumi Suzuki, Ryo Funayama, Takeshi Nagashima, Makiko Hayashi, Hiroki Sekine, Nobuyuki Tanaka, Takashi Moriguchi, Hozumi Motohashi, Keiko Nakayama, Masayuki Yamamoto

Nature communications　7　11624-11624　2016年5月23日

DOI： 10.1038/ncomms11624 　

詳細を見る詳細を閉じる

Nrf2 (NF-E2-related factor-2) transcription factor regulates oxidative/xenobiotic stress response and also represses inflammation. However, the mechanisms how Nrf2 alleviates inflammation are still unclear. Here, we demonstrate that Nrf2 interferes with lipopolysaccharide-induced transcriptional upregulation of proinflammatory cytokines, including IL-6 and IL-1β. Chromatin immunoprecipitation (ChIP)-seq and ChIP-qPCR analyses revealed that Nrf2 binds to the proximity of these genes in macrophages and inhibits RNA Pol II recruitment. Further, we found that Nrf2-mediated inhibition is independent of the Nrf2-binding motif and reactive oxygen species level. Murine inflammatory models further demonstrated that Nrf2 interferes with IL6 induction and inflammatory phenotypes in vivo. Thus, contrary to the widely accepted view that Nrf2 suppresses inflammation through redox control, we demonstrate here that Nrf2 opposes transcriptional upregulation of proinflammatory cytokine genes. This study identifies Nrf2 as the upstream regulator of cytokine production and establishes a molecular basis for an Nrf2-mediated anti-inflammation approach.
The expression of miR-125b-5p is increased in the serum of patients with chronic hepatitis B infection and inhibits the detection of hepatitis B virus surface antigen 査読有り

M. Ninomiya, Y. Kondo, O. Kimura, R. Funayama, T. Nagashima, T. Kogure, T. Morosawa, Y. Tanaka, K. Nakayama, T. Shimosegawa

JOURNAL OF VIRAL HEPATITIS　23　(5)　330-339　2016年5月

DOI： 10.1111/jvh.12522 　

ISSN：1352-0504

eISSN：1365-2893
Mutations in MECOM, Encoding Oncoprotein EVI1, Cause Radioulnar Synostosis with Amegakaryocytic Thrombocytopenia. 国際誌査読有り

Tetsuya Niihori, Meri Ouchi-Uchiyama, Yoji Sasahara, Takashi Kaneko, Yoshiko Hashii, Masahiro Irie, Atsushi Sato, Yuka Saito-Nanjo, Ryo Funayama, Takeshi Nagashima, Shin-Ichi Inoue, Keiko Nakayama, Keiichi Ozono, Shigeo Kure, Yoichi Matsubara, Masue Imaizumi, Yoko Aoki

American journal of human genetics　97　(6)　848-54　2015年12月3日

DOI： 10.1016/j.ajhg.2015.10.010 　

詳細を見る詳細を閉じる

Radioulnar synostosis with amegakaryocytic thrombocytopenia (RUSAT) is an inherited bone marrow failure syndrome, characterized by thrombocytopenia and congenital fusion of the radius and ulna. A heterozygous HOXA11 mutation has been identified in two unrelated families as a cause of RUSAT. However, HOXA11 mutations are absent in a number of individuals with RUSAT, which suggests that other genetic loci contribute to RUSAT. In the current study, we performed whole exome sequencing in an individual with RUSAT and her healthy parents and identified a de novo missense mutation in MECOM, encoding EVI1, in the individual with RUSAT. Subsequent analysis of MECOM in two other individuals with RUSAT revealed two additional missense mutations. These three mutations were clustered within the 8(th) zinc finger motif of the C-terminal zinc finger domain of EVI1. Chromatin immunoprecipitation and qPCR assays of the regions harboring the ETS-like motif that is known as an EVI1 binding site showed a reduction in immunoprecipitated DNA for two EVI1 mutants compared with wild-type EVI1. Furthermore, reporter assays showed that MECOM mutations led to alterations in both AP-1- and TGF-β-mediated transcriptional responses. These functional assays suggest that transcriptional dysregulation by mutant EVI1 could be associated with the development of RUSAT. We report missense mutations in MECOM resulting in a Mendelian disorder that provide compelling evidence for the critical role of EVI1 in normal hematopoiesis and in the development of forelimbs and fingers in humans.
The artificial loss of Runx1 reduces the expression of quiescence-associated transcription factors in CD4(+) T lymphocytes 査読有り

Won Fen Wong, Kazuyoshi Kohu, Takeshi Nagashima, Ryo Funayama, Mitsuyo Matsumoto, Elaheh Movahed, Grace Min Yi Tan, Tee Cian Yeow, Chung Yeng Looi, Mineo Kurokawa, Motomi Osato, Kazuhiko Igarashi, Keiko Nakayama, Masanobu Satake

MOLECULAR IMMUNOLOGY　68　(2)　223-233　2015年12月

DOI： 10.1016/j.molimm.2015.08.012 　

ISSN：0161-5890
S6 Kinase- and beta-TrCP2-Dependent Degradation of p19(Arf) Is Required for Cell Proliferation 査読有り

Tadashi Nakagawa, Takaaki Araki, Makiko Nakagawa, Atsushi Hirao, Michiaki Unno, Keiko Nakayama

MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY　35　(20)　3517-3527　2015年10月

DOI： 10.1128/MCB.00343-15 　

ISSN：0270-7306

eISSN：1098-5549
Rho-Kinase Inhibition During Early Cardiac Development Causes Arrhythmogenic Right Ventricular Cardiomyopathy in Mice. 国際誌査読有り

Alia Ellawindy, Kimio Satoh, Shinichiro Sunamura, Nobuhiro Kikuchi, Kota Suzuki, Tatsuro Minami, Shohei Ikeda, Shinichi Tanaka, Toru Shimizu, Budbazar Enkhjargal, Satoshi Miyata, Yuhto Taguchi, Tetsuya Handoh, Kenta Kobayashi, Kazuto Kobayashi, Keiko Nakayama, Masahito Miura, Hiroaki Shimokawa

Arteriosclerosis, thrombosis, and vascular biology　35　(10)　2172-84　2015年10月

DOI： 10.1161/ATVBAHA.115.305872 　

詳細を見る詳細を閉じる

OBJECTIVE: Arrhythmogenic right ventricular cardiomyopathy (ARVC) is characterized by fibrofatty changes of the right ventricle, ventricular arrhythmias, and sudden death. Though ARVC is currently regarded as a disease of the desmosome, desmosomal gene mutations have been identified only in half of ARVC patients, suggesting the involvement of other associated mechanisms. Rho-kinase signaling is involved in the regulation of intracellular transport and organizes cytoskeletal filaments, which supports desmosomal protein complex at the myocardial cell-cell junctions. Here, we explored whether inhibition of Rho-kinase signaling is involved in the pathogenesis of ARVC. APPROACH AND RESULTS: Using 2 novel mouse models with SM22α- or αMHC-restricted overexpression of dominant-negative Rho-kinase, we show that mice with Rho-kinase inhibition in the developing heart (SM22α-restricted) spontaneously develop cardiac dilatation and dysfunction, myocardial fibrofatty changes, and ventricular arrhythmias, resulting in premature sudden death, phenotypes fulfilling the criteria of ARVC in humans. Rho-kinase inhibition in the developing heart results in the development of ARVC phenotypes in dominant-negative Rho-kinase mice through 3 mechanisms: (1) reduction of cardiac cell proliferation and ventricular wall thickness, (2) stimulation of the expression of the proadipogenic noncanonical Wnt ligand, Wnt5b, and the major adipogenic transcription factor, PPARγ (peroxisome proliferator activated receptor-γ), and inhibition of Wnt/β-catenin signaling, and (3) development of desmosomal abnormalities. These mechanisms lead to the development of cardiac dilatation and dysfunction, myocardial fibrofatty changes, and ventricular arrhythmias, ultimately resulting in sudden premature death in this ARVC mouse model. CONCLUSIONS: This study demonstrates a novel crucial role of Rho-kinase inhibition during cardiac development in the pathogenesis of ARVC in mice.
Isolated inclusion body myopathy caused by a multisystem proteinopathy-linked hnRNPA1 mutation. 国際誌査読有り

Rumiko Izumi, Hitoshi Warita, Tetsuya Niihori, Toshiaki Takahashi, Maki Tateyama, Naoki Suzuki, Ayumi Nishiyama, Matsuyuki Shirota, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Satomi Mitsuhashi, Ichizo Nishino, Yoko Aoki, Masashi Aoki

Neurology. Genetics　1　(3)　e23-e23　2015年10月

DOI： 10.1212/NXG.0000000000000023 　

詳細を見る詳細を閉じる

OBJECTIVE: To identify the genetic cause of isolated inclusion body myopathy (IBM) with autosomal dominant inheritance in 2 families. METHODS: Genetic investigations were performed using whole-exome and Sanger sequencing of the heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1 gene (hnRNPA1). The clinical and pathologic features of patients in the 2 families were evaluated with neurologic examinations, muscle imaging, and muscle biopsy. RESULTS: We identified a missense p.D314N mutation in hnRNPA1, which is also known to cause familial amyotrophic lateral sclerosis, in 2 families with IBM. The affected individuals developed muscle weakness in their 40s, which slowly progressed toward a limb-girdle pattern. Further evaluation of the affected individuals revealed no apparent motor neuron dysfunction, cognitive impairment, or bone abnormality. The muscle pathology was compatible with IBM, lacking apparent neurogenic change and inflammation. Multiple immunohistochemical analyses revealed the cytoplasmic aggregation of hnRNPA1 in close association with autophagosomes and myonuclei. Furthermore, the aberrant accumulation was characterized by coaggregation with ubiquitin, sequestome-1/p62, valosin-containing protein/p97, and a variety of RNA-binding proteins (RBPs). CONCLUSIONS: The present study expands the clinical phenotype of hnRNPA1-linked multisystem proteinopathy. Mutations in hnRNPA1, and possibly hnRNPA2B1, will be responsible for isolated IBM with a pure muscular phenotype. Although the mechanisms underlying the selective skeletal muscle involvement remain to be elucidated, the immunohistochemical results suggest a broad sequestration of RBPs by the mutated hnRNPA1.
Role of the Atg9a gene in intrauterine growth and survival of fetal mice 査読有り

Takashi Kojima, Takahiro Yamada, Rina Akaishi, Itsuko Furuta, Tatsuya Saitoh, Kazuhiko Nakabayashi, Keiichi I. Nakayama, Keiko Nakayama, Shizuo Akira, Hisanori Minakami

REPRODUCTIVE BIOLOGY　15　(3)　131-138　2015年9月

DOI： 10.1016/j.repbio.2015.05.001 　

ISSN：1642-431X
Protein monoubiquitylation: targets and diverse functions 査読有り

Tadashi Nakagawa, Keiko Nakayama

GENES TO CELLS　20　(7)　543-562　2015年7月

DOI： 10.1111/gtc.12250 　

ISSN：1356-9597

eISSN：1365-2443
Genomic analysis identifies candidate pathogenic variants in 9 of 18 patients with unexplained West syndrome. 国際誌査読有り

Naomi Hino-Fukuyo, Atsuo Kikuchi, Natsuko Arai-Ichinoi, Tetsuya Niihori, Ryo Sato, Tasuku Suzuki, Hiroki Kudo, Yuko Sato, Tojo Nakayama, Yosuke Kakisaka, Yuki Kubota, Tomoko Kobayashi, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Mitsugu Uematsu, Yoko Aoki, Kazuhiro Haginoya, Shigeo Kure

Human genetics　134　(6)　649-58　2015年6月

DOI： 10.1007/s00439-015-1553-6 　

詳細を見る詳細を閉じる

West syndrome, which is narrowly defined as infantile spasms that occur in clusters and hypsarrhythmia on EEG, is the most common early-onset epileptic encephalopathy (EOEE). Patients with West syndrome may have clear etiologies, including perinatal events, infections, gross chromosomal abnormalities, or cases followed by other EOEEs. However, the genetic etiology of most cases of West syndrome remains unexplained. DNA from 18 patients with unexplained West syndrome was subjected to microarray-based comparative genomic hybridization (array CGH), followed by trio-based whole-exome sequencing in 14 unsolved families. We identified candidate pathogenic variants in 50% of the patients (n = 9/18). The array CGH revealed candidate pathogenic copy number variations in four cases (22%, 4/18), including an Xq28 duplication, a 16p11.2 deletion, a 16p13.1 deletion and a 19p13.2 deletion disrupting CACNA1A. Whole-exome sequencing identified candidate mutations in known epilepsy genes in five cases (36%, 5/14). Three candidate de novo mutations were identified in three cases, with two mutations occurring in two new candidate genes (NR2F1 and CACNA2D1) (21%, 3/14). Hemizygous candidate mutations in ALG13 and BRWD3 were identified in the other two cases (14%, 2/14). Evaluating a panel of 67 known EOEE genes failed to identify significant mutations. Despite the heterogeneity of unexplained West syndrome, the combination of array CGH and whole-exome sequencing is an effective means of evaluating the genetic background in unexplained West syndrome. We provide additional evidence for NR2F1 as a causative gene and for CACNA2D1 and BRWD3 as candidate genes for West syndrome.
Mutations in PIGL in a patient with Mabry syndrome. 国際誌査読有り

Ikuma Fujiwara, Yoshiko Murakami, Tetsuya Niihori, Junko Kanno, Akiko Hakoda, Osamu Sakamoto, Nobuhiko Okamoto, Ryo Funayama, Takeshi Nagashima, Keiko Nakayama, Taroh Kinoshita, Shigeo Kure, Yoichi Matsubara, Yoko Aoki

American journal of medical genetics. Part A　167A　(4)　777-85　2015年4月

DOI： 10.1002/ajmg.a.36987 　

詳細を見る詳細を閉じる

Mabry syndrome, hyperphosphatasia mental retardation syndrome (HPMRS), is an autosomal recessive disease characterized by increased serum levels of alkaline phosphatase (ALP), severe developmental delay, intellectual disability, and seizures. Recent studies have revealed mutations in PIGV, PIGW, PIGO, PGAP2, and PGAP3 (genes that encode molecules of the glycosylphosphatidylinositol (GPI)-anchor biosynthesis pathway) in patients with HPMRS. We performed whole-exome sequencing of a patient with severe intellectual disability, distinctive facial appearance, fragile nails, and persistent increased serum levels of ALP. The result revealed a compound heterozygote with a 13-bp deletion in exon 1 (c.36_48del) and a two-base deletion in exon 2 (c.254_255del) in phosphatidylinositol glycan anchor, class L (PIGL) that caused frameshifts resulting in premature terminations. The 13-bp deletion was inherited from the father, and the two-base deletion was inherited from the mother. Expressing c.36_48del or c.254_255del cDNA with an HA-tag at the C- or N-terminus in PIGL-deficient CHO cells only partially restored the surface expression of GPI-anchored proteins (GPI-APs). Nonsynonymous changes or frameshift mutations in PIGL have been identified in patients with CHIME syndrome, a rare autosomal recessive disorder characterized by colobomas, congenital heart defects, early onset migratory ichthyosiform dermatosis, intellectual disability, and ear abnormalities. Our patient did not have colobomas, congenital heart defects, or early onset migratory ichthyosiform dermatosis and hence was diagnosed with HPMRS, and not CHIME syndrome. These results suggest that frameshift mutations that result in premature termination in PIGL cause a phenotype that is consistent with HPMRS.
Phosphorylation of p27Kip1 on serine 10 is required for its binding to CRM1 and nuclear export. 国際誌

Noriko Ishida, Taichi Hara, Takumi Kamura, Minoru Yoshida, Keiko Nakayama, Keiichi I Nakayama

The Journal of biological chemistry　290　(11)　6754-6754　2015年3月13日

DOI： 10.1074/jbc.A114.100762 　
CRL4(VprBP) E3 Ligase Promotes Monoubiquitylation and Chromatin Binding of TET Dioxygenases 査読有り

Tadashi Nakagawa, Lei Lv, Makiko Nakagawa, Yanbao Yu, Chao Yu, Ana C. D'Alessio, Keiko Nakayama, Heng-Yu Fan, Xian Chen, Yue Xiong

MOLECULAR CELL　57　(2)　247-260　2015年1月

DOI： 10.1016/j.molcel.2014.12.002 　

ISSN：1097-2765

eISSN：1097-4164
GNE myopathy associated with congenital thrombocytopenia: a report of two siblings. 国際誌査読有り

Rumiko Izumi, Tetsuya Niihori, Naoki Suzuki, Yoji Sasahara, Takeshi Rikiishi, Ayumi Nishiyama, Shuhei Nishiyama, Kaoru Endo, Masaaki Kato, Hitoshi Warita, Hidehiko Konno, Toshiaki Takahashi, Maki Tateyama, Takeshi Nagashima, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Shigeo Kure, Yoichi Matsubara, Yoko Aoki, Masashi Aoki

Neuromuscular disorders : NMD　24　(12)　1068-72　2014年12月

DOI： 10.1016/j.nmd.2014.07.008 　

詳細を見る詳細を閉じる

GNE myopathy is an autosomal recessive muscular disorder caused by mutations in the gene encoding the key enzyme in sialic acid biosynthesis, UDP-N-acetylglucosamine 2-epimerase/N-acetylmannosamine kinase (GNE/MNK). Here, we report two siblings with myopathy with rimmed vacuoles and congenital thrombocytopenia who harbored two compound heterozygous GNE mutations, p.V603L and p.G739S. Thrombocytopenia, which is characterized by shortened platelet lifetime rather than ineffective thrombopoiesis, has been observed since infancy. We performed exome sequencing and array CGH to identify the underlying genetic etiology of thrombocytopenia. No pathogenic variants were detected among the known causative genes of recessively inherited thrombocytopenia; yet, candidate variants in two genes that followed an autosomal recessive mode of inheritance, including previously identified GNE mutations, were detected. Alternatively, it is possible that the decreased activity of GNE/MNK itself, which would lead to decreased sialic content in platelets, is associated with thrombocytopenia in these patients. Further investigations are required to clarify the association between GNE myopathy and the pathogenesis of thrombocytopenia.
胎生期ストレスが胎児のエピゲノム変化および精神行動に及ぼす影響の特定査読有り

兪志前, 舟山亮, 植野和子, 成相直樹, 小島要, 小野千晶, 笠原好之, 長崎正朗, 中山啓子, 富田博秋

日本臨床精神神経薬理学会・日本神経精神薬理学会合同年会プログラム・抄録集　24回・44回　204-204　2014年11月
出版者・発行元：日本臨床精神神経薬理学会・日本神経精神薬理学会
PEX14欠損マウスにおける大脳皮質の形態とリン脂質の解析

阿部雄一, 伊藤竜太, 中山啓子, 丸谷寿裕, 本庄雅則, 藤谷昌司, 山下俊英, 中山敬一, 藤木幸夫

日本生化学会大会プログラム・講演要旨集　87回　[3T14a-05]　2014年10月
出版者・発行元： (公社)日本生化学会
Identification of acquired mutations by whole-genome sequencing in GATA-2 deficiency evolving into myelodysplasia and acute leukemia 査読有り

Tohru Fujiwara, Noriko Fukuhara, Ryo Funayama, Naoki Nariai, Mayumi Kamata, Takeshi Nagashima, Kaname Kojima, Yasushi Onishi, Yoji Sasahara, Kenichi Ishizawa, Masao Nagasaki, Keiko Nakayama, Hideo Harigae

ANNALS OF HEMATOLOGY　93　(9)　1515-1522　2014年9月

DOI： 10.1007/s00277-014-2090-4 　

ISSN：0939-5555

eISSN：1432-0584
HCV Infection Enhances Th17 Commitment, Which Could Affect the Pathogenesis of Autoimmune Diseases 査読有り

Yasuteru Kondo, Masashi Ninomiya, Osamu Kimura, Keigo Machida, Ryo Funayama, Takeshi Nagashima, Koju Kobayashi, Eiji Kakazu, Takanobu Kato, Keiko Nakayama, Michael M. C. Lai, Tooru Shimosegawa

PLOS ONE　9　(6)　e98521-e98521　2014年6月

DOI： 10.1371/journal.pone.0098521 　

ISSN：1932-6203
Skp2 suppresses apoptosis in Rb1-deficient tumours by limiting E2F1 activity 査読有り

Zhonglei Lu, Frederick Bauzon, Hao Fu, Jinhua Cui, Hongling Zhao, Keiko Nakayama, Keiich I. Nakayama, Liang Zhu

NATURE COMMUNICATIONS　5　3463-3463　2014年3月

DOI： 10.1038/ncomms4463 　

ISSN：2041-1723
p27 is regulated independently of Skp2 in the absence of Cdk2 査読有り

Shuhei Kotoshiba, Lakshmi Gopinathan, Elisabeth Pfeiffenberger, Anisa Rahim, Leah A. Vardy, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Philipp Kaldis

BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-MOLECULAR CELL RESEARCH　1843　(2)　436-445　2014年2月

DOI： 10.1016/j.bbamcr.2013.11.005 　

ISSN：0167-4889

eISSN：0006-3002
RNA sequencing-based identification of aberrant imprinting in cloned mice 査読有り

Hiroaki Okae, Shogo Matoba, Takeshi Nagashima, Eiji Mizutani, Kimiko Inoue, Narumi Ogonuki, Hatsune Chiba, Ryo Funayama, Satoshi Tanaka, Nobuo Yaegashi, Keiko Nakayama, Hiroyuki Sasaki, Atsuo Ogura, Takahiro Arima

HUMAN MOLECULAR GENETICS　23　(4)　992-1001　2014年2月

DOI： 10.1093/hmg/ddt495 　

ISSN：0964-6906

eISSN：1460-2083
TBX1 mutation identified by exome sequencing in a Japanese family with 22q11.2 deletion syndrome-like craniofacial features and hypocalcemia. 国際誌査読有り

Tsutomu Ogata, Tetsuya Niihori, Noriko Tanaka, Masahiko Kawai, Takeshi Nagashima, Ryo Funayama, Keiko Nakayama, Shinichi Nakashima, Fumiko Kato, Maki Fukami, Yoko Aoki, Yoichi Matsubara

PloS one　9　(3)　e91598-e91598　2014年

DOI： 10.1371/journal.pone.0091598 　

詳細を見る詳細を閉じる

BACKGROUND: Although TBX1 mutations have been identified in patients with 22q11.2 deletion syndrome (22q11.2DS)-like phenotypes including characteristic craniofacial features, cardiovascular anomalies, hypoparathyroidism, and thymic hypoplasia, the frequency of TBX1 mutations remains rare in deletion-negative patients. Thus, it would be reasonable to perform a comprehensive genetic analysis in deletion-negative patients with 22q11.2DS-like phenotypes. METHODOLOGY/PRINCIPAL FINDINGS: We studied three subjects with craniofacial features and hypocalcemia (group 1), two subjects with craniofacial features alone (group 2), and three subjects with normal phenotype within a single Japanese family. Fluorescence in situ hybridization analysis excluded chromosome 22q11.2 deletion, and genomewide array comparative genomic hybridization analysis revealed no copy number change specific to group 1 or groups 1+2. However, exome sequencing identified a heterozygous TBX1 frameshift mutation (c.1253delA, p.Y418fsX459) specific to groups 1+2, as well as six missense variants and two in-frame microdeletions specific to groups 1+2 and two missense variants specific to group 1. The TBX1 mutation resided at exon 9C and was predicted to produce a non-functional truncated protein missing the nuclear localization signal and most of the transactivation domain. CONCLUSIONS/SIGNIFICANCE: Clinical features in groups 1+2 are well explained by the TBX1 mutation, while the clinical effects of the remaining variants are largely unknown. Thus, the results exemplify the usefulness of exome sequencing in the identification of disease-causing mutations in familial disorders. Furthermore, the results, in conjunction with the previous data, imply that TBX1 isoform C is the biologically essential variant and that TBX1 mutations are associated with a wide phenotypic spectrum, including most of 22q11.2DS phenotypes.
Skp2 Deletion Unmasks a p27 Safeguard that Blocks Tumorigenesis in the Absence of pRb and p53 Tumor Suppressors 査読有り

Hongling Zhao, Frederick Bauzon, Hao Fu, Zhonglei Lu, Jinhua Cui, Keiko Nakayama, Keiich I. Nakayama, Joseph Locker, Liang Zhu

Cancer Cell　24　(5)　645-659　2013年11月11日

DOI： 10.1016/j.ccr.2013.09.021 　

ISSN：1535-6108 1878-3686
Lymphotropic HCV infection enhances Th17 commitment, which could affect the pathogenesis of autoimmune and cryoglobuline-related diseases 査読有り

Kondo Yasuteru, Ninomiya Masashi, Kimura Osamu, Machida Keigo, Funayama Ryo, Nagashima Takeshi, Kobayashi Koju, Kakazu Eiji, Kogure Takayuki, Kato Takanobu, Nakayama Keiko, Shimosegawa Tooru

HEPATOLOGY　58　1187A-1188A　2013年10月

ISSN：0270-9139
Loss of Protein Kinase C-δ Protects against LPS-Induced Osteolysis Owing to an Intrinsic Defect in Osteoclastic Bone Resorption 査読有り

Ee Cheng Khor, Tamara Abel, Jennifer Tickner, Shek Man Chim, Cathy Wang, Taksum Cheng, Benjamin Ng, Pei Ying Ng, Dian Astari Teguh, Jacob Kenny, Xiaohong Yang, Honghui Chen, Keiichi I. Nakayama, Keiko Nakayama, Nathan Pavlos, Ming H. Zheng, Jiake Xu

PLoS ONE　8　(8)　e70815-e70815　2013年8月8日

DOI： 10.1371/journal.pone.0070815 　

ISSN：1932-6203
Ras-Induced Changes in H3K27me3 Occur after Those in Transcriptional Activity 査読有り

Masaki Hosogane, Ryo Funayama, Yuichiro Nishida, Takeshi Nagashima, Keiko Nakayama

PLOS GENETICS　9　(8)　e1003698-e1003698　2013年8月

DOI： 10.1371/journal.pgen.1003698 　

ISSN：1553-7404
Gain-of-function mutations in RIT1 cause Noonan syndrome, a RAS/MAPK pathway syndrome. 国際誌査読有り

Yoko Aoki, Tetsuya Niihori, Toshihiro Banjo, Nobuhiko Okamoto, Seiji Mizuno, Kenji Kurosawa, Tsutomu Ogata, Fumio Takada, Michihiro Yano, Toru Ando, Tadataka Hoshika, Christopher Barnett, Hirofumi Ohashi, Hiroshi Kawame, Tomonobu Hasegawa, Takahiro Okutani, Tatsuo Nagashima, Satoshi Hasegawa, Ryo Funayama, Takeshi Nagashima, Keiko Nakayama, Shin-Ichi Inoue, Yusuke Watanabe, Toshihiko Ogura, Yoichi Matsubara

American journal of human genetics　93　(1)　173-80　2013年7月11日

DOI： 10.1016/j.ajhg.2013.05.021 　

詳細を見る詳細を閉じる

RAS GTPases mediate a wide variety of cellular functions, including cell proliferation, survival, and differentiation. Recent studies have revealed that germline mutations and mosaicism for classical RAS mutations, including those in HRAS, KRAS, and NRAS, cause a wide spectrum of genetic disorders. These include Noonan syndrome and related disorders (RAS/mitogen-activated protein kinase [RAS/MAPK] pathway syndromes, or RASopathies), nevus sebaceous, and Schimmelpenning syndrome. In the present study, we identified a total of nine missense, nonsynonymous mutations in RIT1, encoding a member of the RAS subfamily, in 17 of 180 individuals (9%) with Noonan syndrome or a related condition but with no detectable mutations in known Noonan-related genes. Clinical manifestations in the RIT1-mutation-positive individuals are consistent with those of Noonan syndrome, which is characterized by distinctive facial features, short stature, and congenital heart defects. Seventy percent of mutation-positive individuals presented with hypertrophic cardiomyopathy; this frequency is high relative to the overall 20% incidence in individuals with Noonan syndrome. Luciferase assays in NIH 3T3 cells showed that five RIT1 alterations identified in children with Noonan syndrome enhanced ELK1 transactivation. The introduction of mRNAs of mutant RIT1 into 1-cell-stage zebrafish embryos was found to result in a significant increase of embryos with craniofacial abnormalities, incomplete looping, a hypoplastic chamber in the heart, and an elongated yolk sac. These results demonstrate that gain-of-function mutations in RIT1 cause Noonan syndrome and show a similar biological effect to mutations in other RASopathy-related genes.
Bach1 is critical for the transformation of mouse embryonic fibroblasts by Ras(V12) and maintains ERK signaling 査読有り

A. Nakanome, A. Brydun, M. Matsumoto, K. Ota, R. Funayama, K. Nakayama, M. Ono, K. Shiga, T. Kobayashi, K. Igarashi

ONCOGENE　32　(27)　3231-3245　2013年7月

DOI： 10.1038/onc.2012.336 　

ISSN：0950-9232
Y chromosome-linked B and NK cell deficiency in mice 査読有り

Shu-Lan Sun, Satoshi Horino, Ari Itoh-Nakadai, Takeshi Kawabe, Atsuko Asao, Takeshi Takahashi, Takanori So, Ryo Funayama, Motonari Kondo, Hirotomo Saitsu, Naomichi Matsumoto, Keiko Nakayama, Naoto Ishii

Journal of Immunology　190　(12)　6209-6220　2013年6月15日

DOI： 10.4049/jimmunol.1300303 　

ISSN：0022-1767 1550-6606
Distinct MicroRNAs Expression Profile in Primary Biliary Cirrhosis and Evaluation of miR 505-3p and miR197-3p as Novel Biomarkers 査読有り

Masashi Ninomiya, Yasuteru Kondo, Ryo Funayama, Takeshi Nagashima, Takayuki Kogure, Eiji Kakazu, Osamu Kimura, Yoshiyuki Ueno, Keiko Nakayama, Tooru Shimosegawa

PLOS ONE　8　(6)　e66086-e66086　2013年6月

DOI： 10.1371/journal.pone.0066086 　

ISSN：1932-6203
Exome sequencing identifies a novel TTN mutation in a family with hereditary myopathy with early respiratory failure. 国際誌査読有り

Rumiko Izumi, Tetsuya Niihori, Yoko Aoki, Naoki Suzuki, Masaaki Kato, Hitoshi Warita, Toshiaki Takahashi, Maki Tateyama, Takeshi Nagashima, Ryo Funayama, Koji Abe, Keiko Nakayama, Masashi Aoki, Yoichi Matsubara

Journal of human genetics　58　(5)　259-66　2013年5月

DOI： 10.1038/jhg.2013.9 　

詳細を見る詳細を閉じる

Myofibrillar myopathy (MFM) is a group of chronic muscular disorders that show the focal dissolution of myofibrils and accumulation of degradation products. The major genetic basis of MFMs is unknown. In 1993, our group reported a Japanese family with dominantly inherited cytoplasmic body myopathy, which is now included in MFM, characterized by late-onset chronic progressive distal muscle weakness and early respiratory failure. In this study, we performed linkage analysis and exome sequencing on these patients and identified a novel c.90263G>T mutation in the TTN gene (NM_001256850). During the course of our study, another groups reported three mutations in TTN in patients with hereditary myopathy with early respiratory failure (HMERF, MIM #603689), which is characterized by overlapping pathologic findings with MFMs. Our patients were clinically compatible with HMERF. The mutation identified in this study and the three mutations in patients with HMERF were located on the A-band domain of titin, suggesting a strong relationship between mutations in the A-band domain of titin and HMERF. Mutation screening of TTN has been rarely carried out because of its huge size, consisting of 363 exons. It is possible that focused analysis of TTN may detect more mutations in patients with MFMs, especially in those with early respiratory failure.
原発性胆汁性肝硬変における治療前後での血清内microRNAの発現の変化

二宮匡史, 近藤泰輝, 小暮高之, 嘉数英二, 木村修, 舟山亮, 長嶋剛史, 中山啓子, 下瀬川徹

日本臨床分子医学会学術総会プログラム・抄録集　50回　68-68　2013年4月
出版者・発行元：日本臨床分子医学会
Opposing functions of Fbxw7 in keratinocyte growth, differentiation and skin tumorigenesis mediated through negative regulation of c-Myc and Notch 査読有り

Y. Ishikawa, M. Hosogane, R. Okuyama, S. Aoyama, I. Onoyama, K. I. Nakayama, K. Nakayama

ONCOGENE　32　(15)　1921-1932　2013年4月

DOI： 10.1038/onc.2012.213 　

ISSN：0950-9232
Protein Kinase C-Delta Deficiency Perturbs Bone Homeostasis by Selective Uncoupling of Cathepsin K Secretion and Ruffled Border Formation in Osteoclasts 査読有り

Viviana Cremasco, Corinne E. Decker, Deborah Stumpo, Perry J. Blackshear, Keiichi I. Nakayama, Keiko Nakayama, Traian S. Lupu, Daniel B. Graham, Deborah V. Novack, Roberta Faccio

JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH　27　(12)　2452-2463　2012年12月

DOI： 10.1002/jbmr.1701 　

ISSN：0884-0431
Nrf2-MafG heterodimers contribute globally to antioxidant and metabolic networks 査読有り

Yosuke Hirotsu, Fumiki Katsuoka, Ryo Funayama, Takeshi Nagashima, Yuichiro Nishida, Keiko Nakayama, James Douglas Engel, Masayuki Yamamoto

NUCLEIC ACIDS RESEARCH　40　(20)　10228-10239　2012年11月

DOI： 10.1093/nar/gks827 　

ISSN：0305-1048

eISSN：1362-4962
Development of mice without Cip/Kip CDK inhibitors 査読有り

Yuki Tateishi, Akinobu Matsumoto, Tomoharu Kanie, Eiji Hara, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama

BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS　427　(2)　285-292　2012年10月

DOI： 10.1016/j.bbrc.2012.09.041 　

ISSN：0006-291X
Acetylation-Dependent Regulation of Skp2 Function 査読有り

Hiroyuki Inuzuka, Daming Gao, Lydia W. S. Finley, Wen Yang, Lixin Wan, Hidefumi Fukushima, Y. Rebecca Chin, Bo Zhai, Shavali Shaik, Alan W. Lau, Zhiwei Wang, Steven P. Gygi, Keiko Nakayama, Julie Teruya-Feldstein, Alex Toker, Marcia C. Haigis, Pier Paolo Pandolfi, Wenyi Wei

CELL　150　(1)　179-193　2012年7月

DOI： 10.1016/j.cell.2012.05.038 　

ISSN：0092-8674
SCF(Fbw7) modulates the NFkB signaling pathway by targeting NFkB2 for ubiquitination and destruction. 国際誌査読有り

Hidefumi Fukushima, Akinobu Matsumoto, Hiroyuki Inuzuka, Bo Zhai, Alan W Lau, Lixin Wan, Daming Gao, Shavali Shaik, Min Yuan, Steven P Gygi, Eijiro Jimi, John M Asara, Keiko Nakayama, Keiichi I Nakayama, Wenyi Wei

Cell reports　1　(5)　434-43　2012年5月31日

DOI： 10.1016/j.celrep.2012.04.002 　

eISSN：2211-1247

詳細を見る詳細を閉じる

The NFkB/Rel family of proteins play critical roles in a variety of cellular processes. Thus, their physiological activation is tightly controlled. Recently, the NFkB2/p100 precursor has been characterized as the fourth IkB type of suppressor for NFkB. However, the molecular mechanism(s) underlying regulated destruction of NFkB2 remains largely unknown. Here, we report that, unlike other IkBs, ubiquitination and destruction of NFkB2 are governed by SCF(Fbw7) in a GSK3-dependent manner. In Fbw(7-/-) cells, elevated expression of NFkB2/p100 leads to a subsequent reduction in NFkB signaling pathways and elevated sensitivity to TNFa-induced cell death. Reintroducing wild-type Fbw7, but not disease-derived mutant forms of Fbw7, rescues NFkB activity. Furthermore, T cell-specific depletion of Fbw7 also leads to reduced NFkB activity and perturbed T cell differentiation. Therefore, our work identifies Fbw7 as a physiological E3 ligase controlling NFkB20s stability. It further implicates that Fbw7 might exert its tumor-suppressor function by regulating NFkB activity.
The Amelioration of Renal Damage in Skp2-Deficient Mice Canceled by p27 (Kip1) Deficiency in Skp2(-/-) p27(-/-) Mice 査読有り

Sayuri Suzuki, Hirotaka Fukasawa, Taro Misaki, Akashi Togawa, Naro Ohashi, Kyoko Kitagawa, Yojiro Kotake, Ning Liu, Hiroyuki Niida, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Tatsuo Yamamoto, Masatoshi Kitagawa

PLOS ONE　7　(4)　e36249-e36249　2012年4月

DOI： 10.1371/journal.pone.0036249 　

ISSN：1932-6203
Use of Illumina Deep Sequencing Technology To Differentiate Hepatitis C Virus Variants 査読有り

Masashi Ninomiya, Yoshiyuki Ueno, Ryo Funayama, Takeshi Nagashima, Yuichiro Nishida, Yasuteru Kondo, Jun Inoue, Eiji Kakazu, Osamu Kimura, Keiko Nakayama, Tooru Shimosegawa

JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY　50　(3)　857-866　2012年3月

DOI： 10.1128/JCM.05715-11 　

ISSN：0095-1137
Re-investigation and RNA sequencing-based identification of genes with placenta-specific imprinted expression 査読有り

Hiroaki Okae, Hitoshi Hiura, Yuichiro Nishida, Ryo Funayama, Satoshi Tanaka, Hatsune Chiba, Nobuo Yaegashi, Keiko Nakayama, Hiroyuki Sasaki, Takahiro Arima

HUMAN MOLECULAR GENETICS　21　(3)　548-558　2012年2月

DOI： 10.1093/hmg/ddr488 　

ISSN：0964-6906
Corneal Antifibrotic Switch Identified in Genetic and Pharmacological Deficiency of Vimentin 査読有り

Paola Bargagna-Mohan, Riya R. Paranthan, Adel Hamza, Chang-Guo Zhan, Do-Min Lee, Kyung Bo Kim, Daniel L. Lau, Cidambi Srinivasan, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Harald Herrmann, Royce Mohan

JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY　287　(2)　989-1006　2012年1月

DOI： 10.1074/jbc.M111.297150 　

ISSN：0021-9258
Deficient p27 Phosphorylation at Serine 10 Increases Macrophage Foam Cell Formation and Aggravates Atherosclerosis Through a Proliferation-Independent Mechanism 招待有り査読有り

Jose J. Fuster, Herminia Gonzalez-Navarro, Angela Vinue, Pedro Molina-Sanchez, Maria J. Andres-Manzano, Keiichi I. Nakayama, Keiko Nakayama, Antonio Diez-Juan, Antonio Bernad, Cristina Rodriguez, Jose Martinez-Gonzalez, Vicente Andres

ARTERIOSCLEROSIS THROMBOSIS AND VASCULAR BIOLOGY　31　(11)　2455-U252　2011年11月

DOI： 10.1161/ATVBAHA.111.235580 　

ISSN：1079-5642
Deregulation of the p57-E2F1-p53 Axis Results in Nonobstructive Hydrocephalus and Cerebellar Malformation in Mice 招待有り査読有り

Akinobu Matsumoto, Etsuo Susaki, Ichiro Onoyama, Keiko Nakayama, Mikio Hoshino, Keiichi I. Nakayama

MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY　31　(20)　4176-4192　2011年10月

DOI： 10.1128/MCB.05370-11 　

ISSN：0270-7306
p57(KiP2) and p27(Kip1) Cooperate to Maintain Hematopoietic Stem Cell Quiescence through Interactions with Hsc70 招待有り査読有り

Peng Zou, Hiroki Yoshihara, Kentaro Hosokawa, Ikue Tai, Kaori Shinmyozu, Fujiko Tsukahara, Yoshiro Maru, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Toshio Suda

CELL STEM CELL　9　(3)　247-261　2011年9月

DOI： 10.1016/j.stem.2011.07.003 　

ISSN：1934-5909
p57 Is Required for Quiescence and Maintenance of Adult Hematopoietic Stem Cells 査読有り

Akinobu Matsumoto, Shoichiro Takeishi, Tomoharu Kanie, Etsuo Susaki, Ichiro Onoyama, Yuki Tateishi, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama

CELL STEM CELL　9　(3)　262-271　2011年9月

DOI： 10.1016/j.stem.2011.06.014 　

ISSN：1934-5909
Impaired ovarian development and reduced fertility in female mice deficient in Skp2 査読有り

Abbas Fotovati, Samah Abu-Ali, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama

JOURNAL OF ANATOMY　218　(6)　668-677　2011年6月

DOI： 10.1111/j.1469-7580.2011.01370.x 　

ISSN：0021-8782
Fbxw7β resides in the endoplasmic reticulum membrane and protects cells from oxidative stress. 国際誌査読有り

Akinobu Matsumoto, Yuki Tateishi, Ichiro Onoyama, Yasutaka Okita, Keiko Nakayama, Keiichi I Nakayama

Cancer science　102　(4)　749-55　2011年4月

DOI： 10.1111/j.1349-7006.2011.01851.x 　

詳細を見る詳細を閉じる

Oxidative stress has been implicated in cancer initiation and progression. Fbxw7 (also known as Fbw7, SEL-10, hCdc4, or hAgo) is the F-box protein subunit of an Skp1-Cul1-F-box (SCF)-type ubiquitin ligase complex that plays a central role in the degradation of oncoproteins such as c-Myc, c-Jun, Notch, and cyclin E. Fbxw7 is therefore thought to function as a tumor suppressor, and indeed the Fbxw7 gene is frequently mutated in many human malignancies. The Fbxw7 gene locus encodes three protein isoforms: Fbxw7α, Fbxw7β, and Fbxw7γ. Whereas Fbxw7α and Fbxw7γ are resident in the nucleus, Fbxw7β shows a cytoplasmic distribution suggestive of localization to the endoplasmic reticulum (ER). The specific function of Fbxw7β has remained unknown, however. We now show that Fbxw7β contains a putative transmembrane domain near its NH(2) -terminus, and topological analysis revealed that Fbxw7β is inserted in the ER membrane. Fbxw7β assembled with Skp1, Cul1, and Rbx1 to form an SCF complex, although the efficiency of this process appeared lower than that for Fbxw7α or Fbxw7γ. To explore the physiological role of Fbxw7β, we generated mice specifically lacking this isoform of Fbxw7. Although these animals did not exhibit any apparent abnormalities in development, primary cultures of neurons prepared from the mutant mice were more vulnerable to oxidative stress than were those prepared from wild-type mice. Conversely, overexpression of Fbxw7β rendered cells resistant to oxidative stress, without affecting sensitivity to ER stress or other apoptosis-inducing agents. Our results thus suggest that Fbxw7β contributes to the protection of cells from oxidative stress.
Fbxw7 regulates lipid metabolism and cell fate decisions in the mouse liver. 国際誌査読有り

Ichiro Onoyama, Atsushi Suzuki, Akinobu Matsumoto, Kengo Tomita, Hideki Katagiri, Yuichi Oike, Keiko Nakayama, Keiichi I Nakayama

The Journal of clinical investigation　121　(1)　342-54　2011年1月

DOI： 10.1172/JCI40725 　

詳細を見る詳細を閉じる

E3 ubiquitin ligase complexes of the SCF type consist of ring-box 1 (Rbx1), cullin 1 (Cul1), S-phase kinase-associated protein 1 (Skp1), and a member of the F-box family of proteins. The identity of the F-box protein determines the substrate specificity of the complex. The F-box family member F-box- and WD repeat domain-containing 7 (Fbxw7; also known as Fbw7, SEL-10, hCdc4, and hAgo) targets for degradation proteins with wide-ranging functions, and uncovering its in vivo role has been difficult, because Fbxw7-/- embryos die in utero. Using two different Cre-loxP systems (Mx1-Cre and Alb-Cre), we generated mice with liver-specific null mutations of Fbxw7. Hepatic ablation of Fbxw7 resulted in hepatomegaly and steatohepatitis, with massive deposition of triglyceride, a phenotype similar to that observed in humans with nonalcoholic steatohepatitis. Both cell proliferation and the abundance of Fbxw7 substrates were increased in the Fbxw7-deficient liver. Long-term Fbxw7 deficiency resulted in marked proliferation of the biliary system and the development of hamartomas. Fbxw7 deficiency also skewed the differentiation of liver stem cells toward the cholangiocyte lineage rather than the hepatocyte lineage in vitro. This bias was corrected by additional loss of the Notch cofactor RBP-J, suggesting that Notch accumulation triggered the abnormal proliferation of the biliary system. Together, our results suggest that Fbxw7 plays key roles, regulating lipogenesis and cell proliferation and differentiation in the liver.
Localization of SMAP2 to the TGN and its Function in the Regulation of TGN Protein Transport 招待有り査読有り

Tomo Funaki, Shunsuke Kon, Roger E. Ronn, Yuji Henmi, Yuka Kobayashi, Toshio Watanabe, Keiko Nakayama, Kenji Tanabe, Masanobu Satake

CELL STRUCTURE AND FUNCTION　36　(1)　83-95　2011年

DOI： 10.1247/csf.10022 　

ISSN：0386-7196

eISSN：1347-3700
A Diacylglycerol-Dependent Signaling Pathway Contributes to Regulation of Antibacterial Autophagy 査読有り

Shahab Shahnazari, Wei-Lien Yen, Cheryl L. Birmingham, Jessica Shiu, Anton Namolovan, Yiyu T. Zheng, Keiko Nakayama, Daniel J. Klionsky, John H. Brumell

CELL HOST & MICROBE　8　(2)　137-146　2010年8月

DOI： 10.1016/j.chom.2010.07.002 　

ISSN：1931-3128
Nuclear IKK beta Is an Adaptor Protein for I kappa B alpha Ubiquitination and Degradation in UV-Induced NF-kappa B Activation 招待有り査読有り

Yoshihiro Tsuchiya, Tomoichiro Asano, Keiko Nakayama, Tomohisa Kato, Michael Karin, Hideaki Kamata

MOLECULAR CELL　39　(4)　570-582　2010年8月

DOI： 10.1016/j.molcel.2010.07.030 　

ISSN：1097-2765
Inhibition of FOXO3 Tumor Suppressor Function by beta TrCP1 through Ubiquitin-Mediated Degradation in a Tumor Mouse Model 査読有り

Wen-Bin Tsai, Young Min Chung, Yiyu Zou, See-Hyoung Park, Zhaohui Xu, Keiko Nakayama, Sue-Hwa Lin, Mickey C-T. Hu

PLOS ONE　5　(7)　e11171-e11171　2010年7月

DOI： 10.1371/journal.pone.0011171 　

ISSN：1932-6203
Complex regulation of cell-cycle inhibitors by Fbxw7 in mouse embryonic fibroblasts 査読有り

K. Masuda, Y. Ishikawa, I. Onoyama, M. Unno, I. M. de Alboran, K. I. Nakayama, K. Nakayama

ONCOGENE　29　(12)　1798-1809　2010年3月

DOI： 10.1038/onc.2009.469 　

ISSN：0950-9232
Skp2 is required for survival of aberrantly proliferating Rb1-deficient cells and for tumorigenesis in Rb1(+/-) mice 査読有り

Hongbo Wang, Frederick Bauzon, Peng Ji, Xiaoliang Xu, Daqian Sun, Joseph Locker, Rani S. Sellers, Keiko Nakayama, Keiich I. Nakayama, David Cobrinik, Liang Zhu

NATURE GENETICS　42　(1)　83-U105　2010年1月

DOI： 10.1038/ng.498 　

ISSN：1061-4036

eISSN：1546-1718
S-phase kinase-associated protein-2 (Skp2) promotes vascular smooth muscle cell proliferation and neointima formation in vivo 査読有り

Yih-Jer Wu, Graciela B. Sala-Newby, Kuo-Tung Shu, Hung-I Yeh, Keiichi I. Nakayama, Keiko Nakayama, Andrew C. Newby, Mark Bond

JOURNAL OF VASCULAR SURGERY　50　(5)　1135-1142　2009年11月

DOI： 10.1016/j.jvs.2009.07.066 　

ISSN：0741-5214
Mechanoregulation of Proliferation 査読有り

Xiaogang Jiang, Paul F. Austin, Robert A. Niederhoff, Scott R. Manson, Jacob J. Riehm, Brian L. Cook, Gina Pengue, Kanchan Chitaley, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Steven J. Weintraub

MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY　29　(18)　5104-5114　2009年9月

DOI： 10.1128/MCB.00465-09 　

ISSN：0270-7306
Human synovial sarcoma proto-oncogene Syt is essential for early embryonic development through the regulation of cell migration 査読有り

Taichi Kimura, Mieko Sakai, Kouichi Tabu, Lei Wang, Ryosuke Tsunematsu, Masumi Tsuda, Hirofumi Sawa, Kazuo Nagashima, Hiroshi Nishihara, Shigetsugu Hatakeyama, Keiko Nakayama, Marc Ladanyi, Shinya Tanaka, Keiichi I. Nakayama

LABORATORY INVESTIGATION　89　(6)　645-656　2009年6月

DOI： 10.1038/labinvest.2009.25 　

ISSN：0023-6837
Protein Kinase C delta Differentially Regulates Platelet Functional Responses 査読有り

Ramya Chari, Todd Getz, Bela Nagy, Kamala Bhavaraju, Yingying Mao, Yamini Saraswathy Bynagari, Swaminathan Murugappan, Keiko Nakayama, Satya P. Kunapuli

ARTERIOSCLEROSIS THROMBOSIS AND VASCULAR BIOLOGY　29　(5)　699-705　2009年5月

DOI： 10.1161/ATVBAHA.109.184010 　

ISSN：1079-5642
Common and specific roles of the related CDK inhibitors p27 and p57 revealed by a knock-in mouse model 査読有り

Etsuo Susaki, Keiko Nakayama, Lili Yamasaki, Keiichi I. Nakayama

PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA　106　(13)　5192-5197　2009年3月

DOI： 10.1073/pnas.0811712106 　

ISSN：0027-8424
組織特異的発がん機構の解明招待有り

中山啓子

上原記念生命科学財団研究報告集　22　1-4　2008年12月
The Role of beta-TrCP1 and beta-TrCP2 in Circadian Rhythm Generation by Mediating Degradation of Clock Protein PER2 査読有り

Kanae Ohsaki, Katsutaka Oishi, Yuko Kozono, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Norio Ishida

JOURNAL OF BIOCHEMISTRY　144　(5)　609-618　2008年11月

DOI： 10.1093/jb/mvn112 　

ISSN：0021-924X

eISSN：1756-2651
A functional link between Wnt signaling and SKP2-independent p27 turnover in mammary tumors 査読有り

Gustavo A. Miranda-Carboni, Susan A. Krum, Kathleen Yee, Miguel Nava, Qiming E. Deng, Shehla Pervin, Alicia Collado-Hidalgo, Zoran Galic, Jerome A. Zack, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Timothy F. Lane

GENES & DEVELOPMENT　22　(22)　3121-3134　2008年11月

DOI： 10.1101/gad.1692808 　

ISSN：0890-9369
Notch-dependent cell cycle arrest and apoptosis in mouse embryonic fibroblasts lacking Fbxw7 査読有り

Y. Ishikawa, I. Onoyama, K. I. Nakayama, K. Nakayama

ONCOGENE　27　(47)　6164-6174　2008年10月

DOI： 10.1038/onc.2008.216 　

ISSN：0950-9232
Skp2 regulates the antiproliferative function of the tumor suppressor RASSF1A via ubiquitin-mediated degradation at the G(1)-S transition 査読有り

M. S. Song, S. J. Song, S. J. Kim, K. Nakayama, K. I. Nakayama, D-S Lim

ONCOGENE　27　(22)　3176-3185　2008年5月

DOI： 10.1038/sj.onc.1210971 　

ISSN：0950-9232
Targeting the p27 E3 ligase SCFSkp2 results in p27-and Skp2-mediated cell-cycle arrest and activation of autophagy 査読有り

Qing Chen, Weilin Xie, Deborah J. Kuhn, Peter M. Voorhees, Antonia Lopez-Girona, Derek Mendy, Laura G. Corral, Veronique Plantevin Krenitsky, Weiming Xu, Laure Moutouh-de Parseval, David R. Webb, Frank Mercurio, Keiichi I. Nakayama, Keiko Nakayama, Robert Z. Orlowski

BLOOD　111　(9)　4690-4699　2008年5月

DOI： 10.1182/blood-2007-09-112904 　

ISSN：0006-4971
Fbxw7 acts as a critical fail-safe against premature loss of hematopoietic stem cells and development of T-ALL 査読有り

Sahoko Matsuoka, Yuichi Oike, Ichiro Onoyama, Atsushi Iwama, Fumio Arai, Keiyo Takubo, Yoichi Mashimo, Hideyuki Oguro, Eriko Nitta, Keisuke Ito, Kana Miyamoto, Hiroki Yoshiwara, Kentaro Hosokawa, Yuka Nakamura, Yumiko Gomei, Hiroko Iwasaki, Yasuhide Hayashi, Yumi Matsuzaki, Keiko Nakayama, Yasuo Ikeda, Akira Hata, Shigeru Chiba, Keiichi I. Nakayama, Toshio Suda

GENES & DEVELOPMENT　22　(8)　986-991　2008年4月

DOI： 10.1101/gad.1621808 　

ISSN：0890-9369
【細胞内の輪廻転生タンパク質の分解機構ユビキチン、プロテアソーム、オートファジー、プロテオリシスなど分解装置の作動機構と病態生理作用】ユビキチン SCF型ユビキチンリガーゼによる細胞周期制御と発癌招待有り査読有り

中山敬一, 中山啓子

実験医学　26　(2)　166-174　2008年2月
SCF beta TrCP1 activates and ubiquitylates TAp63 gamma 招待有り査読有り

Jayme R. Gallegos, Joel Litersky, Hunjoo Lee, Yi Sun, Keiichi Nakayama, Keiko Nakayama, Hua Lu

JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY　283　(1)　66-75　2008年1月

DOI： 10.1074/jbc.M704686200 　

ISSN：0021-9258
Conditional inactivation of Fbxw7 impairs cell-cycle exit during T cell differentiation and results in lymphomatogenesis. 国際誌査読有り

Ichiro Onoyama, Ryosuke Tsunematsu, Akinobu Matsumoto, Taichi Kimura, Ignacio Moreno de Alborán, Keiko Nakayama, Keiichi I Nakayama

The Journal of experimental medicine　204　(12)　2875-88　2007年11月26日

DOI： 10.1084/jem.20062299 　

eISSN：1540-9538

詳細を見る詳細を閉じる

Cell proliferation is strictly controlled during differentiation. In T cell development, the cell cycle is normally arrested at the CD4(+)CD8(+) stage, but the mechanism underlying such differentiation-specific exit from the cell cycle has been unclear. Fbxw7 (also known as Fbw7, Sel-10, hCdc4, or hAgo), an F-box protein subunit of an SCF-type ubiquitin ligase complex, induces the degradation of positive regulators of the cell cycle, such as c-Myc, c-Jun, cyclin E, and Notch. FBXW7 is often mutated in a subset of human cancers. We have now achieved conditional inactivation of Fbxw7 in the T cell lineage of mice and found that the cell cycle is not arrested at the CD4(+)CD8(+) stage in the homozygous mutant animals. The mutant mice manifested thymic hyperplasia as a result of c-Myc accumulation and eventually developed thymic lymphoma. In contrast, mature T cells of the mutant mice failed to proliferate in response to mitogenic stimulation and underwent apoptosis in association with accumulation of c-Myc and p53. These latter abnormalities were corrected by deletion of p53. Our results suggest that Fbxw7 regulates the cell cycle in a differentiation-dependent manner, with its loss resulting in c-Myc accumulation that leads to hyperproliferation in immature T cells but to p53-dependent cell-cycle arrest and apoptosis in mature T cells.
NPKC epsilon, a P2Y(2)-R downstream effector in regulated mucin secretion from airway goblet cells 査読有り

Camille Ehre, Yunxiang Zhu, Lubna H. Abdullah, John Olsen, Keiichi I. Nakayama, Keiko Nakayama, Robert O. Messing, C. William Davis

AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY-CELL PHYSIOLOGY　293　(5)　C1445-C1454　2007年11月

DOI： 10.1152/ajpcell.00051.2007 　

ISSN：0363-6143
Ablation of p27 enhance kainate-induced seizure and hippocampal degeneration 査読有り

Chihiro Ueyama, Hiroki Akashiba, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Nobuyoshi Nishiyama, Norio Matsuki

NEUROREPORT　18　(17)　1781-1785　2007年11月

DOI： 10.1097/WNR.0b013e3282f16df6 　

ISSN：0959-4965
Negative feedback loop in the Bim-caspase-3 axis regulating apoptosis and activity of osteoclasts 査読有り

Hidetoshi Wakeyama, Toru Akiyama, Katsuhiko Takahashi, Hitoshi Amano, Yuho Kadono, Masaki Nakamura, Yasushi Oshima, Hiroyuki Itabe, Keiichi I. Nakayama, Keiko Nakayama, Kozo Nakamura, Sakae Tanaka

JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH　22　(10)　1631-1639　2007年10月

DOI： 10.1359/jbmr.070619 　

ISSN：0884-0431
Essential role of Skp2-mediated p27 degradation in growth and adaptive expansion of pancreatic beta cells 査読有り

Lingwen Zhong, Senta Georgia, Shuen-ing Tschen, Keiko Nakayama, Keiichi Nakayama, Anil Bhushan

JOURNAL OF CLINICAL INVESTIGATION　117　(10)　2869-2876　2007年10月

DOI： 10.1172/JCI32198 　

ISSN：0021-9738
Renal damage in obstructive nephropathy is decreased in Skp2-deficient mice 査読有り

Sayuri Suzuki, Hirotaka Fukasawa, Kyoko Kitagawa, Chiharu Uchida, Takayuki Hattori, Tomoyasu Isobe, Toshiaki Oda, Taro Misaki, Naro Ohashi, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Akira Hishida, Tatsuo Yamamoto, Masatoshi Kitagawa

AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY　171　(2)　473-483　2007年8月

DOI： 10.2353/ajpath.2007.070279 　

ISSN：0002-9440
Foxo3a is essential for maintenance of the hematopoietic stem cell pool 招待有り査読有り

Kana Miyamoto, Kiyomi Y. Araki, Kazuhito Naka, Fumio Arai, Keiyo Takubo, Satoshi Yamazaki, Sahoko Matsuoka, Takeshi Miyamoto, Keisuke Ito, Masako Ohmura, Chen Chen, Kentaro Hosokawa, Hiromitsu Nakauchi, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Mine Harada, Noboru Motoyama, Toshio Suda, Atsushi Hirao

CELL STEM CELL　1　(1)　101-112　2007年7月

DOI： 10.1016/j.stem.2007.02.001 　

ISSN：1934-5909
Cyclin D2 translocates p27 out of the nucleus and promotes its degradation at the G(0)-G(1) transition 査読有り

Etsuo Susaki, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama

MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY　27　(13)　4626-4640　2007年7月

DOI： 10.1128/MCB.00862-06 　

ISSN：0270-7306
The F box protein S phase kinase-associated protein 2 regulates adipose mass and adipocyte number in vivo 査読有り

Paul S. Cooke, Denise R. Holsberger, Melissa A. Cimafranca, Daryl D. Meling, Charity M. Beals, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Hiroaki Kiyokawa

OBESITY　15　(6)　1400-1408　2007年6月

DOI： 10.1038/oby.2007.168 　

ISSN：1930-7381
Protein kinase C-delta phosphorylates Ebp1 and prevents its proteolytic degradation, enhancing cell survival 査読有り

Zhixue Liu, Xia Liu, Keiichi I. Nakayama, Keiko Nakayama, Keqiang Ye

JOURNAL OF NEUROCHEMISTRY　100　(5)　1278-1288　2007年3月

DOI： 10.1111/j.1471-4159.2006.04313.x 　

ISSN：0022-3042
Asbestos-induced peribronchiolar cell proliferation and cytokine production are attenuated in lungs of protein kinase C-delta knockout mice

Arti Shukla, Karen M. Lounsbury, Trisha F. Barrett, Joanna Gell, Mercedes Rincon, Kelly J. Butnor, Douglas J. Taatjes, Gerald S. Davis, Pamela Vacek, Keiichi I. Nakayama, Keiko Nakayama, Chad Steele, Brooke T. Mossman

AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY　170　(1)　140-151　2007年1月

DOI： 10.2353/ajpath.2007.060381 　

ISSN：0002-9440
Noncanonical Wnt signaling through G protein-linked PKC delta activation promotes bone formation

Xiaolin Tu, Kyu Sang Joeng, Keiichi I. Nakayama, Keiko Nakayama, Jayaraj Rajagopal, Thomas J. Carroll, Andrew P. McMahon, Fanxin Long

DEVELOPMENTAL CELL　12　(1)　113-127　2007年1月

DOI： 10.1016/j.devcel.2006.11.003 　

ISSN：1534-5807
The cyclin-dependent kinase inhibitors p57 and p27 regulate neuronal migration in the developing mouse neocortex

Yasuhiro Itoh, Norihisa Masuyama, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Yukiko Gotoh

JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY　282　(1)　390-396　2007年1月

DOI： 10.1074/jbc.M609944200 　

ISSN：0021-9258
Skp2 controls adipocyte proliferation during the development of obesity

Tamon Sakai, Hiroshi Sakaue, Takehiro Nakamura, Mitsuru Okada, Yasushi Matsuki, Eijiro Watanabe, Ryuji Hiramatsu, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Masato Kasuga

JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY　282　(3)　2038-2046　2007年1月

DOI： 10.1074/jbc.M608144200 　

ISSN：0021-9258
Up-regulation of GPR48 induced by down-regulation of p27(Kip1) enhances carcinoma cell invasiveness and metastasis

Yun Gao, Kyoko Kitagawa, Yoshihiro Hiramatsu, Hirotoshi Kikuchi, Tomoyasu Isobe, Mai Shimada, Chiharu Uchida, Takayuki Hattori, Toshiaki Oda, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Tatsuo Tanaka, Hiroyuki Konno, Masatoshi Kitagawa

CANCER RESEARCH　66　(24)　11623-11631　2006年12月

DOI： 10.1158/0008-5472.CAN-06-2629 　

ISSN：0008-5472
PKC delta regulates collagen-induced platelet aggregation through inhibition of VASP-mediated filopodia formation

Giordano Pula, Kai Schuh, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Ulrich Walter, Alastair W. Poole

BLOOD　108　(13)　4035-4044　2006年12月

DOI： 10.1182/blood-2006-05-023739 　

ISSN：0006-4971
Geminin is essential for the development of preimplantation mouse embryos

Kentaro Hara, Keiichi I. Nakayama, Keiko Nakayama

GENES TO CELLS　11　(11)　1281-1293　2006年11月

DOI： 10.1111/j.1365-2443.2006.01019.x 　

ISSN：1356-9597
Mitogenic signalling and the p16(INK4a)-Rb pathway cooperate to enforce irreversible cellular senescence

Akiko Takahashi, Naoko Ohtani, Kimi Yamakoshi, Shin-ichi Iida, Hidetoshi Tahara, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Toshinori Ide, Hideyuki Saya, Eiji Hara

NATURE CELL BIOLOGY　8　(11)　1291-U63　2006年11月

DOI： 10.1038/ncb1491 　

ISSN：1465-7392
[Ubiquitin system regulating G1 and S phases of cell cycle].

Keiichi I Nakayama, Keiko Nakayama

Tanpakushitsu kakusan koso. Protein, nucleic acid, enzyme　51　(10 Suppl)　1362-9　2006年8月

ISSN：0039-9450
HSP27 favors ubiquitination and proteasomal degradation of p27(Kip1) and helps S-phase re-entry in stressed cells 査読有り

Arnaud Parcellier, Mathilde Brunet, Elise Schmitt, Edwige Col, Celine Didelot, Arlette Hammann, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama, Saadi Khochbin, Eric Solary, Carmen Garrido

FASEB JOURNAL　20　(8)　1179-+　2006年6月

DOI： 10.1096/fj.05-4184fje 　

ISSN：0892-6638
Double knockout mice show BASH and PKC delta have different epistatic relationships in B cell maturation and CD40-mediated activation 査読有り

T Nojima, K Hayashi, R Goitsuka, K Nakayama, K Nakayama, D Kitamura

IMMUNOLOGY LETTERS　105　(1)　48-54　2006年5月

DOI： 10.1016/j.imlet.2005.12.004 　

ISSN：0165-2478
PKC delta is necessary for Smad3 expression and transforming growth factor beta-induced fibronectin synthesis in vascular smooth muscle cells 査読有り

EJ Ryer, RP Hom, K Sakakibara, KI Nakayama, K Nakayama, PL Faries, B Liu, KC Kent

ARTERIOSCLEROSIS THROMBOSIS AND VASCULAR BIOLOGY　26　(4)　780-786　2006年4月

DOI： 10.1161/01.ATV.0000209517.00220.cd 　

ISSN：1079-5642

eISSN：1524-4636
Suppression of centrosome amplification after DNA damage depends on p27 accumulation 査読有り

E Sugihara, M Kanai, S Saito, T Nitta, H Toyoshima, K Nakayama, KI Nakayama, K Fukasawa, M Schwab, H Saya, M Miwa

CANCER RESEARCH　66　(8)　4020-4029　2006年4月

DOI： 10.1158/0008-5472.CAN-05-3250 　

ISSN：0008-5472
Two E3 ubiquitin ligases, SCF-Skp2 and DDB1-Cul4, target human Cdt1 for proteolysis 査読有り

H Nishitani, N Sugimoto, Roukos, V, Y Nakanishi, M Saijo, C Obuse, T Tsurimoto, KI Nakayama, K Nakayama, M Fujita, Z Lygerou, T Nishimoto

EMBO JOURNAL　25　(5)　1126-1136　2006年3月

DOI： 10.1038/sj,emboj.7601002 　

ISSN：0261-4189
Identification of novel E2F1 target genes regulated in cell cycle-dependent and independent manners 査読有り

R Iwanaga, H Komori, S Ishida, N Okamura, K Nakayama, KI Nakayama, K Ohtani

ONCOGENE　25　(12)　1786-1798　2006年3月

DOI： 10.1038/sj.onc.1209210 　

ISSN：0950-9232
Impaired germ cell development due to compromised cell cycle progression in Skp2-deficient mice 査読有り

Abbas Fotovati, Keiko Nakayama, Keiichi I. Nakayama

CELL DIVISION　1　4-4　2006年

DOI： 10.1186/1747-1028-1-4 　

ISSN：1747-1028
Mammalian E4 is required for cardiac development and maintenance of the nervous system 査読有り

C Kaneko-Oshikawa, T Nakagawa, M Yamada, H Yoshikawa, M Matsumoto, M Yada, S Hatakeyama, K Nakayama, KI Nakayama

MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY　25　(24)　10953-10964　2005年12月

DOI： 10.1128/MCB.25.24.10953-10964.2005 　

ISSN：0270-7306
Phosphorylation of p27(KIP1) in the developing retina and retinoblastoma. 査読有り

Kase Satoru, Yoshida Kazuhiko, Nakayama Keiichi I, Nakayama Keiko, Ikeda Hiromi, Harada Takayuki, Harada Chikako, Ohgami Kazuhiro, Shiratori Kenji, Ohno Shigeaki

Int J Mol Med　16　(2)　257-262　2005年8月
Regulation of the cell cycle by SCF-type ubiquitin ligases. 国際誌査読有り

Keiichi I Nakayama, Keiko Nakayama

Seminars in cell & developmental biology　16　(3)　323-33　2005年6月

ISSN：1084-9521

詳細を見る詳細を閉じる

Regulation of the cell cycle is dependent on protein degradation by the ubiquitin-proteasome system. Two major ubiquitin ligases, the anaphase-promoting complex or cyclosome (APC/C) and SCF complex, are responsible for the periodic proteolysis of many regulators of the cell cycle. The receptor component of the SCF complex is one of many F-box proteins, three of which--Skp2, Fbw7, and beta-TrCP--are well characterized and implicated in cell cycle regulation. We have generated mice deficient in Skp2, Fbw7, or beta-TrCP1 and have identified the roles of these proteins in both cell cycle regulation and mouse development. Clinical evidence also suggests that dysregulation of these F-box proteins contributes to human cancers.
Disappearance of p27(KIP1) and increase in proliferation of the lens cells after extraction of most of the fiber cells of the lens 査読有り

S Kase, K Yoshida, H Ikeda, T Harada, C Harada, J Imaki, K Ohgami, K Shiratori, KI Nakayama, K Nakayama, S Ohno

CURRENT EYE RESEARCH　30　(6)　437-442　2005年6月

DOI： 10.1080/02713680590959286 　

ISSN：0271-3683
Ubiquitylation of RAG-2 by Skp2-SCF links destruction of the V(D)J recombinase to the cell cycle 査読有り

H Jiang, FC Chang, AE Ross, JY Lee, K Nakayama, K Nakayama, S Desiderio

MOLECULAR CELL　18　(6)　699-709　2005年6月

DOI： 10.1016/j.molcel.2005.05.011 　

ISSN：1097-2765
Bcl-2-related protein A1 is an endogenous and cytokine-stimulated mediator of cytoprotection in hyperoxic acute lung injury. 査読有り

He Chuan Hua, Waxman Aaron B, Lee Chun Geun, Link Holger, Rabach Morgan E, Ma Bing, Chen Qingsheng, Zhu Zhou, Zhong Mei, Nakayama Keiko, Nakayama Keiichi I, Homer Robert, Elias Jack A

J Clin Invest　115　(4)　1039-1048　2005年4月

DOI： 10.1172/JCI200523004 　
Suppression of cell migration by protein kinase C delta 査読有り

D Jackson, Y Zheng, DG Lyo, YJ Shen, K Nakayama, KI Nakayama, MJ Humphries, ME Reyland, DA Foster

ONCOGENE　24　(18)　3067-3072　2005年4月

DOI： 10.1038/sj.onc.1208465 　

ISSN：0950-9232
p107 inhibits G1 to S phase progression by downregulating expression of the F-box protein Skp2 査読有り

G Rodier, C Makris, P Coulombe', A Scime, K Nakayama, KI Nakayama, S Meloche

JOURNAL OF CELL BIOLOGY　168　(1)　55-66　2005年1月

DOI： 10.1083/jcb.200404146 　

ISSN：0021-9525
Role of serine 10 phosphorylation in p27 stabilization revealed by analysis of p27 knock-in mice harboring a serine 10 mutation 査読有り

Y Kotake, K Nakayama, N Ishida, KI Nakayama

JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY　280　(2)　1095-1102　2005年1月

DOI： 10.1074/jbc.M406117200 　

ISSN：0021-9258
Functional regulation of FEZ1 by the U-box-type ubiquitin ligase E4B contributes to neuritogenesis. 国際誌査読有り

Okumura, F, Hatakeyama, S, Matsumoto, M, Kamura, T, Nakayama, K.I

Journal of Biological Chemistry　279　(51)　53533-53543-43　2004年12月

ISSN：0021-9258
Cytoplasmic ubiquitin ligase KPC regulates proteolysis of p27(Kip1) at G1 phase 査読有り

T Kamura, T Hara, M Matsumoto, N Ishida, F Okumura, S Hatakeyama, M Yoshida, K Nakayama, KI Nakayama

NATURE CELL BIOLOGY　6　(12)　1229-1235　2004年12月

DOI： 10.1038/ncb1194 　

ISSN：1465-7392
The ISG15 isopeptidase UBP43 is regulated by proteolysis via the SCFSkp2 ubiquitin ligase 査読有り

S Tokarz, C Berset, J La Rue, K Friedman, KI Nakayama, K Nakayama, DE Zhang, S Lanker

JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY　279　(45)　46424-46430　2004年11月

DOI： 10.1074/jbc.M403189200 　

ISSN：0021-9258
Early embryonic death in mice lacking the beta-catenin-binding protein duplin 査読有り

M Nishiyama, K Nakayama, R Tsunematsu, T Tsukiyama, A Kikuchi, KI Nakayama

MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY　24　(19)　8386-8394　2004年10月

DOI： 10.1128/MCB.24.19.8386-8394.2004 　

ISSN：0270-7306
【癌から発生・分化,さらに再生医学へ拡大する細胞周期研究】細胞周期制御分子の発生過程に果たす役割遺伝子操作マウスは何を語るか?

中山啓子, 中山敬一

実験医学　22　(13)　1814-1819　2004年9月
Abnormal angiogenesis in Foxo1 (Fkhr)-deficient mice. 国際誌

Tatsuo Furuyama, Kazuko Kitayama, Yuri Shimoda, Minetaro Ogawa, Kiyoaki Sone, Kiyomi Yoshida-Araki, Hiroshi Hisatsune, Shin-ichi Nishikawa, Keiko Nakayama, Keiichi Nakayama, Kyoji Ikeda, Noboru Motoyama, Nozomu Mori

The Journal of biological chemistry　279　(33)　34741-9　2004年8月13日

ISSN：0021-9258

詳細を見る詳細を閉じる

Members of the Foxo family, Foxo1 (Fkhr), Foxo3 (Fkhrl1), and Foxo4 (Afx), are mammalian homologs of daf-16, which influences life span and energy metabolism in Caenorhabditis elegans. Mammalian FOXO proteins also play important roles in cell cycle arrest, apoptosis, stress resistance, and energy metabolism. In this study, we generated Foxo1-deficient mice to investigate the physiological role of FOXO1. The Foxo1-deficient mice died around embryonic day 11 because of defects in the branchial arches and remarkably impaired vascular development of embryos and yolk sacs. In vitro differentiation of embryonic stem cells demonstrated that endothelial cells derived from wild-type and Foxo1-deficient embryonic stem cells were able to produce comparable numbers of colonies supported by a layer of OP9 stromal cells. Although the morphology of the endothelial cell colonies was identical in both genotypes in the absence of exogenous vascular endothelial growth factor (VEGF), Foxo1-deficient endothelial cells showed a markedly different morphological response compared with wild-type endothelial cells in the presence of exogenous VEGF. These results suggest that Foxo1 is essential to the ability of endothelial cells to respond properly to a high dose of VEGF, thereby playing a critical role in normal vascular development.
Distinct roles of c-Abl and Atm in oxidative stress response are mediated by protein kinase C delta 査読有り

BJ Li, XY Wang, N Rasheed, YY Hu, S Boast, T Ishii, K Nakayama, KI Nakayama, SP Goff

GENES & DEVELOPMENT　18　(15)　1824-1837　2004年8月

DOI： 10.1101/gad.1223504 　

ISSN：0890-9369
Involvement of p27(KIP1) in the proliferation of the developing corneal endothelium 査読有り

K Yoshida, S Kase, K Nakayama, H Nagahama, T Harada, H Ikeda, C Harada, J Imaki, K Ohgami, K Shiratori, IB Ilieva, S Ohno, S Nishi, KI Nakayama

INVESTIGATIVE OPHTHALMOLOGY & VISUAL SCIENCE　45　(7)　2163-2167　2004年7月

DOI： 10.1167/iovs.03-1238 　

ISSN：0146-0404
Phosphorylation-dependent degradation of c-Myc is mediated by the F-box protein Fbw7. 国際誌査読有り

Masayoshi Yada, Shigetsugu Hatakeyama, Takumi Kamura, Masaaki Nishiyama, Ryosuke Tsunematsu, Hiroyuki Imaki, Noriko Ishida, Fumihiko Okumura, Keiko Nakayama, Keiichi I Nakayama

The EMBO journal　23　(10)　2116-25　2004年5月19日

DOI： 10.1038/sj.emboj.7600217 　

ISSN：0261-4189

詳細を見る詳細を閉じる

The F-box protein Skp2 mediates c-Myc ubiquitylation by binding to the MB2 domain. However, the turnover of c-Myc is largely dependent on phosphorylation of threonine-58 and serine-62 in MB1, residues that are often mutated in cancer. We now show that the F-box protein Fbw7 interacts with and thereby destabilizes c-Myc in a manner dependent on phosphorylation of MB1. Whereas wild-type Fbw7 promoted c-Myc turnover in cells, an Fbw7 mutant lacking the F-box domain delayed it. Furthermore, depletion of Fbw7 by RNA interference increased both the abundance and transactivation activity of c-Myc. Accumulation of c-Myc was also apparent in mouse Fbw7-/- embryonic stem cells. These observations suggest that two F-box proteins, Fbw7 and Skp2, differentially regulate c-Myc stability by targeting MB1 and MB2, respectively.
Skp2-mediated degradation of p27 regulates progression into mitosis 査読有り

K Nakayama, H Nagahama, YA Minamishima, S Miyake, N Ishida, S Hatakeyama, M Kitagawa, S Iemura, T Natsume, KI Nakayama

DEVELOPMENTAL CELL　6　(5)　661-672　2004年5月

DOI： 10.1016/S1534-5807(04)00131-5 　

ISSN：1534-5807

eISSN：1878-1551
The papillomavirus E7 oncoprotein is ubiquitinated by UbcH7 and Cullin 1- and Skp2-containing E3 ligase 査読有り

KJ Oh, A Kalinina, J Wang, K Nakayama, KI Nakayama, S Bagchi

JOURNAL OF VIROLOGY　78　(10)　5338-5346　2004年5月

DOI： 10.1128/JVI.78.10.5338-5346.2004 　

ISSN：0022-538X
Distribution of p27(KIP1), cyclin D1, and proliferating cell nuclear antigen after retinal detachment 査読有り

K Yoshida, S Kase, K Nakayama, H Nagahama, T Harada, H Ikeda, C Harada, J Imaki, K Ohgami, K Shiratori, S Ohno, KI Nakayama

GRAEFES ARCHIVE FOR CLINICAL AND EXPERIMENTAL OPHTHALMOLOGY　242　(5)　437-441　2004年5月

DOI： 10.1007/s00417-004-0861-7 　

ISSN：0721-832X
Involvement of p27(KIP1) in proliferation of the retinal pigment epithelium and ciliary body 査読有り

K Yoshida, K Nakayama, S Kase, H Nagahama, T Harada, H Ikeda, C Harada, J Imaki, K Ohgami, K Shiratori, S Ohno, S Nishi, KI Nakayama

ANATOMY AND EMBRYOLOGY　208　(2)　145-150　2004年5月

DOI： 10.1007/s00429-004-0382-5 　

ISSN：0340-2061
Mouse Fbw7/Sel-10/Cdc4 is required for notch degradation during vascular development. 国際誌査読有り

Ryosuke Tsunematsu, Keiko Nakayama, Yuichi Oike, Masaaki Nishiyama, Noriko Ishida, Shigetsugu Hatakeyama, Yasumasa Bessho, Ryoichiro Kageyama, Toshio Suda, Keiichi I Nakayama

The Journal of biological chemistry　279　(10)　9417-23　2004年3月5日

DOI： 10.1074/jbc.M312337200 　

ISSN：0021-9258

詳細を見る詳細を閉じる

Mammalian Fbw7 (also known as Sel-10, hCdc4, or hAgo) is the F-box protein component of an SCF (Skp1-Cul1-F-box protein-Rbx1)-type ubiquitin ligase, and the mouse Fbw7 is expressed prominently in the endothelial cell lineage of embryos. We generated mice deficient in Fbw7 and found that the embryos died in utero at embryonic day 10.5-11.5, manifesting marked abnormalities in vascular development. Vascular remodeling was impaired in the brain and yolk sac, and the major trunk veins were not formed. In vitro para-aortic splanchnopleural explant cultures from Fbw7(-/-) embryos also manifested an impairment of vascular network formation. Notch4, which is the product of the proto-oncogene Int3 and an endothelial cell-specific mammalian isoform of Notch, accumulated in Fbw7(-/-) embryos, resulting in an increased expression of Hey1, which encodes a transcriptional repressor that acts downstream of Notch signaling and is implicated in vascular development. Expression of Notch1, -2, or -3 or of cyclin E was unaffected in Fbw7(-/-) embryos. Mammalian Fbw7 thus appears to play an indispensable role in negative regulation of the Notch4-Hey1 pathway and is required for vascular development.
マウス網膜色素上皮及び毛様体の細胞増殖制御におけるp27(KIP1)の役割

加瀬諭, 吉田和彦, 大野重昭, 中山啓子, 中山敬一

日本眼科学会雑誌　108　(臨増)　205-205　2004年3月
Association of cathepsin E deficiency with development of atopic dermatitis. 国際誌査読有り

Tsukuba Takayuki, Okamoto Kuniaki, Okamoto Yoshiko, Yanagawa Michiyo, Kohmura Keiko, Yasuda Yoshiyuki, Uchi Hiroshi, Nakahara Takeshi, Furue Masutaka, Nakayama Keiko, Kadowaki Tomoko, Yamamoto Kenji, Nakayama Keiichi I

J Biochem (Tokyo)　134　(6)　893-902　2003年12月

DOI： 10.1093/jb/mvg216 　

ISSN：0021-924X
CDKインヒビターp27の機能と制御

中山啓子

Proceedings of Clinical Electron Microscopy　25　7-11　2003年12月
医学・医療の進歩を世界へ向けて発生分化・生殖医療発生分化発生分化研究におけるモデル動物

中山啓子

日本医学会総会26回会誌　(2)　164-164　2003年12月
PKC-δノックアウトマウスにおけるB細胞の過剰増殖と自己免疫疾患

中山啓子

東北医学雑誌　115　(2)　145-147　2003年12月
出版者・発行元：東北医学会
ISSN：0040-8700
角膜上皮剥離後及び発生過程の水晶体の細胞増殖における細胞周期調節蛋白の役割

吉田和彦, 原田高幸, 原田知加子, 加瀬諭, 池田裕美, 酒井正春, 西信三, 今城純子, 中山啓子, 永濱裕康, 中山敬一, 大野重昭

日本眼科学会雑誌　107　(11)　678-686　2003年11月

ISSN：0029-0203
P57(KIP2) modulates stress-activated signaling by inhibiting c-Jun NH2-terminal kinase/stress-activated protein kinase 査読有り

TS Chang, MJ Kim, K Ryoo, J Park, SJ Eom, J Shim, KI Nakayama, K Nakayama, M Tomita, K Takahashi, MJ Lee, EJ Choi

JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY　278　(48)　48092-48098　2003年11月

DOI： 10.1074/jbc.M309421200 　

ISSN：0021-9258
Degradation of p57(Kip2) mediated by SCFSkp2 - dependent ubiquitylation 査読有り

T Kamura, T Hara, S Kotoshiba, M Yada, N Ishida, H Imaki, S Hatakeyama, K Nakayama, KI Nakayama

PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA　100　(18)　10231-10236　2003年9月

DOI： 10.1073/pnas.1831009100 　

ISSN：0027-8424
HDACに結合する分化抑制因子EIDファミリーの機能解析

三宅智, 笹島由加, 柳澤夕佳, 中山啓子, 湯浅保仁

日本癌学会62回総会記事　256-257　2003年8月
ノックインマウスを用いたp27セリン10残基リン酸化についての検討

中山啓子, 中山敬一

日本癌学会62回総会記事　137-137　2003年8月
Cell cycle-dependent regulation of the Skp2 promoter by GA-binding protein 査読有り

H Imaki, K Nakayama, S Delehouzee, H Handa, M Kitagawa, T Kamura, KI Nakayama

CANCER RESEARCH　63　(15)　4607-4613　2003年8月

ISSN：0008-5472
Role of the SCFSkp2 ubiquitin ligase in the degradation of p21(Cip1) in S phase 査読有り

G Bornstein, J Bloom, D Sitry-Shevah, K Nakayama, M Pagano, A Hershko

JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY　278　(28)　25752-25757　2003年7月

DOI： 10.1074/jbc.M301774200 　

ISSN：0021-9258
Impaired degradation of inhibitory subunit of NF-kappa B (I kappa B) and beta-catenin as a result of targeted disruption of the beta-TrCP1 gene 査読有り

K Nakayama, S Hatakeyama, S Maruyama, A Kikuchi, K Onoe, RA Good, KI Nakayama

PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA　100　(15)　8752-8757　2003年7月

DOI： 10.1073/pnas.1133216100 　

ISSN：0027-8424
The F-box protein Skp2 participates in c-Myc proteosomal degradation and acts as a cofactor for c-Myc-regulated transcription. 査読有り

von der Lehr Natalie, Johansson Sara, Wu Siqin, Bahram Fuad, Castell Alina, Cetinkaya Cihan, Hydbring Per, Weidung Ingrid, Nakayama Keiko, Nakayama Keiichi I, Soderberg Ola, Kerppola Tom K, Larsson Lars-Gunnar

Mol Cell　11　(5)　1189-1200　2003年5月

DOI： 10.1016/S1097-2765(03)00193-X 　
The role of p57Kip2 on mandibular growth in mice: By means of laser microdissection for hard tissues 査読有り

Watahiki J, Yamaguchi T, Irie T, Takahashi K, Nakano H, Yagasaki Y, Nakayama K. I, Nakayama K, Maki K, Tachikawa T

Orthod. Waves　62　(3)　201-206　2003年4月
出版者・発行元：日本矯正歯科学会
ISSN：1344-0241

詳細を見る詳細を閉じる

p57^<KiP2> is a member of the cip/kip family of negative regulators of the cell cycle and is strongly expressed in developing chondrocytes. In ^<KiP2>-deficient mice, shortening of limbs caused by delay of calcification in endochondral ossification has been confirmed as a skeletal abnormality. The role of p57^<KiP2> has been unclear in maxillofacial morphology. In this study to evaluate the involvement of p57^<KiP2> in mandibular growth during postnatal growth, we examined the expression of p57^<KiP2> in the mandibular condylar cartilage. Expression was confirmed in the proliferative and mature-cell layers; the strongest expression was in the mature-cell layer. We also examined the expression of type X collagen genes in p57^<KiP2>-deficient mice by real time PCR and found that the expression was much lower in the condylar cartilage of newborn p57^<KiP2>-deficient mice than in that of newborn wild-type mice. It is, therefore, concluded that ^<KiP2> may play an important role in mandibular growth by promoting the final differentiation of chondrocytes in the mandibular condylar cartilage.
A novel route for connexin 43 to inhibit cell proliferation: Negative regulation of S-Phase kinase-associated protein (Skp 2) 査読有り

YW Zhang, K Nakayama, K Nakayama, Morita, I

CANCER RESEARCH　63　(7)　1623-1630　2003年4月

ISSN：0008-5472
Characterization of the mouse gene for the U-box-type ubiquitin lipase UFD2a 査読有り

C Kaneko, S Hatakeyama, M Matsumoto, M Yada, K Nakayama, KI Nakayama

BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS　300　(2)　297-304　2003年1月

DOI： 10.1016/S0006-291X(02)02834-6 　

ISSN：0006-291X
Glomerular differentiation in p27 and p57 double-mutant metanephroi 査読有り

S Tomari, H Nagahama, YJ Shu, S Hoshi, K Nakayama, KI Nakayama, M Nagata

ANATOMY AND EMBRYOLOGY　206　(1-2)　31-36　2002年12月

DOI： 10.1007/s00429-002-0274-5 　

ISSN：0340-2061
Diminished alcohol preference in transgenic mice lacking aldehyde dehydrogenase activity

Toyohi Isse, Tsunehiro Oyama, Kyoko Kitagawa, Koji Matsuno, Akiko Matsumoto, Akira Yoshida, Keiko Nakayama, Kei-Ichi Nakayama, Toshihiro Kawamoto

Pharmacogenetics　12　(8)　621-626　2002年11月

DOI： 10.1097/00008571-200211000-00006 　

ISSN：0960-314X
PKC-δ遺伝子欠損マウスにおけるB細胞の過剰増殖と自己寛容の破綻

宮本顕友, 中山啓子, 広瀬幸子, 大野茂夫, 畠山鎮次, 中山敬一

日本免疫学会総会・学術集会記録　32　92-92　2002年10月
Aplidin (TM) induces the mitochondrial apoptotic pathway via oxidative stress-mediated JNK and p38 activation and protein kinase C delta 査読有り

LF Garcia-Fernandez, A Losada, Alcaide, V, AM Alvarez, A Cuadrado, L Gonzalez, K Nakayama, KI Nakayama, JM Fernandez-Sousa, A Munoz, JM Sanchez-Puelles

ONCOGENE　21　(49)　7533-7544　2002年10月

DOI： 10.1038/sj.onc.1205972 　

ISSN：0950-9232
Clinical and biological significance of S-phase kinase-associated protein 2 (Skp2) gene expression in gastric carcinoma: modulation of malignant phenotype by Skp2 overexpression, possibly via p27 proteolysis 査読有り

T Masuda, H Inoue, H Sonoda, S Mine, Y Yoshikawa, K Nakayama, KI Nakayama, M Mori

CANCER RESEARCH　62　(13)　3819-3825　2002年7月

ISSN：0008-5472
Phosphorylation of p27Kip1 on serine 10 is required for its binding to CRM1 and nuclear export. 国際誌査読有り

Noriko Ishida, Taichi Hara, Takumi Kamura, Minoru Yoshida, Keiko Nakayama, Keiichi I Nakayama

The Journal of biological chemistry　277　(17)　14355-8　2002年4月26日

DOI： 10.1074/jbc.C100762200 　

ISSN：0021-9258
TGF β receptor II型及び/或はp27マウスの標的撹乱におけるestrogen誘発下垂体腫瘍形成の形態的分子的分析

池田秀敏, 吉本高志, 志田直樹, 三好一郎, 中山啓子, 中山敬一, 大島正伸, 武藤誠

日本内分泌学会雑誌　78　(1)　103-103　2002年4月
Skp2を介したp27(KIP1)の分解による角膜上皮細胞の増殖制御

吉田和彦, 山本和幸, 松田彰, 大野重昭, 中山啓子, 永濱裕康, 中山敬一

日本眼科学会雑誌　106　(臨増)　99-99　2002年4月
Increased proliferation of B cells and auto-immunity in mice lacking protein kinase C delta 査読有り

A Miyamoto, K Nakayama, H Imaki, S Hirose, Y Jiang, M Abe, T Tsukiyama, H Nagahama, S Ohno, S Hatakeyama, KI Nakayama

NATURE　416　(6883)　865-869　2002年4月

DOI： 10.1038/416865a 　

ISSN：0028-0836
アセトアルデヒド脱水素酵素(Aldh)2ノックアウトマウスは低アルコール嗜好性を示す

一瀬豊日, 北川恭子, 松本明子, 吉田昭, 川本俊弘, 中山啓子, 中山啓一

産業医科大学雑誌　24　(1)　94-94　2002年3月
出版者・発行元：産業医科大学学会
ISSN：0387-821X

詳細を見る詳細を閉じる

【背景】日本人の約50%はアルデヒド脱水素酵素2(ALDH2)の遺伝子が欠損している。ALDH2遺伝子多型と飲酒行動、アルコール依存症との関係は、ヒトを対象として疫学手法を用いた多くの研究がなされており、ALDH2酵素欠損者では飲酒量、飲酒頻度ともに低く、同酵素の保持が、アルコール依存症及びアルコール性肝疾患の危険因子となっていることが明らかとなっている。しかし、ALDH2変異型のモデル動物は存在しないため、機序の多くは不明である。我々は独自にA1dh2マウスを作製し、A1dh2 KOマウスのアセトアルデヒド代謝能をin vitroで酵素活性が欠損していることを確認した(Kitagawa et al. 2000)。今回はA1dh2遺伝子型がアルコール嗜好性に影響するかを確認した。【方法】C57BL/6系 A1dh2ノックアウトマウス、C57BL/6系 A1dh2正常マウス10週令雄をそれぞれ15匹使用し、1匹飼い用のケージで自由飲水、自由摂食下に動物センター内で飼育し、24時間毎に体重、摂食量、飲水量、3%エタノール摂取量を測定した。【結果】(1)A1dh2-/-マウスの3%エタノール摂取量は正常型のおよそ1/3量であり、有意に少なかった(p<0.001)。(2)A1dh2-/-マウスは正常型に比べ水分摂取量が有意に多かった(p<0.001)。(3)A1dh2-/-マウスのおよび正常型には、有意な体重差、摂食量の差は認められなかった。【結論】A1dh2欠損型マウスはアルコール嗜好性が小さい。
Role of the PLC-related, catalytically inactive protein p130 in GABA(A) receptor function 査読有り

T Kanematsu, IS Jang, T Yamaguchi, H Nagahama, K Yoshimura, K Hidaka, M Matsuda, H Takeuchi, Y Misumi, K Nakayama, T Yamamoto, N Akaike, M Hirata, K Nakayama

EMBO JOURNAL　21　(5)　1004-1011　2002年3月

DOI： 10.1093/emboj/21.5.1004 　

ISSN：0261-4189
Involvement of p27(KIP1) degradation by Skp2 in the regulation of proliferation in response to wounding of corneal epithelium 査読有り

K Yoshida, K Nakayama, H Nagahama, T Harada, C Harada, J Imaki, A Matsuda, K Yamamoto, M Ito, S Ohno, K Nakayama

INVESTIGATIVE OPHTHALMOLOGY & VISUAL SCIENCE　43　(2)　364-370　2002年2月

ISSN：0146-0404
Recovery of liver mass without proliferation of hepatocytes after partial hepatectomy in skp2-deficient mice 査読有り

YA Minamishima, K Nakayama, KI Nakayama

CANCER RESEARCH　62　(4)　995-999　2002年2月

ISSN：0008-5472
Interaction between cyclin T1 and SCFSKP2 targets CDK9 for ubiquitination and degradation by the proteasome 査読有り

RE Kiernan, S Emiliani, E Nakayama, A Castro, JC Labbe, T Lorca, K Nakayama, A Benkirane

MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY　21　(23)　7956-7970　2001年12月

DOI： 10.1128/MCB.21.23.7956-7970.2001 　

ISSN：0270-7306
Characterization of a mouse gene (Fbxw6) that encodes a homologue of Caenorhabditis elegans SEL-10 査読有り

S Maruyama, S Hatakeyama, K Nakayama, N Ishida, K Kawakami, K Nakayama

GENOMICS　78　(3)　214-222　2001年12月

DOI： 10.1006/geno.2001.6658 　

ISSN：0888-7543
Degradation of p27(Kip1) at the G(0)-G(1) transition mediated by a Skp2-independent ubiquitination pathway 査読有り

T Hara, T Kamura, K Nakayama, K Oshikawa, S Hatakeyama, KI Nakayama

JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY　276　(52)　48937-48943　2001年12月

DOI： 10.1074/jbc.M107274200 　

ISSN：0021-9258
Morphologic and molecular analysis of estrogen-induced pituitary tumorigenesis in targeted disruption of transforming growth factor-beta receptor type II and/or p27 mice 査読有り

Hidetoshi Ikeda, Takashi Yoshimoto, Naoki Shida, Ichiro Miyoshi, Keiko Nakayama, Keiichi Nakayama, Masanobu Oshima, Makoto M. Taketo

16　(1)　55-65　2001年10月

DOI： 10.1385/ENDO:16:1:55 　

ISSN：0969-711X
胃癌におけるユビキチンリガーゼSCFSkp2の発現とその意義

増田隆明, 山下継史, 園田英人, 峯真司, 中山啓子, 中山敬一, 井上裕, 森正樹

日本癌学会60回総会記事　60回　96-96　2001年9月
出版者・発行元：日本癌学会
ISSN：0546-0476
caspase-3ノックアウトマウスにおける難聴

中川尚志, 牧嶋知子, 金子千恵, 小宮山荘太郎, 中山敬一, 中山啓子

Audiology Japan　44　(5)　357-358　2001年9月
出版者・発行元： Japan Audiological Society
DOI： 10.4295/audiology.44.357 　

ISSN：0303-8106
遺伝子組換え動物モデルの新展開ユビキチンリガーゼ群ノックアウトマウスによる生体機能の解析特に細胞周期研究を中心として

中山敬一, 嘉村巧, 原太一, 畠山鎮次, 中山啓子

日本癌学会60回総会記事　30-30　2001年9月
A mouse knock-in model exposes sequential proteolytic pathways that regulate p27(Kip1) in G1 and S phase 査読有り

NP Malek, H Sundberg, S McGrew, K Nakayama, TR Kyriakidis, JM Roberts

NATURE　413　(6853)　323-327　2001年9月

DOI： 10.1038/35095083 　

ISSN：0028-0836
Deafness due to degeneration of cochlear neurons in caspase-3-deficient mice 査読有り

H Morishita, T Makishima, C Kaneko, YS Lee, N Segil, K Takahashi, A Kuraoka, T Nakagawa, J Nabekura, K Nakayama, KI Nakayama

BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS　284　(1)　142-149　2001年6月

DOI： 10.1006/bbrc.2001.4939 　

ISSN：0006-291X
Skp2を介した角膜上皮細胞の増殖制御

吉田和彦, 山本和之, 松田彰, 大野重昭, 中山啓子, 永濱裕康, 中山敬一

日本眼科学会雑誌　105　(臨増)　188-188　2001年3月
Spatial and temporal expression patterns of the cyclin-dependent kinase (CDK) inhibitors p27(Kip1) and p57(Kip2) during mouse development 査読有り

H Nagahama, S Hatakeyama, K Nakayama, M Nagata, K Tomita, K Nakayama

ANATOMY AND EMBRYOLOGY　203　(2)　77-87　2001年2月

ISSN：0340-2061
Down-regulation of p27(Kip1) expression is required for development and function of T cells 査読有り

T Tsukiyama, N Ishida, M Shirane, YA Minamishima, S Hatakeyama, M Kitagawa, K Nakayama, K Nakayama

JOURNAL OF IMMUNOLOGY　166　(1)　304-312　2001年1月

DOI： 10.4049/jimmunol.166.1.304 　

ISSN：0022-1767
Hyperinsulinemia in PRIP-1 gene deleted mice 査読有り

Naoko Doira, Takashi Kanematsu, Miho Matsuda, Hiroshi Takeuchi, Hito-O. Nakano, Yushi Ito, Keiko Nakayama, Kei-Ichi Nakayama, Masato Hirata

Biomedical Research　22　(3)　157-165　2001年
出版者・発行元： Biomedical Research Foundation
DOI： 10.2220/biomedres.22.157 　

ISSN：1880-313X 0388-6107
NF-κBシグナル及び細胞周期制御に関与するユビキチンリガーゼ FWD1とSkp2

畠山鎮次, 中山啓子, 中山敬一

日本免疫学会総会・学術集会記録　30　221-221　2000年11月
Chk1欠損マウスを用いたマウスChk1キナーゼの機能解析

高井裕之, 冨永薫, 本山昇, 池田恭治, 中西真, 永濱裕康, 中山啓子, 中山敬一

日本臨床分子医学会記録　37　70-70　2000年11月
Tyk2 plays a restricted role in IFN alpha signaling, although it is required for IL-12-mediated T cell function 査読有り

K Shimoda, K Kato, K Aoki, T Matsuda, A Miyamoto, M Shibamori, M Yamashita, A Numata, K Takase, S Kobayashi, S Shibata, Y Asano, H Gondo, K Sekiguchi, K Nakayama, T Nakayama, T Okamura, S Okamura, Y Niho, K Nakayama

IMMUNITY　13　(4)　561-571　2000年10月

ISSN：1074-7613
Rb経路の上流に位置するサイクリンEとp27Kip1の蛋白分解機構

中山敬一, 畠山鎮次, 北川雅敏, 小南欽一郎, 中山啓子

日本癌学会59回総会記事　419-419　2000年9月
染色体倍数性及び中心体複製に異常をきたすノックアウトマウスの解析

中山啓子, 畠山鎮次, 北川雅敏, 小南欽一郎, 中山敬一

日本癌学会59回総会記事　422-422　2000年9月
Phosphorylation at serine 10, a major phosphorylation site of p27(Kip1), increases its protein stability 査読有り

N Ishida, M Kitagawa, S Hatakeyama, K Nakayama

JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY　275　(33)　25146-25154　2000年8月

DOI： 10.1074/jbc.M001144200 　

ISSN：0021-9258
Aldehyde dehydrogenase (ALDH) 2 associates with oxidation of methoxyacetaldehyde; in vitro analysis with liver subcellular fraction derived from human and Aldh2 gene targeting mouse 査読有り

K Kitagawa, T Kawamoto, N Kunugita, T Tsukiyama, K Okamoto, A Yoshida, K Nakayama, K Nakayama

FEBS LETTERS　476　(3)　306-311　2000年7月

DOI： 10.1016/S0014-5793(00)01710-5 　

ISSN：0014-5793
Aberrant cell cycle checkpoint function and early embryonic death in Chk1(-/-) mice 査読有り

H Takai, K Tominaga, N Motoyama, YA Minamishima, H Nagahama, T Tsukiyama, K Ikeda, K Nakayama, N Nakanishi, K Nakayama

GENES & DEVELOPMENT　14　(12)　1439-1447　2000年6月

ISSN：0890-9369

eISSN：1549-5477
Targeted disruption of Skp2 results in accumulation of cyclin E and p27(Kip1), polyploidy and centrosome overduplication 査読有り

K Nakayama, H Nagahama, YA Minamishima, M Matsumoto, Nakamichi, I, K Kitagawa, M Shirane, R Tsunematsu, T Tsukiyama, N Ishida, M Kitagawa, K Nakayama, S Hatakeyama

EMBO JOURNAL　19　(9)　2069-2081　2000年5月

DOI： 10.1093/emboj/19.9.2069 　

ISSN：0261-4189

eISSN：1460-2075
Mice lacking a CDK inhibitor, p57(Kip2), exhibit skeletal abnormalities and growth retardation 査読有り

K Takahashi, K Nakayama, K Nakayama

JOURNAL OF BIOCHEMISTRY　127　(1)　73-83　2000年1月

ISSN：0021-924X
IκBαとβ-cateninの分解に関与するユビキチン化酵素複合体SCFFWD1

畠山鎮次, 中山啓子, 中野裕康, 奥村康, 菊池章, 小野江和則, 中山敬一

日本免疫学会総会・学術集会記録　29　104-104　1999年10月
Common pathway for the ubiquitination of I kappa B alpha, I kappa B beta, and I kappa B epsilon mediated by the F-box protein FWD1 査読有り

M Shirane, S Hatakeyama, K Hattori, K Nakayama, K Nakayama

JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY　274　(40)　28169-28174　1999年10月

DOI： 10.1074/jbc.274.40.28169 　

ISSN：0021-9258
β-カテニンのユビキチン化に関わる分子FWD1の同定と機能解析

北川雅敏, 畠山鎮次, 菊池章, 中山啓子, 中山敬一

日本癌学会58回総会記事　79-79　1999年8月
An F-box protein, FWD1, mediates ubiquitin-dependent proteolysis of beta-catenin 査読有り

M Kitagawa, S Hatakeyama, M Shirane, M Matsumoto, N Ishida, K Hattori, Nakamichi, I, A Kikuchi, K Nakayama, K Nakayama

EMBO JOURNAL　18　(9)　2401-2410　1999年5月

DOI： 10.1093/emboj/18.9.2401 　

ISSN：0261-4189
Ubiquitin-dependent degradation of I kappa B alpha is mediated by a ubiquitin ligase Skp1/Cul 1/F-box protein FWD1 査読有り

S Hatakeyama, M Kitagawa, K Nakayama, M Shirane, M Matsumoto, K Hattori, H Higashi, H Nakano, K Okumura, K Onoe, RA Good, K Nakayama

PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA　96　(7)　3859-3863　1999年3月

DOI： 10.1073/pnas.96.7.3859 　

ISSN：0027-8424
Accelerated neutrophil apoptosis in mice lacking A1-a, a subtype of the bcl-2-related A1 gene. 査読有り

Hamasaki A, Sendo F, Nakayama K, Ishida N, Negishi I, Nakayama K, Hatakeyama S

J Exp Med　188　(11)　1985-1992　1998年12月7日

DOI： 10.1084/jem.188.11.1985 　
細胞周期のブレーキp27及びp57の分化と発癌に関する役割

中山敬一, 永濱裕康, 石田典子, 白根道子, 森正樹, 高橋勝彦, 畠山鎮次, 北川雅敏, 中山啓子

日本癌学会57回総会記事　20-20　1998年8月
Multiple gene duplication and expression of mouse bcl-2-related genes, A1 査読有り

S Hatakeyama, A Hamasaki, Negishi, I, DY Loh, F Sendo, K Nakayama, K Nakayama

INTERNATIONAL IMMUNOLOGY　10　(5)　631-637　1998年5月

DOI： 10.1093/intimm/10.5.631 　

ISSN：0953-8178
Cip/Kip cyclin-dependent kinase inhibitors: Brakes of the cell cycle engine during development

Kei-Ichi Nakayama, Keiko Nakayama

BioEssays　20　(12)　1020-1029　1998年
出版者・発行元： John Wiley and Sons Inc.
DOI： 10.1002/(SICI)1521-1878(199812)20:12<1020::AID-BIES8>3.3.CO;2-4 　

ISSN：0265-9247
Role of bcl-2 in the development of lymphoid cells from the hematopoietic stem cell 査読有り

Y Matsuzaki, K Nakayama, K Nakayama, T Tomita, M Isoda, DY Loh, H Nakauchi

BLOOD　89　(3)　853-862　1997年2月

ISSN：0006-4971
Apoptosis during an early stage of nephrogenesis induces renal hypoplasia in bcl-2-deficient mice. 査読有り

Nagata M, Nakauchi H, Nakayama K, Nakayama K, Loh D, Watanabe T

Am J Pathol　148　(5)　1601-1611　1996年5月
Mice lacking p27(Kip1) display increased body size, multiple organ hyperplasia, retinal dysplasia, and pituitary tumors 査読有り

K Nakayama, N Ishida, M Shirane, A Inomata, T Inoue, N Shishido, Hori, I, DY Loh, K Nakayama

CELL　85　(5)　707-720　1996年5月

DOI： 10.1016/S0092-8674(00)81237-4 　

ISSN：0092-8674
Functional significance of the Fas molecule in naive lymphocytes 査読有り

S Senju, Negishi, I, N Motoyama, FP Wang, KI Nakayama, K Nakayama, PJ Lucas, S Hatakeyama, Q Zhang, S Yonehara, DY Loh

INTERNATIONAL IMMUNOLOGY　8　(3)　423-431　1996年3月

DOI： 10.1093/intimm/8.3.423 　

ISSN：0953-8178
T-B cell interaction inhibits spontaneous apoptosis of mature lymphocytes in Bcl-2-deficient mice. 査読有り

Nakayama K, Nakayama K, Dustin L B, Loh D Y

J Exp Med　182　(4)　1101-1109　1995年10月1日

DOI： 10.1084/jem.182.4.1101 　
ESSENTIAL ROLE FOR ZAP-70 IN BOTH POSITIVE AND NEGATIVE SELECTION OF THYMOCYTES 査読有り

NEGISHI, I, N MOTOYAMA, K NAKAYAMA, K NAKAYAMA, S SENJU, S HATAKEYAMA, Q ZHANG, AC CHAN, DY LOH

NATURE　376　(6539)　435-438　1995年8月

DOI： 10.1038/376435a0 　

ISSN：0028-0836
Differential expression of bcl-2 in intestinal epithelia. Correlation with attenuation of apoptosis in colonic crypts and the incidence of colonic neoplasia. 査読有り

Merritt A J, Potten C S, Watson A J, Loh D Y, Nakayama K, Nakayama K, Hickman J A

J Cell Sci　108 ( Pt 6)　2261-2271　1995年6月
MASSIVE CELL-DEATH OF IMMATURE HEMATOPOIETIC-CELLS AND NEURONS IN BCL-X-DEFICIENT MICE 査読有り

N MOTOYAMA, FP WANG, KA ROTH, H SAWA, K NAKAYAMA, K NAKAYAMA, NEGISHI, I, S SENJU, Q ZHANG, S FUJII, DY LOH

SCIENCE　267　(5203)　1506-1510　1995年3月

DOI： 10.1126/science.7878471 　

ISSN：0036-8075
Targeted disruption of Bcl-2 alpha beta in mice: occurrence of gray hair, polycystic kidney disease, and lymphocytopenia. 査読有り

Nakayama K, Nakayama K, Negishi I, Kuida K, Sawa H, Loh D Y

Proc Natl Acad Sci U S A　91　(9)　3700-3704　1994年4月26日

DOI： 10.1073/pnas.91.9.3700 　
REQUIREMENT FOR CD8 BETA-CHAIN IN POSITIVE SELECTION OF CD8-LINEAGE T-CELLS 査読有り

K NAKAYAMA, K NAKAYAMA, NEGISHI, I, K KUIDA, MC LOUIE, O KANAGAWA, H NAKAUCHI, DY LOH

SCIENCE　263　(5150)　1131-1133　1994年2月

DOI： 10.1126/science.8108731 　

ISSN：0036-8075
DISAPPEARANCE OF THE LYMPHOID SYSTEM IN BCL-2 HOMOZYGOUS MUTANT CHIMERIC MICE 査読有り

K NAKAYAMA, K NAKAYAMA, NEGISHI, I, K KUIDA, Y SHINKAI, MC LOUIE, LE FIELDS, PJ LUCAS, STEWART, V, FW ALT, DY LOH

SCIENCE　261　(5128)　1584-1588　1993年9月

DOI： 10.1126/science.8372353 　

ISSN：0036-8075
ACTIVATION AND REACTIVATION OF THE ATP-SENSITIVE K+ CHANNEL OF THE HEART CAN BE MODIFIED BY DRUGS 査読有り

M HIRAOKA, Z FAN, T FURUKAWA, K NAKAYAMA, T SAWANOBORI

CARDIOVASCULAR DRUGS AND THERAPY　7　593-598　1993年8月

ISSN：0920-3206
AROMATIC-ALDEHYDES AND AROMATIC KETONES OPEN ATP-SENSITIVE K+ CHANNELS IN GUINEA-PIG VENTRICULAR MYOCYTES 査読有り

Z FAN, K NAKAYAMA, T SAWANOBORI, M HIRAOKA

PFLUGERS ARCHIV-EUROPEAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY　421　(5)　409-415　1992年8月

ISSN：0031-6768
Action of nicorandil on ATP-sensitive K+ channel in guinea-pig ventricular myocytes. 査読有り

Nakayama K, Fan Z, Marumo F, Sawanobori T, Hiraoka M

Br J Pharmacol　103　(3)　1641-1648　1991年7月

DOI： 10.1111/j.1476-5381.1991.tb09841.x 　
二次元心エコー図による左房容積の算出剖検心を用いた検討

中山啓子, 高元俊彦, 新田正男

日本臨床生理学会雑誌　21　(1)　1-9　1991年2月
MULTIPLE ACTIONS OF PINACIDIL ON ADENOSINE TRIPHOSPHATE-SENSITIVE POTASSIUM CHANNELS IN GUINEA-PIG VENTRICULAR MYOCYTES 査読有り

Z FAN, K NAKAYAMA, M HIRAOKA

JOURNAL OF PHYSIOLOGY-LONDON　430　273-295　1990年11月

ISSN：0022-3751
PINACIDIL ACTIVATES THE ATP-SENSITIVE K+ CHANNEL IN INSIDE-OUT AND CELL-ATTACHED PATCH MEMBRANES OF GUINEA-PIG VENTRICULAR MYOCYTES 査読有り

Z FAN, K NAKAYAMA, M HIRAOKA

PFLUGERS ARCHIV-EUROPEAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY　415　(4)　387-394　1990年1月

ISSN：0031-6768
Interrelation between pinacidil and intracellular ATP concentrations on activation of the ATP-sensitive K+ current in guinea pig ventricular myocytes 査読有り

K. Nakayama, Z. Fan, F. Marumo, M. Hiraoka

Circulation Research　67　(5)　1124-1133　1990年

DOI： 10.1161/01.RES.67.5.1124 　

ISSN：0009-7330

︎全件表示 ︎最初の5件までを表示

MISC 115

活性型ビタミンD₃が誘導する骨芽細胞の脂肪滴形成と破骨細胞支持能はp57^Kip2に依存する

高橋勝彦, 難波美早, 柿崎良輔, 及川里奈, 天野均, 浦野友彦, 中山啓子, 中山敬一, 東伸昭

日本薬学会年会要旨集(Web)　144th　2024年

ISSN： 0918-9823
ビタミンD₃が誘導する骨芽細胞の脂肪滴形成はp57^Kip2に依存する

柿崎良輔, 及川里奈, 高橋優太, 天野均, 浦野友彦, 中山啓子, 中山敬一, 高橋勝彦, 東伸昭

日本薬学会年会要旨集(Web)　143rd　2023年

ISSN： 0918-9823
新規POLE遺伝子変異を有するIMAGE-I症候群2症例の病態解析

中野智太, 森谷邦彦, 菊池敦生, 新妻秀剛, 笹原洋二, 舟山亮, 中山啓子, 城田松之, 新堀哲也, 青木洋子, 呉繁夫

日本免疫不全・自己炎症学会雑誌(Web)　2　(2)　2023年

ISSN： 2435-7693
幅広い臨床症状を呈したMECOM遺伝子変異を同定した2家系

新堀哲也, 田野島玲大, 笹原洋二, 佐藤篤, 入江正寛, 南條由佳, 舟山亮, 城田松之, 阿部太紀, 奥山祐子, 石井直人, 中山啓子, 呉繁夫, 今泉益栄, 青木洋子

日本小児科学会雑誌　126　(2)　230-230　2022年2月
出版者・発行元： (公社)日本小児科学会
ISSN： 0001-6543
メチオニン代謝はエピジェネティック調節による赤血球生成を制御する

加藤浩貴, 加藤浩貴, 加藤浩貴, NGUYEN Long, 石井悠翔, 石井悠翔, 松本光代, 三枝大輔, 舟山亮, 岡江寛明, 藤原亨, 武藤哲彦, 中山啓子, 有馬隆博, SCADDEN David, 五十嵐和彦, 張替秀郎

日本血液学会学術集会抄録(Web)　83rd　2021年
多系統蛋白質症(MSP)患者の全国実態調査と診療体制構築に関する研究 HNRNPA1変異を伴う多系統蛋白質症(MSP3型)新規家系の同定

青木正志, 割田仁, 井泉瑠美子, 井泉瑠美子, 池田謙輔, 鈴木直輝, 高橋俊明, 竪山真規, 西山亜由美, 城田松之, 舟山亮, 中山啓子, 三橋里美, 西野一三, 新堀哲也, 青木洋子

多系統蛋白質症(MSP)患者の全国実態調査と診療体制構築に関する研究令和2年度総括・分担研究報告書(Web)　2021年
RRAS2の活性化変異はヌーナン症候群を引き起こす

新堀哲也, 永井康貴, 藤田京志, 大橋博文, 岡本伸彦, 岡田賢, 原田敦子, 木原裕貴, THOMAS Arbogast, 舟山亮, 城田松之, 中山啓子, 阿部大紀, 井上晋一, I-CHUN Tsai, 松本直通, ERICA Davis, NICHOLAS Katsanis, 青木洋子

日本遺伝子診療学会大会プログラム・抄録集　27th　2020年
満期産脳性麻痺群の網羅的遺伝学的解析 17例中9例で候補遺伝子変異を同定

竹澤祐介, 菊池敦生, 萩野谷和裕, 新堀哲也, 沼田有里佳, 松, 乾健彦, 山村菜絵子, 宮林拓矢, 安西真衣, 鈴木智, 室本, 大久保幸宗, 遠藤若葉, 冨樫紀子, 小林康子, 大沼晃, 舟山亮, 城田松之, 中山啓子, 青木洋子, 呉繁夫

日本小児科学会雑誌　123　(6)　1069-1070　2019年6月
出版者・発行元： (公社)日本小児科学会
ISSN： 0001-6543
微量サンプルを用いたオミックス解析マイクロ流体デバイスを用いた運動ニューロンの軸索病態の解析

鈴木直輝, 秋山徹也, 川田治良, 舟山亮, 岡野栄之, 中山啓子, 藤井輝夫, 青木正志

日本細胞生物学会大会講演要旨集　69回　25-25　2017年5月
出版者・発行元： (一社)日本細胞生物学会
MECOM(EVI)遺伝子変異は無巨核球性血小板減少症を伴う橈尺骨癒合症を引き起こす

新堀哲也, 内山芽里, 笹原洋二, 入江正寛, 佐藤篤, 南條由佳, 呉繁夫, 松原洋一, 今泉益栄, 青木洋子, 金子隆, 橋井佳子, 舟山亮, 長嶋剛史, 井上晋一, 中山啓子, 大薗恵一

日本小児科学会雑誌　121　(2)　300-300　2017年2月
出版者・発行元： (公社)日本小児科学会
ISSN： 0001-6543
筋ジストロフィー関連疾患の基盤的診断・治療開発研究 Dysferlinopathyおよび類似疾患の次世代シークエンサーを用いた診断および結合蛋白に注目した病態研究

青木正志, 小野洋也, 井泉瑠美子, 鈴木直輝, 菅野新一郎, 高橋俊明, 割田仁, 加藤昌昭, 西山亜由美, 島倉奈緒子, 舟山亮, 中山啓子, 新堀哲也, 青木洋子, 三宅克也, 三宅克也

筋ジストロフィー関連疾患の基盤的診断・治療開発研究平成26-28年度総括研究報告書　18‐20　2017年
多系統プロテイノパチー連鎖性hnRNPA1変異に起因する孤立性封入体ミオパチー(Isolated inclusion body myopathy caused by a multisystem proteinopathy-linked hnRNPA1 mutation)

井泉瑠美子, 割田仁, 新堀哲也, 高橋俊明, 竪山真規, 鈴木直輝, 西山亜由美, 城田松之, 舟山亮, 中山啓子, 三橋里美, 西野一三, 青木洋子, 青木正志

臨床神経学　56　(Suppl.)　S280-S280　2016年12月
出版者・発行元： (一社)日本神経学会
ISSN： 0009-918X

eISSN： 1882-0654
大腸癌細胞におけるWntシグナルによるABCC3(MRP3)の発現制御

小林実, 大沼忍, 舟山亮, 井本博文, 唐澤秀明, 青木豪, 工藤克昌, 石田晶玄, 渡辺和宏, 田中直樹, 長尾宗紀, 阿部友哉, 森川孝則, 武者宏昭, 林洋毅, 中川圭, 元井冬彦, 内藤剛, 中山啓子, 海野倫明

日本外科学会定期学術集会抄録集　116回　PS-4　2016年4月
出版者・発行元： (一社)日本外科学会
小笠原諸島に侵入したグリーンアノールの進化的変化の検出と集団ゲノム解析

玉手智史, 森英章, COMPOSANO Brian J., LKRYSKO Kenneth, 舟山亮, 中山啓子, 牧野能士, 河田雅圭

日本生態学会大会講演要旨(Web)　63rd　2016年
大腸癌の発癌過程においてWnt/β-cateninシグナルは抗癌剤耐性関連ABCトランスポーターであるABCC3(MRP3)の発現を抑制する

小林実, 大沼忍, 唐澤秀明, 工藤克昌, 石田晶玄, 武者宏昭, 元井冬彦, 内藤剛, 中山啓子, 海野倫明

日本癌学会総会記事　74回　J-1351　2015年10月
出版者・発行元：日本癌学会
ISSN： 0546-0476
CRL4(VprBP) E3 Ligase Promotes Monoubiquitylation and Chromatin Binding of TET Dioxygenases (vol 342, pg 1518, 2013)

Tadashi Nakagawa, Lei Lv, Makiko Nakagawa, Yanbao Yu, Chao Yu, Ana C. D'Alessio, Keiko Nakayama, Heng-Yu Fan, Xian Chen, Yue Xiong

MOLECULAR CELL　59　(6)　2015年9月

ISSN： 1097-2765

eISSN： 1097-4164
潜因性West症候群の網羅的ゲノム解析―18症例中9例で候補変異を同定―

菊池敦生, 福與なおみ, 福與なおみ, 市野井那津子, 新堀哲也, 佐藤亮, 鈴木資, 工藤宏紀, 佐藤優子, 中山東城, 柿坂庸介, 柿坂庸介, 久保田由紀, 小林朋子, 小林朋子, 舟山亮, 中山啓子, 植松貢, 青木洋子, 萩野谷和裕, 呉繁夫

日本人類遺伝学会大会プログラム・抄録集　60th　248　2015年
ユビキチンリガーゼ複合体CRL4VprBPはTETタンパク質のモノユビキチン化およびクロマチンとの結合を促進する招待有り

中川直, 中山啓子, Yue Xiong

ライフサイエンス新着論文レビュー "http://first.lifesciencedb.jp/archives/9768"　2015年
小児科・産科領域疾患の大規模遺伝子解析ネットワークとエピゲノム解析拠点整備に関する研究神経変性疾患・遺伝性筋疾患の遺伝子解析

青木正志, 高橋俊明, 鈴木直輝, 井泉瑠美子, 加藤昌昭, 竪山真規, 割田仁, 島倉奈緒子, 安藤里紗, 舟山亮, 長嶋剛史, 中山啓子, 新堀哲也, 青木洋子

小児科・産科領域疾患の大規模遺伝子解析ネットワークとエピゲノム解析拠点整備に関する研究平成26年度委託業務成果報告書　19-20　2015年
難治性筋疾患の疫学・自然歴の収集および治療開発促進を目的とした疾患レジストリー研究日本人ジスフェルリン異常症の遺伝子変異について

青木正志, 高橋俊明, 鈴木直輝, 井泉瑠美子, 加藤昌昭, 竪山真規, 割田仁, 島倉奈緒子, 安藤里紗, 舟山亮, 長嶋剛史, 中山啓子, 新堀哲也, 青木洋子

難治性筋疾患の疫学・自然歴の収集および治療開発促進を目的とした疾患レジストリー研究平成26年度総括・分担研究報告書　17‐18　2015年
IDENTIFICATION OF ACQUIRED MUTATIONS BY WHOLE-GENOME SEQUENCING IN MONOMAC SYNDROME EVOLVING INTO MYELODYSPLASIA AND ACUTE LEUKEMIA

T. Fujiwara, N. Fukuhara, R. Funayama, N. Nariai, M. Kamata, T. Nagashima, K. Kojima, Y. Onishi, Y. Sasahara, K. Ishizawa, M. Nagasaki, K. Nakayama, H. Harigae

HAEMATOLOGICA　99　81-82　2014年6月

ISSN： 0390-6078
眼疾患と遺伝子緑内障のゲノム解析次世代医療・個別化医療に向けて

布施昇男, 清水愛, 木村雅恵, 高野良真, 石棟, 宮澤晃子, 国松志保, 劉孟林, 渡邉亮, 安田正幸, 横山悠, 檜森紀子, 津田聡, 山本耕太郎, 中澤徹, 安田純, 勝岡史城, 小島要, 成相直樹, 松本光代, 元池育子, 長崎正朗, 木下賢吾, 五十嵐和彦, 山本雅之, 新堀哲也, 青木洋子, 松原洋一, 舟山亮, 長嶋剛史, 中山啓子, 眞島行彦, 船山智代, 田中光一, 原田高幸, 阿部春樹, 福地健郎, 安田典子, 出田秀尚, 鄭暁東, 白石敦, 大橋裕一, 石田誠夫, 原岳, 金森章泰, 山田裕子, 中村誠, 酒井寛, Richards Julia E

日本眼科学会雑誌　118　(3)　216-240　2014年3月
出版者・発行元： (公財)日本眼科学会
ISSN： 0029-0203
筋ジストロフィーおよび関連疾患の診断・治療開発を目指した基盤研究次世代シークエンサーを用いた遠位型ミオパチーにおけるゲノム解析

青木正志, 井泉瑠美子, 高橋俊明, 加藤昌昭, 鈴木直輝, 竪山真規, 割田仁, 島倉奈緒子, 安藤里紗, 舟山亮, 長嶋剛史, 中山啓子, 新堀哲也, 青木洋子

筋ジストロフィーおよび関連疾患の診断・治療開発を目指した基盤研究平成23-25年度総括研究報告書　15-16　2014年
次世代シークエンサーを駆使した希少遺伝性難病の原因解明と治療法開発の研究次世代シークエンサーを用いた遺伝性筋疾患におけるゲノム解析

青木正志, 井泉瑠美子, 加藤昌昭, 割田仁, 鈴木直輝, 竪山真規, 高橋俊明, 舟山亮, 長嶋剛史, 中山啓子, 新堀哲也, 青木洋子, 松原洋一

次世代シークエンサーを駆使した希少遺伝性難病の原因解明と治療法開発の研究平成25年度総括・分担研究報告書　11-13　2014年
次世代シークエンサーを駆使した希少遺伝性難病の原因解明と治療法開発の研究次世代シークエンサーを用いた遺伝性筋疾患におけるゲノム解析

青木正志, 井泉瑠美子, 加藤昌昭, 割田仁, 鈴木直輝, 竪山真規, 高橋俊明, 舟山亮, 長嶋剛史, 中山啓子, 新堀哲也, 青木洋子, 松原洋一

次世代シークエンサーを駆使した希少遺伝性難病の原因解明と治療法開発の研究平成23-25年度総合研究報告書　11-14　2014年
Myofibrillar myopathyの大家系での次世代シークエンサーを用いた原因遺伝子の同定

井泉瑠美子, 新堀哲也, 青木洋子, 鈴木直輝, 加藤昌昭, 割田仁, 高橋俊明, 竪山真規, 長嶋剛史, 舟山亮, 中山啓子, 松原洋一, 青木正志

臨床神経学　53　(12)　1450-1450　2013年12月
出版者・発行元： (一社)日本神経学会
ISSN： 0009-918X

eISSN： 1882-0654
Illumina社製シークエンサーの特徴と可能性

中山啓子, 舟山亮

肝胆膵　67　(1)　25-33　2013年7月28日
出版者・発行元：株式会社アークメディア
Illumina社製シークエンサーの特徴と可能性

中山啓子, 舟山亮

肝胆膵　67　(1)　1-164　2013年7月28日
出版者・発行元：アークメディア
次世代シークエンサーを用いた新規発達緑内障遺伝子の探索

清水愛, 新堀哲也, 青木洋子, 松原洋一, 舟山亮, 長嶋剛史, 中山啓子, 渡邉亮, 長崎正朗, 布施昇男, 中澤徹

日本眼科学会雑誌　117　2013年

ISSN： 0029-0203
Myofibrillar myopathyの大家系での次世代シークエンサーを用いた原因遺伝子の同定

井泉瑠美子, 井泉瑠美子, 新堀哲也, 青木洋子, 鈴木直輝, 加藤昌昭, 割田仁, 高橋俊明, 竪山真規, 長嶋剛史, 舟山亮, 中山啓子, 松原洋一, 青木正志

日本神経学会学術大会プログラム・抄録集　54th　332　2013年
Myofibrillar myopathyの大家系における次世代型シークエンサーを用いた新たな原因遺伝子の同定

井泉瑠美子, 新堀哲也, 青木洋子, 鈴木直輝, 加藤昌昭, 割田仁, 高橋俊明, 竪山真規, 長嶋剛史, 舟山亮, 阿部康二, 中山啓子, 青木正志, 松原洋一

日本人類遺伝学会大会プログラム・抄録集　58th　136　2013年
Spontaneous Development of Arrhythmogenic Right Ventricular Cardiomyopathy in Mice Overexpressing Dominant-Negative Rho-Kinase in Vascular Smooth Muscle Cells

Alia Ellawindy, Kimio Satoh, Shin-ichi Tanaka, Shohei Ikeda, Toru Shimizu, Kazuki Noda, Yoshihiro Fukumoto, Kazuto Kobayashi, Keiko Nakayama, Hiroaki Shimokawa

CIRCULATION　126　(21)　2012年11月

ISSN： 0009-7322

eISSN： 1524-4539
Close Up実験法(Series 224) 高感度に多型を検出するためのエキソーム・シークエンシング (実験医学)

舟山亮, 長嶋剛史, 中山啓子

実験医学　30　(4)　629-634　2012年3月
Bach1によるPparγ遺伝子発現抑制を介した脂肪細胞分化阻害

松本光代, 松本光代, 白木琢磨, BURYDUN Andrey, 舟山亮, 西田有一郎, 中山啓子, 八重樫伸生, 五十嵐和彦

日本分子生物学会年会プログラム・要旨集(Web)　35th　2012年
Bach1の転写制御標的遺伝子の同定

松本光代, 松本光代, BRYDUN Andrey, 中目亜矢子, 舟山亮, 西田有一郎, 中山啓子, 八重樫伸生, 五十嵐和彦

日本分子生物学会年会プログラム・要旨集(Web)　34th　2011年
マウス胎仔線維芽細胞におけるFbxw 7による細胞周期抑制因子の制御 (日本外科学会雑誌)

益田邦洋, 石川善則, 山本久仁治, 片寄友, 小野山一郎, 中山敬一, 海野倫明, 中山啓子

日本外科学会雑誌　111　(臨増2)　465-465　2010年3月
細胞周期を抑制するユビキチンリガーゼと発癌 (炎症と免疫)

中山啓子

炎症と免疫　17　(2)　29-34　2009年2月20日
がん抑制遺伝子変異による組織特異的発がん機構の解明 (癌と人)

中山啓子

癌と人　35　44-45　2008年4月25日
SCF型ユビキチンリガーゼによる細胞周期と発癌 (実験医学)

中山敬一, 中山啓子

実験医学　26　166-174　2008年2月1日
p27ノックアウトマウスにおけるカイニン酸誘発応答の増大 (日本薬学会年会要旨集)

赤芝洋紀, 上山千紘, 中山啓子, 中山敬一, 西山信好, 松木則夫

日本薬学会年会要旨集　127年会　(2)　126-126　2007年3月
【シグナル伝達病を知るその分子機序解明から新たな治療戦略まで】基礎編細胞増殖・分化・死のシグナル伝達細胞周期とシグナル伝達 (遺伝子医学MOOK)

中山啓子

遺伝子医学MOOK　(6)　101-106　2006年12月
ユビキチンリガーゼコンポーネントFbw7は造血幹細胞の静止状態を制御する

松岡佐保子, 尾池雄一, 小野山一郎, 田久保圭誉, 伊藤圭介, 新井文用, 岩間厚志, 池田康夫, 中山啓子, 中山敬一, 須田年生

臨床血液　47　(9)　1035-1035　2006年9月
出版者・発行元： (一社)日本血液学会-東京事務局
ISSN： 0485-1439

eISSN： 1882-0824
肥満・糖尿病発症におけるユビキチンリガーゼSkp2の役割 (肥満研究)

酒井太門, 阪上浩, 中村武寛, 岡田潮, 永礼智基, 春日雅人, 松木泰, 渡辺英二郎, 平松隆司, 中山啓子

肥満研究　12　(Suppl.)　178-178　2006年9月
【ユビキチン-プロテアソーム系とオートファジー作動機構と病態生理】ユビキチン系の生理と病態ユビキチンと細胞周囲制御・癌 G1期からS期を制御するユビキチン系 (蛋白質・核酸・酵素)

中山敬一, 中山啓子

蛋白質・核酸・酵素　51　(10)　1362-1369　2006年8月
出版者・発行元：共立出版
ISSN： 0039-9450
Ubiquitin ligases: cell-cycle control and cancer

KI Nakayama, K Nakayama

NATURE REVIEWS CANCER　6　(5)　369-381　2006年5月

DOI： 10.1038/nrc1881 　

ISSN： 1474-175X
肥満・糖尿病発症におけるユビキチンリガーゼSkp2の役割 (糖尿病)

酒井太門, 阪上浩, 中村武寛, 岡田潮, 岡田裕子, 高島康弘, 永礼智基, 中村恭子, 春日雅人, 中山啓子

糖尿病　49　(Suppl.1)　S267-S267　2006年4月
p27の増加はDNA損傷後の中心体数異常の抑制に必要である

杉原英志, 豊島秀男, 中山啓子, 中山敬一, 佐谷秀行, 三輪正直

日本癌学会学術総会記事　65th　2006年
Skp2による脂肪細胞数制御機構の肥満発症における役割 (肥満研究)

酒井太門, 中山啓子

肥満研究　11　(Suppl.)　154-154　2005年9月
【細胞周期の最前線明らかになるその制御機構複製のライセンス化,チェックポイント,分裂期キナーゼなど精緻な分子機構と生命現象とのかかわり】 G2期からM期へこのダイナミックな変化の分子メカニズム p27の分解はM期の進行に必要である (実験医学)

中山啓子

実験医学　23　(9)　1383-1388　2005年5月
p27はDNAダメージ後の中心体数異常を抑制する

杉原英志, 杉原英志, 斎藤総一郎, 斎藤総一郎, 豊島秀男, 中山啓子, 中山敬一, 佐谷秀行, 三輪正直

日本分子生物学会年会講演要旨集　28th　2005年
p27はDNA損傷後の中心体過剰複製を抑制する

杉原英志, 斎藤総一郎, 新田孝幸, 豊島秀男, 中山啓子, 中山敬一, 佐谷秀行, 三輪正直

日本癌学会学術総会記事　64th　2005年
CDKインヒビターの生理的機能 (生化学)

中山啓子

生化学　76　(9)　1191-1202　2004年9月
細胞周期とがん M期進行におけるp27分解の重要性 (Cancer Science)

中山啓子, 三宅智, 中山敬一

Cancer Science　95　(Suppl.)　63-63　2004年9月
EIDファミリータンパクは転写抑制によって分化を阻害する (Cancer Science)

三宅智, 中山啓子

Cancer Science　95　(Suppl.)　44-44　2004年9月
脂肪細胞の数とサイズを決定する細胞周期制御機構の糖代謝における重要性 (Diabetes Frontier)

中村武寛, 阪上浩, 酒井太門, 岡田潮, 岡田裕子, 高島康弘, 森要之, 中村恭子, 小川渉, 中山敬一, 中山啓子, 春日雅人

Diabetes Frontier　15　(4)　574-575　2004年8月
細胞周期と再生 p27ブレーキの分解による制御機構 (炎症・再生)

中山敬一, 中山啓子

炎症・再生　24　(4)　369-369　2004年7月
脂肪細胞の数とサイズを決定する細胞周期制御機構の糖代謝における重要性 1 (日本内分泌学会雑誌)

中村武寛, 阪上浩, 酒井太門, 岡田潮, 岡田裕子, 高島康弘, 森要之, 中村恭子, 小川渉, 中山啓子, 中山敬一, 春日雅人

日本内分泌学会雑誌　80　(1)　106-106　2004年4月
脂肪細胞の数とサイズを決定する細胞周期制御機構の糖代謝における重要性 2 (糖尿病)

中村武寛, 阪上浩, 小川渉, 酒井太門, 岡田潮, 森要之, 岡田裕子, 高島康弘, 中村恭子, 春日雅人, 中山敬一, 中山啓子

糖尿病　47　(Suppl.1)　S101-S101　2004年4月
【蛋白質のユビキチン化と疾患】生命現象とユビキチン化時計遺伝子産物のユビキチン化による分解機構 (現代医療)

中山啓子

現代医療　36　(4)　893-898　2004年4月
出版者・発行元：現代医療社
ISSN： 0533-7259
B細胞へのトレランス誘導とPKC-δ (臨床免疫)

宮本顕友, 中山啓子, 中山敬一

臨床免疫　39　(2)　236-240　2003年2月
出版者・発行元：科学評論社
ISSN： 0386-9695
【次々と解明されるユビキチンの多彩な役割】細胞周期を制御する二大ユビキチンリガーゼ APC/CとSCF複合体 (実験医学)

中山敬一, 中山啓子

実験医学　21　(3)　358-364　2003年2月
自己免疫疾患とPKC-δ (感染・炎症・免疫)

宮本顕友, 中山啓子, 中山敬一

感染・炎症・免疫　32　(4)　302-303　2002年12月
Bリンパ球の増殖を抑制するシグナル伝達分子PKC-δ (実験医学)

中山敬一, 宮本顕友, 中山啓子

実験医学　20　1438-1441　2002年7月
PKC-δノックアウトマウスにおけるB細胞の過剰増殖と自己免疫疾患 (細胞工学)

中山啓子, 宮本顕友, 中山敬一

細胞工学　21　(7)　778-779　2002年6月
【細胞周期サイクリンの発見から20年解明が進む制御機構と発癌メカニズム】 CDKインヒビターp27Kip1のタンパク質分解による制御機構 (実験医学)

中山啓子, 中山敬一

実験医学　20　(4)　526-531　2002年3月
【集まれ!モデル生物たち】ヒトに最も近いモデル生物-マウス (細胞工学)

中山啓子, 中山敬一

細胞工学　21　(1)　31-36　2001年12月
細胞周期の開始と停止の制御機構静止期から増殖期へ p27分解に関わる二つのユビキチンリガーゼ (生化学)

中山敬一, 嘉村巧, 原太一, 畠山鎮次, 中山啓子

生化学　73　(8)　636-636　2001年8月
Regulation of the cell cycle at the G(1)-S transition by proteolysis of cyclin E and p27(Kip1)

K Nakayama, S Hatakeyama, K Nakayama

BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS　282　(4)　853-860　2001年4月

DOI： 10.1006/bbrc.2001.4627 　

ISSN： 0006-291X
【タンパク質分解の最前線2001】ユビキチンシステムユビキチンリガーゼ研究の最前線 SCF複合体の多面的な作用機構 (実験医学)

中山敬一, 中山啓子

実験医学　19　(2)　132-141　2001年1月
GABAA受容体情報伝達におけるp130,新規IP3結合蛋白質の役割 (生化学)

兼松隆, 吉村研治, 鍋倉淳一, 赤池紀生, 中山啓子, 中山敬一, 平田雅人

生化学　72　(8)　990-990　2000年8月
蛋白質分解制御による細胞分裂周期の調節サイクリンE及びp27Kip1のユビキチン化因子のノックアウトマウスによる機能解析 (生化学)

中山敬一, 畠山鎮次, 北川雅敏, 小南欽一郎, 中山啓子

生化学　72　(8)　596-596　2000年8月
【拡大するユビキチンの世界】 SCF複合体千の顔をもつユビキチンリガーゼ (実験医学)

中山敬一, 中山啓子

実験医学　18　(11)　1457-1464　2000年7月
SCF複合体によるユビキチン依存性のタンパク質分解 (生化学)

中山啓子, 中山敬一

生化学　72　(2)　113-117　2000年2月
出版者・発行元：日本生化学会
ISSN： 0037-1017
細胞周期制御因子およびシグナル伝達因子の分解の分子機構 (生化学)

北川雅敏, 畠山鎮次, 白根道子, 中山啓子, 中山敬一

生化学　71　(8)　1042-1042　1999年8月
NFκB活性化シグナルと生命現象 IκBのユビキチンリガーゼSCFFWD1複合体の同定 (生化学)

中山敬一, 畠山鎮次, 北川雅敏, 白根道子, 松本雅記, 服部公彦, 中山啓子

生化学　71　(8)　686-686　1999年8月
Chk1キナーゼ欠損マウスを用いたマウスChk1キナーゼの機能解析

高井裕之, 冨永薫, 本山昇, 池田恭治, 中西真, 永浜裕康, 中山啓子, 中山敬一

日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集　22nd　1999年
新規F-Box蛋白, FWD2のgenomic DNAクローニングとその解析

三浦正徳, 畠山鎮次, 中山啓子, 北川雅敏, 中山敬一

日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集　21　459-459　1998年12月1日
マウスSkp1とF-box protein, FWD1の結合特性の解析

服部公彦, 畠山鎮次, 中山啓子, 北川雅敏, 中山敬一

日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集　21　460-460　1998年12月1日
新規マウスF-box蛋白のcDNAクローニング及び細胞生物学的解析

畠山鎮次, 北川雅敏, 白根道子, 松本雅記, 服部公彦, 中山啓子, 中山敬一

日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集　21　460-460　1998年12月1日
p27^<Kip1>の発現レベルを調節する2種類の分解機構

白根道子, 春宮裕見子, 石田典子, 畠山鎮次, 中山啓子, 中山敬一, 北川雅敏

日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集　21　457-457　1998年12月1日
Mitotic Cyclin分解に関与するUbcH10マウスホモログ, UbcM5のcDNAクローニング及び生化学的解析

山中篤志, 畠山鎮次, 北川雅敏, 中山啓子, 中山敬一

日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集　21　500-500　1998年12月1日
マウスSkp2のcDNAおよびgenomic DNAのクローニングとその解析

松本雅記, 畠山鎮次, 北川恭子, 北川雅敏, 中山啓子, 中山敬一

日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集　21　500-500　1998年12月1日
胸腺細胞特異的発現p27^<Kip1>トランスジェニックマウスの作製と解析

築山忠雄, 畠山鎮次, 北川雅敏, 中山啓子, 中山敬一

日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集　21　589-589　1998年12月1日
細胞増殖関連蛋白質の分解機構 -p27^<kip1>を中心として-

北川雅敏, 畠山鎮次, 白根道子, 石田典子, 平井愛山, 田中知明, 中山啓子, 中山敬一

日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集　21　217-217　1998年12月1日
マウスSkp1 cDNA及びgenomic DNAのクローニング

南嶋洋司, 畠山鎮次, 豊野孝, 北川雅敏, 中山啓子, 中山敬一

日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集　21st　460　1998年11月
細胞周期関連遺伝子 (臨床免疫)

中山啓子, 中山敬一

臨床免疫　30　(4)　497-504　1998年4月
Bcl-2ファミリーによる生体制御 (現代化学(増刊）)

中山敬一, 中山啓子

現代化学(増刊）　35　87-95　1997年12月5日
Bcl-2ファミリ-による生体制御 (アポト-シス研究の新展開) -- (アポト-シスによる生体制御)

中山敬一, 中山啓子

現代化学増刊　(35)　87-95　1997年12月
出版者・発行元：東京化学同人
ISSN： 0910-4747
CDKインヒビター欠損マウスにおける病態 (臨床免疫)

中山啓子, 中山敬一

臨床免疫　29　(10)　1285-1291　1997年10月
サイトカインと免疫調節 p27Kip1によるT細胞の増殖制御 (Molecular Medicine)

中山啓子, 中山敬一

Molecular Medicine　34　(臨増免疫1997-98)　80-88　1997年9月
免疫系の発生と分化 T細胞の発生と分化 T細胞分化における細胞周期調節 (実験医学)

中山啓子, 中山敬一

実験医学　15　(11)　1315-1321　1997年7月
ゲルの写真にこだわる (実験医学)

中山敬一, 中山啓子

実験医学　15　932-933　1997年6月
平底チューブを使いこなそう (実験医学)

中山敬一, 中山啓子

実験医学　15　568-569　1997年4月
迅速Mini-prep(Quick-prep)法 (実験医学)

中山敬一, 中山啓子

実験医学　15　(2)　185-186　1997年2月
p27^Kip1及びp57^Kip2による細胞増殖の調節と発癌への関与

中山敬一, 森正樹, 高橋勝彦, 中山啓子

日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集　20th　1997年
p57^KIP2遺伝子欠損マウスの作製及び解析

高橋勝彦, 中山啓子, 中山敬一, 松村義裕, 高橋実, 佐藤正伸, 立石裕, 根岸泉, LOH D Y

日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集　20th　1997年
p27Kip1ノックアウトマウス細胞周期抑制分子の生理的役割 (実験医学)

中山敬一, 中山啓子

実験医学　15　(1)　88-90　1997年1月
細胞周期調節のT細胞分化に与える影響 : p27ノックアウトマウスを用いた解析

中山啓子, 石田典子, 白根道子, 猪又晃, 井上智彰, 宍戸信之, 堀井郁夫, LOH Dennis Y., 中山敬一

日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集　19　42-42　1996年8月
p27ノックアウトマウスにおける成長の促進と多臓器腫大

中山啓子, 石田典子, 白根道子, 猪又晃, 井上智彰, 宍戸信之, 堀井郁夫, LOH Dennis Y., 中山敬一

日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集　19　646-646　1996年8月1日
bcl-2遺伝子ファミリーとアポトーシス Bcl-2欠損マウス (血液・腫瘍科)

中山敬一, 中山啓子

血液・腫瘍科　32　(4)　302-311　1996年4月
T細胞分化におけるZAP-70の役割

根岸泉, 本山昇, 中山敬一, 中山啓子, 千住覚, 森真弥, LOH D Y

日本免疫学会総会・学術集会記録　26　1996年

ISSN： 0919-1984
T細胞分化とアポトーシス (実験医学)

中山敬一, 中山啓子

実験医学　13　(16)　1952-1959　1995年10月
遺伝子操作による免疫異常モデル CD4およびCD8欠損マウス (炎症と免疫)

中山啓子, 中山敬一

炎症と免疫　3　(6)　642-650　1995年10月
T細胞の選択とアポトーシス (Mebio)

中山敬一, 中山啓子

Mebio　12　(10)　79-86　1995年10月
T細胞の分化と表面機能分子 T細胞の分化とCD8β鎖ノックアウトマウスによる解析 (臨床免疫)

中山啓子, 中山敬一

臨床免疫　27　(8)　926-937　1995年8月
出版者・発行元：科学評論社
ISSN： 0386-9695
リンパ球の細胞死とBcl-2 (臨床免疫)

中山敬一, 中山啓子

臨床免疫　27　(7)　829-838　1995年7月
出版者・発行元：科学評論社
ISSN： 0386-9695
リンパ球のシグナル伝達 Bcl-2によるリンパ球細胞死の調節 (Molecular Medicine)

中山敬一, 中山啓子

Molecular Medicine　32　(臨増)　52-63　1995年6月
出版者・発行元：中山書店
ISSN： 0918-6557
ZAP-70欠損マウスにおけるT細胞分化

根岸泉, 本山昇, 中山敬一, 中山啓子, 千住覚, 畠山鎮次, ZHAN Q, CHAN A C, LOH D Y

日本免疫学会総会・学術集会記録　25　1995年

ISSN： 0919-1984
Bcl-2欠損マウスにおけるリンパ球の消失 (臨床免疫)

中山敬一, 中山啓子

臨床免疫　26　(10)　1154-1162　1994年10月
Bcl-2ノックアウトマウス (免疫Immunology Frontier)

中山敬一, 中山啓子

免疫Immunology Frontier　4　(3)　175-182　1994年6月
Bcl-2欠損マウスダブルノックアウト法を用いて (実験医学)

中山敬一, 中山啓子

実験医学　12　(7)　851-854　1994年5月
ダブルノックアウト法を用いたリンパ球分化におけるbcl-xの機能解析

本山昇, WANG F, 中山敬一, 中山啓子, 根岸泉, 千住悟, ZHANG Q, LOH D Y

日本免疫学会総会・学術集会記録　24　1994年

ISSN： 0919-1984
免疫細胞の分化遺伝子ターゲティングによる展開 Bcl-2欠損マウスダブルノックアウト法を用いて (Medical Immunology)

中山敬一, 中山啓子

Medical Immunology　27　(1)　73-82　1994年1月
Pinacidilの心筋ATP感受性Kチャンネルに対する作用 (最新醫學)

中山啓子, 范錚, 丸茂文昭, 平岡昌和

最新醫學　45　2470-2473　1990年12月
K+ channel開口薬,NicorandilとPinacidilの心筋ATP感受性K+ channelへの作用とその差異 (Therapeutic Research)

平岡昌和, 范錚, 中山啓子

Therapeutic Research　11　(5)　1374-1375　1990年5月

︎全件表示 ︎最初の5件までを表示

書籍等出版物 8

細胞工学

監修中山敬一, 学生体防御医学研究所, ed. 中山啓子

株式会社学研メディカル秀潤社　2012年5月
細胞周期細胞増殖の制御メカニズム

メディカル・サイエンス, インターナショナル ed

メディカル・サイエンス・インターナショナル　2008年5月30日
キーワードで理解する細胞周期イラストマップ

中山敬一, 中山啓子

羊土社　2005年2月25日
発生における細胞増殖制御

竹内隆, 岸本健雄, 中山啓子, 中山敬一

Springer　2004年2月13日
わかる実験医学シリーズ「細胞周期がわかる」

中山敬一, 中山啓子, 中山敬一

羊土社　2001年2月15日
わかる細胞周期と癌

田矢洋一, 中山啓子, 中山敬一

羊土社　2000年4月
新用語ライブラリー細胞周期

田矢洋一, 野島博, 花岡文雄, 中山敬一, 中山啓子

羊土社　1999年8月
Molecular Medicine Vol.34 臨床増刊号ノックアウトマウス・データブック

黒川清, 笹月健彦, ds, 中山啓子, 中山敬一

中山書店　1997年12月25日

︎全件表示 ︎最初の5件までを表示

講演・口頭発表等 140

がん細胞における翻訳制御因子 EEF1A アイソフォームの解析

築地巧人, 中山啓子

第38回日本癌学会　2021年10月1日
RBFOX2 と PTBP1 は大腸癌細胞において PTK2 マイクロエクソンのスプライシングを制御する

大平優丈, 中山啓子

第38回日本癌学会　2021年10月2日
RNAによるALS関連因子TDP-43凝集体の形成と維持

中川直, 細井徹, 中山啓子

第141日本薬学会年会
VCP阻害薬によるALS関連因子TDP-43の凝集体形成抑制

中川直, 余玉嬌, 細井徹, 中山啓子

第94回日本薬理学会年会　2021年3月9日
An Amyotrophic Lateral Sclerosis-Associated Mutant of C21ORF2 Is Stabilized by NEK1-Mediated Hyperphosphorylation and the Inability to Bind FBXO3

Tadashi Nakagawa, Yasuaki Watanabe, Naoki Suzuki, Hitoshi Warita, Masashi Aoki, Keiko Nakayama

31ST INTERNATIONAL SYMPOSIUM ON ALS/MND　2020年12月11日
自閉症関連タンパク質USP9XによるSETD5を介したrDNAのエピジェネティック制御

中川直, 中川真喜子, 細井徹, 中山啓子

第43回日本分子生物学会年会　2020年12月2日
蛋白分解異常による新規筋萎縮性側索硬化症の発症機構

渡辺靖彰、中川直、鈴木直輝、割田仁、中山啓子、青木正志

第42回日本神経科学大会　2019年7月25日
ユビキチン化によるヒストンシャペロンFACT複合体の機能制御招待有り

中川直、中山啓子

第41回日本分子生物学会　2018年11月29日
Cyclin Fの突然変異はVCPのATPase活性に影響することによりALS発症に関与する可能性がある

余玉嬌、諸星茜、中川直、中山啓子

第41回日本分子生物学会　2018年11月29日
ユビキチン化によるヒストンシャペロンFACTの制御

中川直、諸星茜、中山啓子

東北大学知のフォーラム5周年記念特別講演会　2018年7月29日
ALS患者で同定されたC21ORF2変異によるNEK1の制御

渡辺靖彰、中川直、鈴木直輝、割田仁、中山啓子、青木正志

第59回日本神経学会総会　2018年5月
ユビキチンリガーゼβ-TrCPによるオス生殖細胞の減数分裂開始制御

中川直、中山啓子

第40回日本分子生物学会　2017年12月8日
VCPはALSに関連したTDP-43の細胞質凝集体形成に影響する

余玉嬌、中川直、中山啓子

第40回日本分子生物学会　2017年12月7日
ユビキチンリガーゼβ-TrCPによるオス生殖細胞の減数分裂開始制御

中川直、中野星児、久志瞭、中山啓子

先端モデル動物支援プラットフォーム若手技術支援講習会　2017年9月8日
Molecular analysis of Amyotrophic Lateral Sclerosis associated Cyclin F mutants

Yujiao Yu,Akane Morohoshi,Tadashi Nakagawa,Keiko Nakayama

第39回日本分子生物学会年会　2016年12月1日
ユビキチン化によるFACT複合体の機能制御

諸星茜、中川直、中山啓子

第39回日本分子生物学会年会　2016年12月1日
H3K27ヒストン修飾によるエンハンサー制御のゲノムワイド解析

細金正樹、中山啓子

第39回日本分子生物学会年会　2016年12月1日
大腸がんにおけるタンパク質シトルリン化酵素PADI2の役割

舟山亮、谷口肇、水間正道、藤島史喜、小林実、大沼忍、海野倫明、中山啓子

第39回日本分子生物学会年会　2016年11月30日
Reactivation of cell proliferation by continuous TGF-β treatment

Tadashi Nakagawa,Masaki Hosogane,Ryo Funayama,Keiko Nakayama.

第39回日本分子生物学会年会　2016年11月30日
セルトリ細胞特異的β-TrCPノックアウトマウスの解析

諸星茜, 中川直, 中野星児

第38回日本分子生物学会年会　2015年12月1日
がん原遺伝子RASによる遺伝子サイレンシングの分子機構の解析

舟山亮, 細金正樹, 長嶋剛史

第38回日本分子生物学会年会　2015年12月1日
TGF-β刺激によるTFIID構成因子TAF7の分解とその役割の解明

中川直, 細金正樹, 舟山亮

第38回日本分子生物学会年会　2015年12月1日
マウスES細胞におけるgemininの細胞周期と分化に対する制御

福本恵美子, Kundu, Lena Rani, 佐藤聡一郎, 細金正樹, 中山啓子

第37回日本分子生物学会年会　2014年11月25日
H3K27me3修飾パターン形成過程の時系列解析

細金正樹, 舟山亮, 城田松之, 中山啓子

第37回日本分子生物学会年会　2014年11月25日
精子形成におけるE3ユビキチンリガーゼβ-TrCPの新規基質の同定と解析

久志瞭, 中川直, 中野星児, 遠藤尚博, 中山啓子

第37回日本分子生物学会年会　2014年11月25日
TFIID complex changes accompany epithelial-mesenchymal transition (EMT)

Nakagawa, Tadashi, Nakayama, Keiko

第37回日本分子生物学会年会　2014年11月25日
がん遺伝子による転写変化とエピゲノム変化

第23回長崎障害者支援再生医療研究会　2014年11月4日
H3K27メチル化に先立って転写は抑制される

新学術領域研究細胞運命制御第５回領域会議　2014年9月3日
転写制御とヒストン修飾

順天堂大学最先端・次世代シンポジウム　2013年11月30日
Functional Analysis of F-box protein in vivo

第３５回内藤コンファレンス　2013年7月9日
Change of Trimethylation of H3K27 Occurs after Ras-mediated Transcriptional Regulation 国際会議

NIH-Tohoku University-JSPS Symposium　2013年5月9日
RNFによるKu80ユビキチン化を介したNHEJ修復制御

石田典子, 家村俊一郎, 安井明, 夏目徹, 中山啓子

第35回日本分子生物学会年会　2012年12月14日
がん遺伝子Rasによる転写制御後にH3K27me3修飾変化が誘起される

細金正樹, 舟山亮, 西田有一郎, 長嶋剛史, 中山啓子

第35回日本分子生物学会年会　2012年12月14日
がん遺伝子Rasによる転写制御後にH3K27me3修飾変化が誘起される

細金正樹, 舟山亮, 西田有一郎, 長嶋剛史, 中山啓子

第35回日本分子生物学会年会　2012年12月14日
shRNAライブラリのスクリーニングによる遺伝子サイレンシング機構の解析

舟山亮, 細金正樹, 長嶋剛史, 中山啓子

第35回日本分子生物学会年会　2012年12月13日
mES細胞におけるGemininの細胞周期‐ 細胞分化に果たす役割

Kundu Lena R, 中山啓子

第35回日本分子生物学会年会　2012年12月13日
Nrf2-小Maf転写因子のゲノムワイド解析による遺伝子発現制御システムの解明

弘津陽介, 勝岡史城, 舟山亮, 長嶋剛史, 西田有一郎, 中山啓子, ジェームスダグラスエンゲル, 山本雅之

第35回日本分子生物学会年会　2012年12月13日
Fbxw7はマウスの肝臓において脂質代謝及び細胞分化決定を制御する

磯下理恵子, 小野山一郎, 鈴木淳史, 松本有樹修, 冨田謙吾, 片桐秀樹, 尾池雄一, 中山啓子, 中山敬一

第35回日本分子生物学会年会　2012年12月13日
mES細胞におけるGemininの細胞周期‐ 細胞分化に果たす役割

Kundu Lena R, 中山啓子

第35回日本分子生物学会年会　2012年12月13日
RASシグナルによる選択的スプライシング変化の網羅的解析

松島和洋, 舟山亮, 長嶋剛史, 中山啓子

第35回日本分子生物学会年会　2012年12月12日
Bach1によるPparγ遺伝子発現抑制を介した脂肪細胞分化阻害

松本光代, 白木琢磨, ブリドンアンドレイ, 舟山亮, 西田有一郎, 中山啓子, 八重樫伸生, 五十嵐和彦

第35回日本分子生物学会年会　2012年12月11日
Change of Trimethylation of H3K27 Occurs after Ras-mediated Transcriptional Regulation 国際会議

Keiko Nakayama

CSI-GCOE Joint Workshop on Genome Science　2012年8月21日
Analysis of Geminin-deficient mES cells 国際会議

Kundu, L. R, Nakayama, K

2012 Cold Spring Harbor Laboratory on the Cell Cycle　2012年5月15日
Exome sequencing of patients with autophagic vacuolar myopathies

Funayama, R, Nagashima, T, Nakayama, K

Winter Camp of GCOE 2012 〜Challenge to Advanced Research through Interdisciplinary Exchange 〜 Tohoku University Global COE for Conquest of Signal Transduction Diseases with “Network Medicine”　2012年2月4日
Geminin deletion in hematopoietic stem cells promotes differentiation of megakaryocytes and platelets

Nakano, S, Sasaki, Y, Motohashi, H, Nakayama, K

Winter Camp of GCOE 2012 〜Challenge to Advanced Research through Interdisciplinary Exchange 〜 Tohoku University Global COE for Conquest of Signal Transduction Diseases with “Network Medicine”　2012年2月4日
Change of trimethylation of H3K27 occurs after Ras-mediated transcriptional regulation

Hosogane, M, Funayama, R, Nishida, Y, Nagashima, T, Nakayama, K

Winter Camp of GCOE 2012 〜Challenge to Advanced Research through Interdisciplinary Exchange 〜 Tohoku University Global COE for Conquest of Signal Transduction Diseases with “Network Medicine”　2012年2月4日
Comprehensive analysis of altemative splicing by next-generation sequencer

Matsushima, W, Funayama, R, Nagashima, T, Nakayama, K

Winter Camp of GCOE 2012 〜Challenge to Advanced Research through Interdisciplinary Exchange 〜 Tohoku University Global COE for Conquest of Signal Transduction Diseases with “Network Medicine”　2012年2月4日
Selective epigenetic gene regulation in primordial germ cells

Mochizuki, K, Hosogane, M, Nakayama, K, Matsui, Y

Winter Camp of GCOE 2012 〜Challenge to Advanced Research through Interdisciplinary Exchange 〜 Tohoku University Global COE for Conquest of Signal Transduction Diseases with “Network Medicine”　2012年2月4日
胆道癌における癌関連遺伝子の変異解析

高野成尚, 中山啓子, 海野倫明

第５回リトリート大学院生研究発表会　2012年1月21日
がん遺伝子Rasによる転写制御後にH3K27me3修飾変化が誘起される

細金正樹, 舟山亮, 西田有一郎, 長嶋剛史, 中山啓子

第５回リトリート大学院生研究発表会　2012年1月21日
Ku80のユビキチン化を介したＤＮＡ二重鎖切断修復制御

石田典子, 家村俊一郎, 安井明, 夏目徹, 中山啓子

第３４回日本分子生物学会年会　2011年12月13日
Ku80のユビキチン化を介したＤＮＡ二重鎖切断修復制御

石田典子, 家村俊一郎, 安井明, 夏目徹, 中山啓子

第３４回日本分子生物学会年会　2011年12月13日
Change of trimethylation of H3K27 occurs after Ras-mediated transcriptional regulation

Hosogane, M, Funayama, R, Nishida, Y, Nagashima, T, Nakayama, k

第３４回日本分子生物学会年会　2011年12月13日
Change of trimethylation of H3K27 occurs after Ras-mediated transcriptional regulation

Hosogane, M, Funayama, R, Nishida, Y, Nagashima, T, Nakayama, k

第３４回日本分子生物学会年会　2011年12月13日
Bach1の転写制御標的遺伝子の同定

松本光代, ブリドンアンドレイ, 中目亜矢子, 舟山亮, 西田有一郎, 中山啓子, 八重樫伸生, 五十嵐和彦

第３４回日本分子生物学会年会　2011年12月13日
Cdt1 inhibitor, Geminin negatively regulates thrombopoiesis

Nakayama, K

The 5th International Workshop on Cell Regulations in Division and Arrest　2011年10月23日
Changes of trimethylation of H3K27 occurs after Ras-mediated transcriptional regulation

Hosogane, M, Funayama, R, Nishida, Y, Nagashima, T, Nakayama, K

The 5th International Workshop on Cell Regulations in Division and Arrest　2011年10月23日
H3K27 is tri-methylated after Ras-mediated regional silencing

Hosogane, M, Nakayama, K

70th Annual Meeting of the Japanese Cancer Association　2011年10月3日
Ku80のユビキチン化を介したDNA二重鎖切断修復制御

中山啓子, 石田典子

第１７回国際癌治療増感研究会　2011年6月24日
Tissue-specific fnction of Fbxw7 revealed by conditional gene targeting in multiple mouse organs 国際会議

Nakayama,K, Onoyama,I, Matsumoto,A, Ishikawa,T, Aoyama,S, Nakayama,K

Cold Spring Harbor Laboratory 2011Meeting & Courses　2011年5月17日
Ras-mediated regional silencing around Fas locus.

Masaki Hosogane, Ryo Funayama, Yuichiro Nishida, Keiko Nakayama

東北大学グローバルCOE Network Medicine創生拠点冬の合宿2011　2011年2月5日
Geminin deletion in hematopeietic stem cells promotes differentiation of megakaryocytes and platelets.

Seiji Nakano, Yousuke Sasaki, Hozumi Motohashi, Keiko Nakayama

東北大学グローバルCOE Network Medicine創生拠点冬の合宿2011　2011年2月5日
Genome-wide comprehensive and comparative analysis of next-generation sequencing data between ChIP-seq and RNA-seq

Yuichiro Nishida

東北大学グローバルCOE Network Medicine創生拠点冬の合宿2011　2011年2月5日
Gemininは造血幹細胞の維持と巨核球の分化を制御する

中野星児, 佐々木陽丞, 本橋ほづみ, 中山啓子

第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会　2010年12月7日
がん遺伝子RASによる広範囲染色体領域の遺伝子サイレンシング機構の解析

舟山亮, 細金正樹, 西田有一郎, 中山啓子

第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会　2010年12月7日
Ras-mediated gene silencing によるFas遺伝子領域のエピジェネティック制御

細金正樹, 舟山亮, 西田有一郎, 中山啓子

第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会　2010年12月7日
Gemininは造血幹細胞の維持と巨核球の分化を制御する

中野星児, 佐々木陽丞, 本橋ほづみ, 中山啓子

第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会　2010年12月7日
Cdt1 inhibitor, Geminin negatively regulates thrombopoiesis

中山啓子

細胞周期ミニシンポジウム　2010年11月9日
Geminin negatively regulates thrombopoiesis

Keiko Nakayama

MEXT Priority Research Project “Cell Proliferation Control” International Symposium Cell Cycle and Cell Differentiation From A to Z　2010年11月4日
がん遺伝子Rasは複数の遺伝子を含む広範囲な染色体領域を抑制する

細金正樹, 舟山亮, 中山啓子

日本分子生物学会第10回春季シンポジウム　2010年6月7日
Ras-mediated regional silencing around Fas gene Locus. 国際会議

Masaki Hosogane, Ryo Funayama, Jafer Sharif, Haruhiko Koseki, Keiko Nakayama

COLD SPRING HARBOR ASIA CONFERENCES, Epigenetics, Chromatin & Transcription　2010年5月18日
核内IKKβを介したNFーkB活性化による細胞死亢進

土谷佳弘, 浅野知一郎, 中山啓子, 加藤知久, Michael Karin, 鎌田英明

第３２回日本分子生物学会年会　2009年12月9日
ユビキチンリガーゼSCFFbxw7はNoｔｃｈタンパク質分解によりB細胞の分化を制御する

青山慧, 石川善則, 小野山一郎, 中山敬一, 中山啓子

第３２回日本分子生物学会年会　2009年12月9日
Ku８０のユビキチン化を介したDNA二重鎖切断修復制御

石田典子, 家村俊一郎, 安井明, 夏目徹, 中山啓子

第３２回日本分子生物学会年会　2009年12月9日
核内IKKβを介したNF-kB活性化による細胞死亢進

土谷佳弘, 浅野知一郎, 中山啓子, 加藤友久, Michael Karin, 鎌田英明

第３２回日本分子生物学会年会　2009年12月9日
ユビキチンリガーゼSCFFbxw７はNotchタンパク質分解によりB細胞の分化を制御する

青山慧, 石川善則, 小野山一郎, 中山敬一, 中山啓子

第３２回日本分子生物学会年会　2009年12月9日
T-cell differentiation and proliferation in Geminin gene-deleted mouse

中野星児, 山田秀俊, 村井寛子, 佐竹正延, 中山啓子

第３２回日本分子生物学会年会　2009年12月9日
Ku８０のユビキチン化を介したDNA二重鎖切断修復制御

石田典子, 家村俊一郎, 安井明, 夏目徹, 中山啓子

第３２回日本分子生物学会年会　2009年12月9日
Differential tissue specificity of ubiquitin ligase SCFFbxw7

Keiko Nakayama

東北大学グローバルCOE Network Medicine創生拠点国際シンポジウム　2009年12月7日
Defect of T-cell differentiation and proliferation in Geminin genedeleted mouse

Seiji Nakano

東北大学グローバルCOE Network Medicine創生拠点国際シンポジウム　2009年12月7日
Ubiquitin ligase SCFFbxw7 regulates differentiation of B lymphocytes through Notch protein degradation

Satoru Aoyama

東北大学グローバルCOE Network Medicine創生拠点国際シンポジウム　2009年12月7日
細胞内ストレスに応答した核内IKKβを介した新規ＮＦ-kB活性化機構

土谷佳弘, 浅野知一郎, 中山啓子, 加藤智久, karin Michael, 鎌田英明

第８２回日本生化学会大会　2009年10月21日
Cell cycle control during differentiation: regulation by two F-box protein, Fbw7 国際会議

Keiko Nakayama

CSI Singapore, NUS-Tohoku University GCOE Joint Symposium　2009年9月9日
Differential specificity of substrate accumulation in ubiquitin ligase SCFFBXW7 deficient cells 国際会議

Keiko Nakayama

Institite of Molecular and Cell Biology (IMCB) Cell Cycle Regulation and Tumorigenesis Symposium　2009年9月7日
Gemininはmouse Embryonic Stem CellにおけるDNA複製と遺伝子発現を制御する

山田秀俊

第６回東北大学バイオサイエンスシンポジウム　2009年6月16日
ユビキチンリガーゼSCFFbxw7はBリンパ球の分化・生存の制御因子である

青山慧

第６回東北大学バイオサイエンスシンポジウム　2009年6月16日
タンパク質の翻訳後修飾制御機構とその破綻による疾患発症メカニズムの解明

中山啓子

東北大学Network Medicine創生拠点冬の合宿　2009年2月14日
DNA損傷による中心体増幅を起こす経路の特定

山田真生, 田中正和, 中山啓子, 中山敬一, 藤澤順一, 三輪正直

第31回日本分子生物学会年会第81回日本生化学会大会合同大会　2008年12月9日
ユビキチンリガーゼＳＣＦＦｂｘｗ７は表皮角化細胞において増殖と分化を抑制する

石川善則, 奥山隆平, 小野山一郎, 青山慧, 中山敬一, 中山啓子

第31回日本分子生物学会年会第81回日本生化学会大会合同大会　2008年12月9日
ユビキチンリガーゼＳＣＦＦｂｘｗ７はＢリンパ球の分化・生存の抑制因子である

青山慧, 石川善則, 小野山一郎, 中山敬一, 中山啓子

第31回日本分子生物学会年会第81回日本生化学会大会合同大会　2008年12月9日
ノックインマウスを用いたｐ２７とｐ５７の機能的類似性と特異性の検討

洲崎悦生, 中山啓子, 中山敬一

第31回日本分子生物学会年会第81回日本生化学会大会合同大会　2008年12月9日
新規ＲＩＮＧ-Ｆｉｎｇｅｒタンパク質はＮＡＰ１Ｌ１のユビキチン化を介して細胞増殖を抑制する

石田典子, 家村俊一郎, 夏目徹, 中山敬一, 中山啓子

第31回日本分子生物学会年会第81回日本生化学会大会合同大会　2008年12月9日
新規ＲＩＮＧ‐Ｆｉｎgerタンパク質はＮＡＰ１Ｌ１のユビキチン化を介して細胞増殖を制御する

石田典子, 家村俊一郎, 夏目徹, 中山敬一, 中山啓子

第31回日本分子生物学会年会第81回日本生化学会大会合同大会　2008年12月9日
ES細胞におけるGemininの発現消失はPolyploidとTrophectoderm分化を誘導する

山田秀俊, 中山啓子

第31回日本分子生物学会年会第81回日本生化学会大会合同大会　2008年12月9日
ユビキチンリガーゼＳＣＦＦbxw7はBリンパ球の分化・生存の抑制因子である

青山慧, 石川善則, 中山啓子

東北大学大学院医学系研究科医科学専攻ルネサンス計画事業第2回リトリート大学院発表会　2008年12月6日
ユビキチンリガーゼＦｂｗ１１の発生初期におけるタンパク質分解

中山啓子

平成２０年度特定領域研究「タンパク質分解」班会議　2008年11月26日
細胞増殖・分化・死

中山啓子

第６０回日本細胞生物学会大会　2008年6月29日
G0-G１期を制御するユビキチンリガーゼと発がん

中山啓子

第72回日本生化学会中央支部例会・シンポジウム　2008年5月24日
Differential specificity of substrate accumulation in ubiquitin ligase SCFFBXW7 deficient fibroblasts and keratinocytes 国際会議

Ishikawa,Y, Onoyama,I, Okuyama, R, Nakayama, KI, Nakayama, K

Cold Spring Harbor Laboratory 2008 Meeting & Courses, The Cell Cycle　2008年5月14日
Conditional inactivation of Fbxw7 results in a defect in cell cycle exit and tumorigenesis 国際会議

Onoyama,I, Tsunematsu, R, Matsumoto,A, Nakayama,K, Nakayama, KI

Cold Spring Harbor Laboratory 2008 Meeting & Courses, The Cell Cycle　2008年5月14日
A p27-p57 knock-in mouse model uncovers common and specific roles of p27 and p57 国際会議

Susaki,E, Nakayama, K, Nakayama,KI

Cold Spring Harbor Laboratory 2008 Meeting & Courses, The Cell Cycle　2008年5月13日
Cell cycle control during differentiation:regulation by two F-box proteins, Skp2 and Fbw7

Keiko Nakayama

The 3rd International Workshop on Cell Regulations in Division and Arrest Under Stress　2008年4月6日
ユビキチンリガーゼFbw7の組織特異的な生理的基質および機能の解析

石川善則, 小野山一郎, 奥山隆平, 中山敬一, 中山啓子

東北大学大学院医学系研究科医科学専攻ルネサンス計画事業第１回リトリート大学院発表会　2008年2月16日
F-boxタンパク質β-TrCP1によるPeriodタンパク質の制御,

益田邦洋, 石川善則, 柳原徳子, 原賢太郎, 舟山亮, 石田典子, 海野倫明, 中山啓子

東北大学大学院医学系研究科医科学専攻ルネサンス計画事業第１回リトリート大学院発表会,　2008年2月16日
Gdx, an X-Linked Ubiquitin-Like Modifier, Is Conjugated to Cyclin F and Regulates Mitosis, 国際会議

N. Ishida, S. Hatakeyama, K. Nakayama, K.-i. Nakayama

4th International Conference, Ubiquitin, Ubiquitin-Like Proteins, and Cancer　2008年2月7日
Gemininは着床前初期発生に必須である

原賢太郎, 中山敬一, 中山啓子

CREST第4回公開シンポジウム　2008年1月28日
腎障害進行におけるSkp2発現亢進の解析：Skp2KOマウスを用いた検討

鈴木小由理, 深澤洋敬, 北川恭子, 内田千晴, 服部隆行, 磯部智康, 小田敏明, 三崎太郎, 中山啓子, 中山敬一, 菱田明, 山本龍夫, 北川雅敏

第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会合同大会　2007年12月11日
新規ユビキチン様修飾分子GdXによるcyclin Fと細胞周期M期の制御

石田典子, 畠山鎮次, 中山啓子, 中山敬一

第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会合同大会　2007年12月11日
ユビキチンリガーゼFbw7は表皮角化細胞において増殖と分化を制御する

石川善則, 奥山隆平, 小野山一郎, 中山敬一, 中山啓子

第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会合同大会　2007年12月11日
Fbxw7によるG0期維持機構とその破綻による発がん

小野山一郎, 松本有樹修, 中山啓子, 中山敬一

第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会合同大会　2007年12月11日
Gemininは着床前初期発生に必須である

原賢太郎, 中山敬一, 中山啓子

第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会合同大会　2007年12月11日
ユビキチンリガーゼFbw7はマウス胎仔線維芽細胞においてNotch依存的な細胞増殖障害を制御する

石川善則, 小野山一郎, 中山敬一, 中山啓子

CREST第4回公開シンポジウム　2007年11月20日
Fbw7によるG0期維持とその破綻による発がん

小野山一郎, 松本有樹修, 中山啓子, 中山敬一

CREST第4回公開シンポジウム　2007年11月20日
細胞増殖から細胞分化への分岐点を解明する

中山啓子

特定領域研究「細胞周期フロンティア-増殖と分化相関　2007年10月29日
発がんとG1-G0期制御に寄与するユビキチンリガーゼ（Abnormalities in Cell Cycle Regulation Oncogenesis and ubiquitin ligase related to G1-G0 transition)

中山啓子, 中山敬一

日本癌学会総会　2007年10月3日
Ubiquitin ligases required for the regulation of G0-G1 transision 国際会議

Keiko Nakayama

Office of Life Sciences/National University of Singapore and Tohoku University/Center of Excellence Joint Syposium　2007年9月5日
Geminin is essential for the development of preimplantation mouse embryos 国際会議

K. Hara, K.I. Nakayama, K. Nakayama

Office of Life Sciences/National University of Singapore and Tohoku University/Center of Excellence Joint Syposium　2007年9月5日
Ｇ0-Ｇ1期を制御するユビキチンリガーゼと発がん

中山啓子

千里ライフサイエンスセミナー　2007年7月4日
GdX, an X-linked ubiquitin-like modifier, is conjugated to cyclin F and regulates cell cycle 国際会議

Noriko Ishida, Shigetsugu Hatakeyama, Keiko Nakayama, Keiichi Nakayama

The 3rd International Symposium on "Novel perspectives in cancer research and translation to the clinic"　2006年11月9日
Accumulation of Notch induces cell cycle arrest in the tumor suppressor Fbxw7-deficient MEFs 国際会議

Yoshinori Ishikawa, Ichiro Onoyama, Kei-ichi Nakayama, Keiko Nakayama

The 3rd International Symposium on "Novel perspectives in cancer research and translation to the clinic"　2006年11月9日
Geminin is essential for the development of preimplantation mouse embryos 国際会議

Kentaro Hara, Keiichi Nakayama, Keiko Nakayama

The 3rd International Symposium on "Novel perspectives in cancer research and translation to the clinic"　2006年11月9日
FBW7 is a key regulator of Cell Cycle arrest and Tumorigenesis 国際会議

Keiko Nakayama

The 3rd International Symposium on Novel perspectives in cancer research and translational to the clinic　2006年11月9日
ヒト滑膜肉腫関連癌原遺伝子SYTは初期発生に必須である

木村太一, 澤洋文, 中山啓子, 中山敬一, 長嶋和郎, 田中伸哉

第65回日本癌学会学術総会　2006年9月28日
p27の増加はDNA損傷後の中心体数異常の抑制に必要である

杉原英志, 豊島秀男, 中山啓子, 中山敬一, 佐谷秀行, 三輪正直

第65回日本癌学会学術総会　2006年9月28日
分化における細胞周期調節：その破綻による発がん

中山敬一, 中山啓子

第65回日本癌学会学術総会　2006年9月28日
がんと細胞周期分化における細胞周期調節その破綻による発がん

中山敬一, 中山啓子

日本癌学会総会　2006年9月28日
細胞周期におけるユビキチン化の役割

中山啓子

第10回Molecular Cardiovascular Conference　2006年9月8日
肥満・糖尿病発症におけるユビキチンリガーゼSkp2の役割

坂上浩, 神戸大学大学院医学系研究科応用分子医学講座糖尿病代謝, 消化器, 腎臓病学分野, 酒井太門, 中村武寛, 岡田潮, 岡田裕子, 高島康弘, 永礼智基, 中村

日本臨床分子医学会学術総会　2006年7月20日
ユビキチンリガーゼFbw7はMEFにおいて増殖促進因子として

石川善則, 小野山一郎, 中山敬一, 中山啓子

第1回COE相互交流、若手研究者の会　2006年7月14日
GEMININ IS ESSENTIAL FOR DEVELOPMENT OF

Kentaro Hara, Keiichi Nakayama, Keiko Nakayama

第1回COE相互交流、若手研究者の会　2006年7月14日
Regulation of CDK inhibitors by ubiquitin ligase Fbxw7 国際会議

Yoshinori Ishikawa, Ichiro Onoyama, Kei-ichi Nakayama, Keiko Nakayama

29th Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan　2006年6月18日
Geminin is essential for development of preimplantation embryos 国際会議

Kentaro Hara, Kei-ichi Nakayama, Keiko Nakayama

29th Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan　2006年6月18日
Gdx, AN X-LINKED UBIQUITIN-LIKE MODIFIER, IS CONJUGATED TO 国際会議

Noriko Ishida, Shigetsugu Hatakeyama, Shun-ichiro Iemura, Toru Natsume, Keiko Nakayama, Keiichi Nakayama

29th Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan　2006年6月18日
GEMININ IS ESSENTIAL FOR DEVELOPMENT OF PREIMPLANTATION EMBROYS 国際会議

Kentaro Hara, Keiko Nakayama, Keiichi Nakayama

Cold Spring Harbor Symposium "The Cell Cycle"　2006年5月17日
Geminin is essential for development of preimplantation embroys 国際会議

Keiko Nakayama, Kentaro Hara, Keiichi Nakayama

Cell Regulation in Division and Arrest Workshop　2006年3月6日
ｐ27はＤＮＡ損傷後の中心体過剰複製を抑制する

杉原英志, 筑波大学人間総合科学研究科, 斎藤総一郎, 新田孝幸, 豊島秀男, 中山啓子, 中山敬一, 佐谷秀行, 三輪正直

日本癌学会総会　2005年9月14日
細胞周期とがん研究の新展開細胞増殖の制御におけるユビキチン化の役割

中山啓子, 中山敬一

日本癌学会総会　2005年9月14日
細胞周期とがんＭ期進行におけるｐ27分解の重要性

中山啓子, 三宅智, 中山敬一

日本癌学会　2004年9月29日
ＥＩＤファミリータンパクは転写抑制によって分化を阻害する

三宅智, 中山啓子

日本癌学会総会　2004年9月29日
31ST INTERNATIONAL SYMPOSIUM ON ALS/MND

第43回日本分子生物学会年会　2000年12月11日

︎全件表示 ︎最初の5件までを表示

共同研究・競争的資金等の研究課題 60

幹細胞における時空間リプログラミングの機構解明と疾患との関わりの研究

中山敬一, 中山啓子

2023年4月～ 2026年3月
膵癌術前治療耐性克服を目指したcollagen XVIIを標的とする新規治療開発

水間正道, 中山啓子, 舟山亮, 青木修一

2022年4月1日～ 2025年3月31日
SETD5の膵臓癌における機能

中山啓子, 舟山亮, 中川直, 細金正樹

2021年4月1日～ 2024年3月31日

詳細を見る詳細を閉じる

膵臓がん由来のRAS活性化型変異細胞（以降 PancCAと記載）のMEK阻害薬処理によって得られる阻害薬耐性細胞では、SETD5のタンパク質発現量が著しく増加することが報告されていた。まず、この報告の再現性と汎用性の確認を行った。マウス膵臓がん由来のRAS活性化型変異細胞（KPC・AK4.4）を用いて、MEK阻害薬またはHDAC3阻害薬を添加し3日から12日間培養した。形態の変化や増殖の低下が観察されたがSETD5タンパク質蓄積を誘導することができなかった。これまでの報告とは、実験条件が多少異なっているが、一般的にRASの変異により増殖が活性化している腫瘍においてMEK阻害薬抵抗性獲得に、SETD5の発現量の変化は貢献していないと結論付けた。これまでの我々は、神経細胞で、SETD5は細胞増殖に関わる分子の翻訳を制御していることを見出している。そこでRAS活性化型変異細胞においてもSETD5が同様の機能を有するのか調べることとした。CRISPR-Cas9システムを用いて、SDTD5を持たないRAS活性化型変異細胞（AK4.4-SETD5del）を作製した。In vitro の培養系では、AK4.4-SETD5del細胞は、野生型AK4.4に対して明らかな増殖の違いや、MEK阻害薬に対する感受性の違いを見出すことはできなかった。そこで、これらの細胞を同系統のマウス皮下に接種し、in vivo での腫瘍増殖能を調べたところ、AK4.4-SETD5delより発生した腫瘍は、野生型細胞より発生した腫瘍に比して、著しく腫瘍増大率が低下していることを見出した。
幹細胞における細胞周期の制御と代謝系との連関に関する総合的研究

中山敬一, 中山啓子, 昌子浩孝, 服部聡子

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Specially Promoted Research

研究機関：Kyushu University

2018年4月23日～ 2023年3月31日

詳細を見る詳細を閉じる

われわれは以前、細胞周期の静止状態を維持するp57遺伝子が造血幹細胞や神経幹細胞といった代表的な組織幹細胞に特異的に発現することを発見しており、このp57の発現を指標とすることで、腸管においても新たな幹細胞集団を同定できるのではないかと考えた。われわれの予想通り、造血幹細胞や神経幹細胞の細胞周期停止に重要なp57遺伝子が、腸管上皮においても稀少な細胞集団に特異的に発現していることを発見した。そこでp57の系統追跡マウスを作製し、p57発現細胞の挙動を解析した結果、p57発現細胞は通常の状態では分化細胞の一種として存在しているが、組織がダメージを受けると脱分化して幹細胞となり、腸管の再生に重要な役割を果たすことがわかった。さらに腸管上皮を1細胞RNA-seq法によって解析したところ、再生途上のp57発現細胞では本来成体腸管には発現していないはずの胎児腸管の遺伝子群や胃上皮の遺伝子群が高発現していることがわかり、幹細胞性獲得の過程において通常の成体腸管とはまったく異なった細胞状態を経ていることが明らかとなった。つまり腸管の傷害後再生においては、分化した細胞の遺伝子発現プロファイルをダイナミックに作り変える（＝リプログラミングする）ことで脱分化を引き起こし、新たな幹細胞集団を作り出していると考える。われわれは、この時間的（胎児返り）・空間的（胃上皮様変化）なリプログラミングを「時空間的リプログラミング」と名付けた。p57発現細胞はまた、Apc変異マウスで自然発生する腸管腫瘍においてもがん幹細胞として機能しており、かつ腫瘍内でも上記と同様の時空間的リプログラミング現象が起こっていることが判明した。将来的には、このような時空間的リプログラミングのメカニズムを研究することにより、がん幹細胞を根絶する治療法を確立できると期待される。
大腸癌の多様性を制御する「マイクロエクソン」の同定

唐澤秀明, 内藤剛, 大沼忍, 中山啓子, 舟山亮

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

研究機関：Tohoku University

2018年4月1日～ 2021年3月31日

詳細を見る詳細を閉じる

マイクロエクソンは非常に小さなエクソンである。ヒトの神経組織や筋組織で高発現しており、選択的スプライシングによりその発現量が調節されている。本研究では、大腸癌組織と大腸正常組織のトランスクリプトームデータを使用し、マイクロエクソンのスプライシングパターンを網羅的に解析した。その結果大腸癌細胞でマイクロエクソンのスプライシングを制御するスプライシング因子RBFOX2とPTBP1を同定し、RBFOX2とPTBP1の発現変化は、マイクロエクソンのスプライシングの制御を通して、大腸癌細胞の細胞接着能および遊走能に影響を与えていると考えられた。
細胞老化へ向かう代謝アダプテーションのエピゲノムからの探索

中山啓子

2018年4月～ 2020年3月
過剰な遺伝子増幅を誘導するシグナル経路を明らかにする

中山啓子

2018年4月～ 2020年3月
ヒストンコードによる転写伸長速度制御機構の解明

中山啓子

2017年4月～ 2020年3月
タンパク質シトルリン修飾酵素PADI2が大腸がんに果たす役割の解明

舟山亮, 中山啓子, 谷口肇

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

研究機関：Tohoku University

2016年4月1日～ 2019年3月31日

詳細を見る詳細を閉じる

PADI2（Peptidyl arginine deiminase 2）はタンパク質のアルギニン残基をシトルリン残基へ変換する酵素である。正常な大腸上皮組織で高発現する一方、がん組織と大腸がん由来の細胞株では発現量が低下していた。PADI2を安定に過剰発現する大腸がん細胞株は、PADI2を発現しない細胞に比べて増殖能が低下した。増殖の遅延は、酵素活性のないPADI2変異体を発現した細胞では見られないことから、PADI2による基質タンパク質のシトルリン化が細胞の増殖を抑制すると考えられた。またPADI2を高発現する大腸の正常組織にはシトルリン化タンパク質が存在することが明らかになった。
幹細胞維持分子の機能解析と全身の幹細胞の可視化を目指した総合的研究

中山敬一, 中山啓子, 白根道子, 後藤由季子

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (S)

研究機関：Kyushu University

2013年5月31日～ 2018年3月31日

詳細を見る詳細を閉じる

われわれは１）低増殖、２）低代謝、３）低酸化の三条件が組織幹細胞の一般的な通則であることを仮定し、全身の組織幹細胞におけるp57、Fbw7、Fbxl5の重要性を明らかにすることを本研究の目的とした。研究の過程でCDK阻害分子p57の発現が最も幹細胞特異的であることを発見したため、p57陽性細胞系統追跡マウスを解析したところ、造血幹細胞や神経幹細胞、腸管幹細胞で特異的な発現パターンを確認した。さらに遺伝子破壊実験や系統追跡実験を行い、p57の細胞周期停止作用や幹細胞性に対する影響を見積もり、その生物学的重要性を確認した。さらにがん幹細胞においてもp57は必須であることを実証した。
H3K27ヒストン修飾によるエンハンサー制御機構の解析

細金正樹, 中山啓子, 舟山亮, 城田松之

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

研究種目：Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

研究機関：Tohoku University

2015年4月1日～ 2017年3月31日

詳細を見る詳細を閉じる

細胞のエンハンサー形成におけるヒストン修飾H3K27me3の役割は未だ明らかではない。本研究では、その役割を明らかにするためにH3K27me3欠損K562細胞を用いて各種ヒストン修飾とp300の ChIP-seqならびにRNA-seq解析を実施した。その結果、エンハンサー領域のH3K27me3の減少がエンハンサー活性化の指標であるH3K27acならびにp300の上昇を誘発し、Gene body領域のH3K27me3減少は遺伝子発現を活性化させることが観察された。これらの結果よりH3K27のアセチル化とメチル化の動的な関係によりエンハンサー活性および遺伝子発現が制御されることが明らかとなった。
DNA複製による転写とエピゲノム状態の制御の可能性について

2016年4月～ 2017年3月
ヒストン修飾パターンによる転写制御の解明

中山啓子

2014年4月～ 2017年3月
がん原遺伝子RASの活性化異変が引き起こす遺伝子サイレンシング機構の解明

舟山亮, 中山啓子, 長嶋剛史, 細金正樹

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

研究種目：Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

研究機関：Tohoku University

2014年4月1日～ 2016年3月31日

詳細を見る詳細を閉じる

がん細胞のDNAに起こる突然変異はさまざまな遺伝子の発現パターンを変化させて、がん細胞の増殖能力や生存能力を異常なまでに活性化する。本研究では、がん細胞で最も高頻度に起こるRAS遺伝子の突然変異が細胞死を促す遺伝子の転写を抑制する分子機構を解析した。その結果、Erk2タンパク質のリン酸化酵素活性が転写抑制に必要であることを見出した。また転写が抑制されるときには、遺伝子周辺でヒストン修飾などのクロマチン環境が大きく変化するが、これは遺伝子の転写が抑制されたことが引き金となって起きていることが明らかになった。
腫瘍形成に求められるゲノム多様性の検証

2015年～ 2016年3月
腎虚血再灌流障害過程におけるユビキチン・プロテアソーム系の機能解析と臨床応用

本吉直孝, 齋木佳克, 川本俊輔, 阿部高明, 中山啓子, 岡村将史

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

研究機関：Tohoku University

2012年4月1日～ 2015年3月31日

詳細を見る詳細を閉じる

大動脈手術手技中に生じる腎虚血再灌流を模倣する為の両側腎動脈遮断によるブタ腎虚血再灌流モデルを確立した。Control群についで術前にプロテアソーム阻害薬であるBortezomib 1.3mg/m2を経静脈的に投与した群において各種サンプルを採取した。腎障害度評価は全身血でNGALをELISA法により測定し各尿細管毎に病理学的スコアリングを行い比較評価した。PPAR-γ及びその標的遺伝子であるLXR-αの発現は免疫染色によって定性real-time RT-PCR法により定量評価を行った。下流の転写調節因子であるNFκ-B, AP-1, NFAT, STAT-3に対しても定性・定量評価を行った。
ヒストン修飾酵素の機能に関する網羅的スクリーニング

中山啓子

2014年4月～ 2015年3月
ユビキチンリガーゼFbw7によるタンパク質分解制御からの胆道癌発現機序解明

片寄友, 山本久仁治, 吉田寛, 中川圭, 林洋毅, 中山啓子

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

研究機関：Tohoku University

2010年～ 2012年

詳細を見る詳細を閉じる

胆道癌発症におけるFbw7の役割を解明するべく,胆管癌細胞株のFbw7の遺伝子変異を検討しα・β・γの3種のisoformが存在し特にγの発現量はすべての細胞株で優位に低いことを突き止めた。次に、胆道癌のタンパク分解制御を解明するため、Fbxw7コンディショナルノックアウト(CKO)マウス由来の胎仔線維芽細胞(MEF)により検討し、CDKインヒビターは、Fbxw7による蛋白分解システムによる複雑な制御を受けていることを明らかとした。
RAS活性化による転写制御ー染色体領域に注目したアプローチによる解析

中山啓子

2011年～ 2011年
In vivoタンパク質複合体形成モニタリングの試み

中山啓子, 石田典子, 舟山亮, 中野星児

2010年～ 2011年

詳細を見る詳細を閉じる

マウス個体(特に発生過程)でのタンパク質の相互作用変化について高い時空間的分解能を持った解析法を確立することを目的に本研究を行った。タンパク質はそれが相互作用する分子により、異なる機能発揮するが、相互作用分子の研究は試験管内で細胞抽出液中を用いた試験管内での結合を調べるに過ぎなかった。そこで、本研究課題では、in vitroで相互作用することが知られている分子群が、in vivoでは、いつ、どこで相互作用するのかを半定量的にモニターする方法を開発することを目指し、発生工学的手法を用いて蛍光タンパク質の断片との融合タンパク質を発現するマウスを作製、in vivoでタンパク質複合体の挙動をモニタリングする。本研究ではモデルタンパク質としてGemininを用いた。 GemininはCDT1とHoxB9に結合することが知られている。そこで、Geminin・CDT1・HoxB9をそれぞれ異なる蛍光タンパク質との融合タンパク質を作製する。これらの融合タンパク質がこれまでに報告されている機能を持つことを培養細胞内で確認するために、NIH3T3細胞にこれらの融合タンパク質を過剰発現し、細胞周期に与える影響と、これまで報告されている結合タンパク質との結合を免疫沈降法で確認した。また、これらの融合タンパク質を共発現し、想定される蛍光がみられることを確認した。以上の結果を踏まえて、in vivoでのモニタリングを行うために、lck promoterによって各融合タンパク質のcDNAが転写されるような発現ベクターの構築を終えた。
細胞増殖から細胞分化への分岐点を解明する

中山啓子, 石田典子, 舟山亮, 中野星児, 西田有一郎, 山田秀俊, 原賢太郎

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

研究機関：Tohoku University

2007年～ 2011年

詳細を見る詳細を閉じる

Gemininノックアウトマウス胚とコンディショナルノックアウトマウスを用いて、pre-RCによる細胞増殖制御とHoxタンパク質、Polycomb遺伝子群による分化制御との関係を明らかにすることを目標とした。特に、今年度は造血幹細胞特異的Gemininノックアウトマウスの作製と解析を中心に研究を進めた。 Geminin欠失マウスの骨髄細胞中では長期造血系再構築能をもつ造血幹細胞(LT-HSC)の細胞数がコントロールに比較し約15%に減少しており、GemininはLT-HSCの維持に必要であることが示された。また、Geminin欠失マウスでは骨髄前駆細胞の分画である共通ミエロイド系前駆細胞(CMP)、巨核球・赤血球前駆細胞(MEP)がそれぞれ約50%、3%に減少し、CMP、MEP、顆粒球・マクロファージ前駆細胞(GMP)はいずれもコロニー形成能を消失していた。しかしながら、巨核球は約8倍に増加していた。成熟細胞では血小板が約8倍に増加し、赤血球が約半分に減少していた。このように、造血幹細胞でのGemininの欠失は巨核球・血小板系統への分化を強く誘導し、他の系統への分化を強く阻害した。この表現型より、骨髄幹細胞は、これまで言われているような多段階を経て巨核球へ分化するのではなく、Gemininの発現量が適当に調節されることで、pre-RCによる細胞増殖制御と転写因子への効果によって、中間段階を経ずに骨髄幹細胞から直接巨核球へ分化することが可能であることを示唆している。
Gdxによる細胞周期M期の抑制機構の解明

石田典子, 中山啓子, 舟山亮, 中野星児, 山田秀俊

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

研究機関：Tohoku University

2008年～ 2010年

詳細を見る詳細を閉じる

われわれはGdX/UBL4が細胞周期M期の制御因子cyclin Fに翻訳後修飾分子として共有結合し、cyclin Fのタンパク質安定性を制御することを明らかにした。GdX化システムを担う酵素群やGdX化を受ける新規基質の同定を達成することはできず、M期を制御するGdX化の分子メカニズムの解明には至らなかった。また、当初GdX化E3リガーゼの最力候補として同定したRNFは、新規ユビキチンリガーゼとして精子細胞分化で機能することがRNF欠損マウスの解析より明らかとなり、今後発展させる予定である。
ユビキチンリガーゼF-boxタンパク質の分子的・時空間的調節システムの解明

中山啓子, 石田典子, 舟山亮, 中野星児, デルカルピオムニョスカルロスアドリエル, 西田有一郎, 山田秀俊

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

研究機関：Tohoku University

2008年～ 2010年

詳細を見る詳細を閉じる

F-boxタンパク質は、SCF複合体を構成しユビキチンリガーゼとして機能する。本研究課題では、代表的なF-boxタンパク質であるFbxw7とβ-TrCPに注目し、そのノックアウトマウスの解析を中心として、生理的な役割の解明を試みた。Fbxw7は、T細胞や造血幹細胞では発がんを抑制するが、胎仔線維芽細胞やケラチン細胞では、むしろ増殖を促進した。b-TrCPは増殖を促進する効果があることがわかった。
細胞周期と初期発生に関わる分子群の新規解析法の開発

中山啓子, 舟山亮, 山田秀俊, 原賢太郎

2007年～ 2008年

詳細を見る詳細を閉じる

核膜を標識するためにラミンBを、中心体の標識にセントリン2を、細胞膜の標識にβ-カテニン、E-カドヘリンを用いた積まず、これらのタンパク質のcDNAをRT-PCRにて取得し、そのcDNAの5'側または3'側に蛍光色素をコードするcDNAをin frameで連結し、標識タンパク質と蛍光色素の融合タンパク質をコードするcDNAを作製した。融合タンパク質のcDNAを発現ベクターにクローニングし、腫瘍細胞へ発現し、蛍光顕微鏡にて観察し、融合タンパク質が、予想された目的とする細胞内局在をとることを確認した。このベクターを鋳型にRNA polymeraseを用いて転写反応を行い、RNAを作製した。さらにpoly Aを付加した後、精製し、注入用RNAとした。このRNAをマウス一細胞期胚に注入した。RNA注入後、48時間後に蛍光顕微鏡で観察し、期待される細胞内局在をとっているか、胚の発生は正常に進行しているかを判定した。さらにこの胚を固定し、各小器官に特有のタンパク質に対する抗体で、免疫染色を行い、発現させた融合タンパク質と共局在することを確認した。その結果、ラミンBおよびE-カドヘリンは、有用なツールであることが判明したが、中心体を標識するセントリン2は、発現が弱く明瞭な染色が得られなかった。ラミンBおよびE-カドヘリンは、さらに継時的に観察をタイムラプス蛍光顕微鏡で行った。RNA注入12時間後より、30分ごとに96時間までの観察を行い。この間の蛍光強度の変化を調べたところ、いずれも96時間の間に蛍光強度は減衰するものの、観察は可能であることが判明した。
発生におけるタンパク質分解制御機構とその意義の解明

中山啓子, 石田典子, 舟山亮, 山田秀俊, 原賢太郎

2007年～ 2008年

詳細を見る詳細を閉じる

β-TrCP1ノックアウトマウスは、正常に産まれ、生命予後に異常はなく、正常に子孫を維持することが可能であった。β-TrCP2ノックアウトマウスは、胎生8.5日より成長が停止し、胎生9.5日では、心嚢や頭部のバルーン状の拡張が見られた。そして、血管の内皮細胞の免疫染色からリモデリング不全が認められた。そこで、胎生8.5日目のβ-TrCP2ノックアウトマウスを詳細に観察するために、病理切片による免疫染色を行った。その結果、β-TrCP2ノヅクアウトマウスは、細胞周期の異常は認められないものの、特に胚後部に強くアポトーシスが観察された。この部位は、レポーターマウスを用いた際に観察されるβ-cateninの活性が高い部位と一致していた。 β-TrCP1とβ-TrCP2の相補性を調べるためには、ダブルノックアウトマウスの表現型の観察を試みた。その結果、ダブルノックアウトマウスは、胎生7.5日目には、観察されるものの、明らかにβ-TrCP2シングルノックアウトマウスに比較し矮小であった。このことは、β-TrCP1とβ-TrCP2の間に相補性があることを示している。しかしながら、胎生7.5日目の死亡原因については、未だ不明である。また、β-TrCP1とβ-TrCP2の相補性を調べるためには、ダブルノックアウトES細胞の樹立を試み、β-TrCP2のノックアウトES細胞の樹立には成功した。β-TrCP2ノックアウトES細胞は、試験管内分化誘導系によって、神経前駆細胞へ分化できることを確認した。また、ヌードマウスに移植し、奇形腫形成能を調べたところ、三胚葉へ分化できることが観察され、β-TrCP2は、何らかの特異的な胚葉形成に必須な分子では無いことが判断した。
個体発生における細胞増殖制御競争的資金

2004年1月～ 2007年3月
G0期のp27安定性に関わる巨大複合体の解析

石田典子, 中山啓子, 原賢太郎, 中谷雅明

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

研究機関：Tohoku University

2006年～ 2007年

詳細を見る詳細を閉じる

G0期特異的に形成されるp27巨大複合体構成因子、及びその制御因子の同定・機能解析を目標として本研究を行った。p27はG0期から細胞周期に再進入する際にタンパク質分解により発現量が急速に減少する、重要な鍵分子である。このp27のSer10部位をAlaに置換した非リン酸化型ノックインマウスを作製・解析したところ、本来非常に安定であるG0期にp27タンパク質が不安定化し、p27発現量が低下することが明らかとなった。これはG0期に形成されるp27の巨大複合体が増殖シグナルであるPI3キナーゼ活性によって阻害される結果、p27が不安定化することが示唆された。本研究ではこのG0期特異的なp27の巨大複合体プロテオミクスを行い、その構成因子を明らかにするとこと、またこのG0期特異的な巨大複合体の阻害分子の同定を試みた。まず293T細胞にFLAGタグを付加したp27を発現させ、PI3Kインヒビター処理により細胞周期を停止させた細胞、PI3キナーゼ活性化時それぞれに特異的に結合する分子群を、抗FLAG抗体カラムを用いて濃縮し、p27複合体プロテオミクスを行った。その結果、30種類弱のタンパク質をPI3Kインヒビター存在下のp27結合分子として同定することに成功したが、これらp27結合分子の多くは既知であり、残りの結合因子について解析した結果、これらの中にもG0期においてp27と複合体を形成する分子群を見出すことは出来なかった。しかしPI3キナーゼ活性化時特異的にp27とPP2A脱リン酸化酵素の結合することを発見した。PP2AはSer/Thr特異的脱リン酸化酵素であることから、G0期にはリン酸化Ser10部位がG0期特異的な巨大複合体を促進させるが、増殖刺激によりPI3キナーゼが活性化された状態ではPP2Aがp27のリン酸化Ser10を脱リン酸化し、巨大複合体の形成が阻害されてp27が分解されやすくなることが推測された。この仮説を検証するため、PP2Aの阻害剤やsiRNAによる阻害がp27の分解(G0期からの脱出)に影響を与えるか検討している。
F-boxタンパク質β-TrCPの生理的基質の検索と生体における機能解析

中山啓子, 石田典子, 原賢太郎, 中谷雅明

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

研究機関：Tohoku University

2006年～ 2007年

詳細を見る詳細を閉じる

タンパク質の発現量調節が個体の発生の関係を明らかとすることが本研究の目標である。F-boxタンパク質 β-TrCP2/Fbw1b(以下β-TrCP2)の機能解析を行い、個体の発生・分化における役割を検討した。 β-TrCP/Fbw1(以下β-TrCP)はβ-cateninやIkBαなどをユビキチン化するユビキチンリガーゼである。しかしながら、われわれが作製したβ-TrCP1ノックアウトマウスでは、β-cateninやIkBαの分解がなお観察されることから、β-cateninやIkBαの分解を担うユビキチンリガーゼはβ-TrCP1のみではなく、またβ-TrCP1の生理的基質は他の分子である可能性が残された。一方β-TrCP1の相同分子であるβ-TrCP2のノックアウトマウスは、胎生9.5日に胎生致死である。このことはβ-TrCP1とβ-TrCP2の間に生化学的に差違は認められていないにも関わらず、生物学的には大きな差を持っていることを示している。そこでβ-TrCP2の認識配列を持つタンパク質の中で、胎生初期から中期にかけて発現しているものを4個ピックアップし、β-TrCP2との結合能やβ-TrCP2によるユビキチン化の有無を検討しが、いずれも結合を認めず、またβ-TrCP2による分解促進は観察されなかった。一方、β-TrCP2のコンディショナルノックアウトマウスの作製を行った。 β-TrCP1のノックアウト胎仔線維芽細胞では、特にPer2の制御異常が観察され、概日リズムの維持にβ-TrCP1によるタンパク質分解が重要な機能を果たしていることが示唆された。
ユビキチンリガーゼCdc4/Fbw7変異にともなう組織特異的細胞増殖機構の解明

中山啓子, 松本雅記

2006年～ 2007年

詳細を見る詳細を閉じる

ユビキチンリガーゼCdc4/Fbw7は、Notch、サイクリンE、c-Mycなど細胞増殖を促進する分子をユビキチン化するリガーゼであることが、試験管内の研究で明らかとなっている。また、様々ながんでCdc4/Fbw7の変異が報告されがん抑制遺伝子であると考えられる。すなわちCdc4/Fbw7の機能不全によりその基質分子が異常に蓄積し、そのために異常な細胞増殖、がん化を引き起こしていると考えられる。そこでわれわれは、Cdc4/Fbw7のコンディショナルノックアウトマウスを作製し、Cdc4/Fbw7の生物学的な機能、特に発がんに対する関与を調べた。まず、胎仔線維芽細胞でCdc4/Fbw7遺伝子を欠失させた。すると予想に反して細胞の増殖が著しく抑制された。これは、細胞周期のG1期での停止とアポトーシスの増加によるものであった。その際に、タンパク質の発現量を調べてみると、Cdc4/Fbw7の基質と報告されているもののうち、Notch-1が異常な蓄積を示すものの、サイクリンEやc-Mycの蓄積は認められなかった。そこで、Notch-1が転写因子として機能する際の共役因子であるRBP-jとのダブルノックアウトを作製しNotch-1の過剰な機能発現をキャンセルすることを試みた。すると、Cdc4/Fbw7シングルノックアウトで観察された増殖抑制は解除された。このことから、Cdc4/Fbw7は胎仔線維芽細胞においては、Nocthのシグナル量を制御することによって適切な増殖能力を維持していること考えられた。
新規分化抑制因子EIDによる哺乳類幹細胞の未分化性維持機構の解明

中山啓子, 石田典子, 原賢太郎

2005年～ 2006年

詳細を見る詳細を閉じる

EID-1は分化に関わる転写コアクチベーターp300に結合し、p300のヒストンアセチル化酵素(HAT)活性を阻害する。この阻害活性により、p300依存的に分化を抑制した。分化誘導可能なC2C12細胞にEID-1を安定的に過剰発現し、分化に与える影響を調べた。野生型C2C12は、血清除去などによって分化し細胞形態の変化、分化マーカータンパク質の発現が見られるが、EID-1過剰発現C2C12では、分化が阻害された。さらにEID-1はp300のみならずその基質であるピストンにも結合し、そのアセチル化を阻害することによって細胞分化に必要な転写因子の機能を阻害した。一方、EID-1は細胞増殖を停止し分化誘導が開始されると同時に、急激にプロテアソーム依存的分解によって分解された。この分解によって分化関連転写因子の阻害作用は消失し、分化が開始すると示唆された。一方、EID-1の類縁タンパク質として同定したEID-2およびEID-4は、EID-1と異なり転写抑制に働くピストン脱アセチル化酵素(HDAC)と結合し、機能的に協調することによって、分化に関わる転写を阻害する。すなわち結合蛋白は全く異なる機能を持つもののEID-2およびEID-4もEID-1と同様に分化誘導可能な細胞株に過剰発現させると、血清除去などによるMyoDなどの転写活性誘導が見られず、分化誘導が阻害された。さらにマウス筋芽細胞株C2C12細胞への剰発現では、アポトーシスの誘導がみられ、EIDファミリーは単に分化の決定因子として機能するのではなく、アポトーシスも含む細胞の運命決定因子として機能していると考えられた。
タンパク質の安定性に関わる新規翻訳後修飾、Gdx化システムの分子機構の解明

石田典子, 中山啓子

2005年～ 2006年

詳細を見る詳細を閉じる

ユビキチンやユビキチン様タンパク質(UBLs)による翻訳後修飾は、生命現象に必須なタンパク質制御機構である。われわれはこれまでにII型 UBLグループに分類されていたGdX/UBL4が新規翻訳後修飾分子(1型 UBL)として機能することを示唆するデータを得ていた。GdXの結合タンパク質として同定したcyclin Fが細胞内でGdX化することを示すデータを得たのである。GdX化を受けないcyclin F変異体を細胞に発現させたり、siRNAによってGdXタンパク質の発現量を減少させるとcyclin Fは安定化し、どちらの場合もG2/M期の細胞が増加した。そこで本特定領域研究期間に、より詳細な細胞周期の解析と新規GdX化システムの酵素群(E1(GdX活性化酵素)/E2(GdX結合酵素)/E3(GdXリガーゼ)様分子)の同定を試みた。まず細胞周期解析のために核を可視化したHeLa細胞を用い、shRNAによる誘導型GdX発現抑制細胞株を樹立し、M期の詳細な解析を行った。GdX発現抑制細胞では細胞増殖が低下し、M期の障害(中期形成異常による染色体分配異常や紡錘体形成異常)による多核細胞や分裂期細胞死が増加するという結果を得た。正常な細胞ではS期からM期にcyclin Fの発現量は高くなるが、GdX発現抑制細胞ではそのcyclin Fの分解が遅延し、その結果cyclin Aやcyclin Bの分解時期が遅れていた。Cyclin Bの分解異常により細胞質分裂が完了せず、細胞が2核になることが報告されていることから、GdXはcyclin Fを修飾(GdX化)することによってcyclin Fタンパク質の安定性を制御し、cyclin Aやcyclin Bを制御することが示唆された。このことよりGdXによるcyclin Fの制御が正常な細胞周期の維持に関わっている可能性が強く示唆された。 GdX化システムに関しては、E1(GdX活性化酵素)/E2(GdX結合酵素)様分子の同定には至らなかった。しかしcyclin FのGdX化には直接関与しないGdX化のE3(GdXリガーゼ)様分子や新たな基質の候補遺伝子を複数同定することに成功した。それらの解析を含め、細胞周期M期の制御に重要なGdX化システムの分子メカニズム、特にE1/E2様分子の同定が今後の課題である。
発がんにおけるユビキチンリガーゼCdc4/Fbw7基質分子の役割

中山啓子, 恒松良祐

2005年～ 2005年

詳細を見る詳細を閉じる

F-boxタンパク質Cdc4は、Skp1、Cul-1、Rbx1とともにSCF複合体を構成し、ユビキチンリガーゼとして機能すると考えられている。われわれが作製したCdc4ノックアウトマウスは、Notch-4の異常蓄積による血管形成異常が起こり、胎生10.5日目で死亡した。このことは、胎生期における生理的かつ冗長性を示さない基質分子はNotch-4であると結論された。 Tリンパ球特異的にCdc4を欠損するコンディショナルノックアウトマウスを作製し、T細胞分化過程をCD4およびCD8の発現パターンから解析したところ、分化の中間段階であり、CD4/CD8いずれもが発現し、正の選択・負の選択が行われるステージの細胞が野生型に比べ有意に増加していることが判明した。このステージでは通常増殖を停止しるが、Cdc4ノックアウトT細胞では激しい増殖がこのステージでも認められ、過剰増殖がこの細胞群の増加の原因であると考えられた。また、生後8週以降よりリンパ腫の発症が認められ、Cdc4は当初報告されたとおり、がん抑制遺伝子として機能していることが裏付けられた。このような過剰増殖しているリンパ球の生化学的解析では、Notchファミリーとc-Mycの過剰な蓄積が観察された。そこでNotchが転写因子として働く際の共同因子であるRBP-JκノックアウトマウスとCdc4ノックアウトマウスを交配した。このマウスはNotchシグナルが欠失し、かつc-Mycが蓄積している環境を作製することとなり、それらの分子のTリンパ球増殖の効果を調べたところ、このようなTリンパ球でも異常増殖が見られた。このことからCdc4ノックアウトTリンパ球はc-Mycの過剰蓄積により異常な増殖をきたし癌化が誘導されていると結論した。
分化と増殖の転換の分子機構の解明

三宅智, 中山啓子, 石田典子

2004年～ 2005年

詳細を見る詳細を閉じる

本年度の研究の結果、以下の成果を得た。 1 EID-2類縁分子として新たにEID-2-1ike inhibitor of differentiation-3(EID-3)をクローニングした。これによってEID-1,-2,-3からなる新しい分子ファミリーという概念を提唱することができた。 2 EID-3はEID-2と同様に、過剰発現系において細胞分化を阻害することを明らかにした。特にマウス筋芽細胞株C2C12を用いた系では、発現レベルの高いものでは細胞死を来すこともわかった。 3 EID-3はEID-2と同様に、ヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)と結合し、分化に関わる転写因子(MyoDなど)の転写活性を抑制することを明らかにした。HDACファミリーの中でも特にクラス1HDAC(HDAC1,2)と結合することもわかった。 4 EID-3は核内に局在し、この機能はHDACとの結合および転写阻害機能と共通のドメインを利用していることを明らかにした。 5 EID-2およびEID-3がEID-1と同様に、癌抑制遺伝子産物pRBと細胞内で複合体を形成するすることを証明した。 6 EID-2およびEID-3遺伝子は同一染色体上の近傍に位置し、この両方を含むアンプリコンがある種の癌細胞株で増幅していることがわかった。以上をまとめると、1から5の結果によって、EID-2およびEID-3の生化学的・生物学的機能をよりいっそう明らかにすることができた。また5,6の結果から、EID-2およびEID-3の発がんにおける役割が推測された。
ユビキチンリガーゼによって制御されるタンパク群の機能解析

中山啓子, 石田典子, 原賢太郎, 三宅智

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

研究機関：Tohoku University

2004年～ 2005年

詳細を見る詳細を閉じる

本研究では、遺伝子改変動物(ノックアウトマウス等)を用いて、遺伝子改変によって生ずるタンパク質の変化を網羅的に検索するシステムを構築し、ユビキチンリガーゼの生理的基質の同定を試みた。まず、抗ユビキチン抗体を用いた精製法によるユビキチン化蛋白質の特異的精製を試みた。ユビキチンは細胞内で量的に多い蛋白質であり、そのほとんどが遊離の状態(基質に結合していない)で存在しているため、通常の抗体を用いたアフィニティークロマトグラフィーを行うと、主に遊離ユビキチンが回収される。そこで、われわれは抗ユビキチンモノクローナル抗体であるFK2が基質と共有結合したユビキチンを選択的に認識できることに着目し、FK2-カラムを用いたアフィニティークロマトグラフィーによるユビキチン化蛋白質の濃縮を行った。一方、ユビキチンリガーゼノックアウトマウスより抽出されたタンパク質を野生型と比較するために、まず適切な組織の選択が必要であり、当該ユビキチンリガーゼの機能している臓器を推定するためにin situ hybridization法を適応、また適当な組織について適切なタンパク質の抽出法の検討を行った。そのような基礎検討をふまえ、Fbw7ノックアウトマウス胎仔線維芽細胞より細胞抽出液を調製し、抗ユビキチンモノクローナル抗体であるFK2を用いたFK2-カラムによるアフィニティークロマトグラフィーを行い、ユビキチン化蛋白質の濃縮を行った。
Gemininノックアウトマウスを用いた複製開始機構の解析

中山啓子, 原賢太郎

2004年～ 2005年

詳細を見る詳細を閉じる

GemininはDNA複製のライセンシング因子であるCdt1と結合し、Cdt1の前複製複合体(preRC)との結合を阻害する分子である。GemininがAPCによって分解されることによってCdt1は遊離しpreRCと結合することによって複製が再開すると考えられている。われわれはgemininノックアウトマウスを作製し胎生3.5日胚ですでに異常な形態をしめしていることを昨年までの研究で示してきた。そこで本年は、胎生3.5日胚の観察を継続すると同時に、コンディショナルノックアウトマウスの作製に着手した。 Gemininノックアウトマウス3.5日胚は、細胞および核の大きさが不同であり、また一つの細胞に複数個の核が観察された。さらにBrdUラベルによるDNA合成期の核を染色すると大小不同に核がいずれも染まり、また一つの細胞内でも複数個の核が複製していることが判明した。一方、抗リン酸化ヒストンH3抗体によるM期細胞の染色では、野生型には複数個の細胞が染まるもののgemininノックアウト胚では染色が見られなかった。さらに受精後1.5日目に2細胞期胚を卵管より採取、培養を行った。するとgemininノックアウト胚は、4細胞期胚までは野生型と同様に増殖を継続するものの8細胞期で増殖を停止し、いったん観察される細胞間接着も低下することが判明した。このとき、抗geminin抗体で免疫染色を行うと、2細胞期胚では核内にgemininは染色されるが、ノックアウト胚では、4細胞期よりその染色性が低下し、8細胞期では認められなくなることが判明した。このことから、おそらくは母性由来のgemininが4細胞期までの細胞増殖を支持しているが、それがこの時期に消失すると同時に、過剰なS期の進行と共にM期の進行が阻害が生じていると考えられる。
サイクリンEとMycの分解に関与するユビキチンリガーゼCdc4の発癌に果たす役割

中山啓子

2004年～ 2004年

詳細を見る詳細を閉じる

F-boxタンパク質Cdc4は、Skp1、Cu1-1、Rbx1とともにSCF複合体を構成し、ユビキチンリガーゼとして機能すると考えられている。Cdc4は当初サイクリンEのユビキチンリガーゼとして報告されたが、われわれが作製したノックアウトマウスでは、サイクリンEの蓄積は認められずむしろNotch-4の異常蓄積による血管形成異常が認められた。培養細胞を用いたでは、Cdc4はc-Mycにリン酸化依存的に結合し、Cdc4の過剰発現ではc-Mycタンパクの半減期を減少させ、逆にsiRNAiによるノックダウンでは半減期を増加させた。また、Cdc4のSkp1結合部位であるF-boxに変異を導入したCdc4は、c-Mycの半減期を延長した。このようなことから、Cdc4は、c-Mycのユビキチンリガーゼとして働いていることが判明した。一方、Tリンパ球特異的にCdc4を欠損するコンディショナルノックアウトマウスを作製したところ、T細胞の分化については明らかな異常は認めなかったが、末梢のリンパ組織において、増殖障害があり末梢のTリンパ球は抗原刺激に対して応答性が低下していた。また、コンディショナルノックアウトマウスから調製した胎児線維芽細胞においてin vitroでCdc4遺伝子を不活化すると、著しい増殖障害が見られた。生化学的な結果より、c-Mycの過剰蓄積によって、アポトーシスが誘導されている可能性が示唆される。
発生工学プロテオミクスを用いたPKC-δシグナル伝達系の解明

中山敬一, 畠山鎮次, 嘉村巧, 中山啓子, 谷内一郎

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

研究機関：KYUSHU UNIVERSITY

2003年～ 2004年

詳細を見る詳細を閉じる

蛋白質の生物学的機能をとらえる最も有効な手段として、発生工学的手法を用いて作製した遺伝子改変マウスの解析が挙げられる。本研究では、遺伝子改変によって生ずるマウス蛋白質の総体的な変化をプロテオミクス技術によって網羅的に検索するシステム「発生工学プロテオミクス」を構築し、それによって多くの酵素-基質関係を同定することによって種々のシグナル伝達系の総合的理解を目指した。プロテインキナーゼC(PKC)は細胞内シグナル経路の中心的な分子としてその重要性が指摘されてきた。近年PKCファミリーの1つであるPKCδがアポトーシスの際にICE様のプロテアーゼによって切断され、活性型に変換されることが報告された。われわれはPKCδの遺伝子を人工的に破壊したマウス(PKCδノックアウトマウス;以下PKCδ-/-マウス)を作成し、そのマウスにおける発生分化や組織機能における異常を検索することにより生体内でのPKCδの生理的役害を明らかにしてきた。しかしながらノックアウトマウスにおける異常のメカニズムについてはその詳細が不明であり、発生工学プロテオミクスを用いてさらなる解析が必要であった。発生工学プロテオミクスの前段階である定量的フォーカスド・プロテオミクスの技術について開発を行った。特に蛋白質の修飾で最も注目されているユビキチン化とリン酸化に対して、ユビキチン化プロテオーム及びリン酸化プロテオームの解析技術を確立した。さらに定量的プロテオミクス技術の確立を進めるために、培養細胞における安定同位体を用いた代謝ラベル法(SILAC)導入の検討を行った。さらに、これらの確立した技術を組み合わせて、翻訳後修飾関連プロテオームの定量解析技術を確立した。
プロテアソームへのユビキチン化基質のターゲッテング機構の解析

嘉村巧, 中山敬一, 畠山鎮次, 中山啓子

2003年～ 2004年

詳細を見る詳細を閉じる

ユビキチン・プロテアソーム系を介したタンパク質分解は細胞周期・シグナル伝達・脳変性疾患等に中心的な役割を果たしている。タンパク質へのユビキチン化反応には、E1,E2,E3の酵素群が関与し、この分野に関する研究は急速に進んでいるが、その後のステップであるポリユビキチン化タンパク質のプロテアソームへのターゲッテング機構に関してはほとんど明らかになっていない。最近、我々は生化学的手法を用いて、KPC1(C末側にRINGフィンガー配列を持つ)とKPC2(N末側にUBL配列、C末側に2つのUBA配列を持つ)の2量体からなる複合体を、CDKインヒビターp27Kip1に対する新たなE3として細胞抽出液より分離・精製した。近年UBLおよびUBA配列をもつタンパク質の機能解析が盛んに行われているが、我々が同定したKPC2に関する報告はいまだなされていない。そこで本研究ではKPC2のユビキチン・プロテアソーム系に対する影響を生化学的、細胞生物学的方法を用いて解析することを目的とする。試験管内および細胞内でKPC2がプロテアソームおよびユビキチンと結合することを確認している。これらの結合にはそれぞれKPC2のUBL及びUBAドメインが必要であった。また試験管内でのp27のユビキチン化反応に対してKPC2のSTI1ドメインが必要であることを明らかにした。さらにRNA干渉法をもちいて細胞内でp27の分解にKPC2が関与していることを明らかにした。またKPC2のノックアウトマウスの作製し、個体レベルでのKPC2の影響を検討することとした。KPC複合体とプロテアソームとの関係が明らかになれば、ポリユビキチン化タンパク質のプロテアソームへのターゲッテング機構解明の手がかりとなると考えられる。
CD4サイレンシングの分子機構とリンパ球分化過程におけるRunxの役割の解明

谷内一郎, 畠山鎮次, 嘉村巧, 中山敬一, 中山啓子

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

2003年～ 2004年

詳細を見る詳細を閉じる

CD4サイレンシングの分子機構の解明とリンパ球分化過程におけるRunxファミリーの役割の解明の為に、遺伝子標的マウスやTgマウスを作製し解析を行った。まず、Runx1、Runx3とCBFβ遺伝子に関して、Cre-loxPの系を用いて組織特異的不活性化マウスを作製した。次にT細胞特異的Runx3Tgを作製した。また、Runx1のC-末端のVWRPY配列を欠損する変異マウスの供与を受けた。これらの遺伝子変異マウスの解析により、以下の事を明らかにした。 1.iNKT細胞はDP胸腺細胞より分化し、その分化過程にはRunx1の機能が必須である 2.Runx1とRunx3はCD4サイレンシングや胸腺細胞分化において相補的な機能を持ち、Runx1とRunx3を共に欠損するマウスでは胸腺細胞の正の選択過程と成熟過程が著しく障害される。 3.Runx1のC末端にあるVWRPY配列はCD4サイレンシングに必須であるが、VWRPY配列が重要でない転写抑制機構も存在する。VWRPY配列は転写活性化にも重要な役割を持つ。更に、Runx1のVWRPY配列はiNKT細胞の分化に必須である。 4.Runx3の発現のみではCD4サイレンシングの誘導には不十分であり、Runx3の発現はCD4サイレンシングの系列特異性を規定するものではない。 5.CBFβはCD4サイレンシングに必須であり、また胸腺細胞の正の選択過程と成熟過程にも必須である。 6.TCRβ遺伝子座の活性化には、Eβエンハンサー内の3個のRunx結合配列へのRunx1の結合が重要である。1個のRunx結合配列の変異はTCRβ遺伝子の初期活性化に部分的な影響を及ぼすが、成熟T細胞でのTCRβ遺伝子の発現維持には影響しない。
サイクリンEのユビキチンリガーゼCdc4が細胞周期進行に果たす役割

中山啓子

2003年～ 2003年

詳細を見る詳細を閉じる

サイクリンEは380番目のスレオニン(スレオニン380)がリン酸化されるとタンパクの安定性が低下することから、リン酸化依存的な分解経路があるととが示唆されてきた。2001年にリン酸化スレオニン380を認識するユビキチンリガーゼとしてF-boxタンパクCdc4が報告された。Cdc4の過剰発現によつてサイクリンEの分解が促進されるというデータであった。また、あるがん細胞ラインではCdc4に変異があり、サイクリンEの過剰な蓄積が観察されている。そこでわれわれはCdc4のノックアウトマウスを作製した。Cdc4ノックアウトマウスは胎生10日付近で致死となり、その際、特に頭蓋内出血が多くの個体で認められた。Cdc4ノックアウトマウスでは、原始血管叢は正常に形成されるが、リモデリングが起こらないために、正常の血管形成が認められなかった。死亡原因は、血管形成異常であると考えられた。一方、Cdc4の基質と報告されたサイクリンEは、、Cdc4ノックアウトマウスにおいて量的に変化は認められず、サイクリンEによって制御されるCDK2活性にも変化はみられなかった。このことより少なくとも胎生中期では、サイクリンEの分解にCdc4は必須ではないと結論づけられる。しかし胎生10日胚を用いた解析は生化学的解析などに限界があること、また、サイクリンEの蓄積にともなう発がん機構の解明には成体マウスが必要なことからコンディショナルノックアウトマウスを作製することをめざして研究を進めている。また、Cdc4はがん遺伝子c-Mycもユビキチン化する可能性を示唆するデータが予備的実験から得られている。今後、Cdc4の生物学的役割とともに発がん機構への関与についても検討したい。
リボザイムを用いた組織特異的ノックアウトマウス作製法の開発

中山啓子

2002年～ 2003年

詳細を見る詳細を閉じる

リボザイムは小さな触媒作用を持つRNAで、1990年代前半より基礎研究で用いられてきたが、特定の遺伝子配列を認識することができるところから、医療等の社会的有用性が大いに期待されてきた。リボザイムはあるRNA上の特定配列を認識し、その部位を切断することによって、遺伝子の発現レベルを低下させることができるRNAである。この反応は、試験管内では非常に効果的に行われるにも関わらず、細胞内での活性は、標的遺伝子に強く依存し一般的な発現抑制システムとして用いることは難しいとされていた。しかし、リボザイムの発現法の工夫によって、細胞内で任意の遺伝子の発現レベルを調節することが可能となった。そこで本研究では我々が持つ発生工学的技術をリボザイムによる発現調節システムと結びつけ、組織特異的なノックアウトマウスの作製、さらにリボザイムライブラリーを用いた網羅的ノックアウトマウスの作製という新しい方法論の確立を目指していた。すでに我々がノックアウトマウスを作製済みのp27やSkp2について検討を行った。まず、従来の発現ベクター及び、レトロレトロウイルスベクター由来を開発し、その有効性の比較検討を行ったところ、レトロウイルスベクターでは安定な遺伝子の導入効率が得られるものの、タンパク発現の抑制効果が低いことが判明した。これは、リボザイムの転写量に依存していると考えている。また、リボザイムの認識配列とその発現低下効果の比較検討を行ったが、一定の法則性を見出すことができなかった。
マウスGemininの発生工学的手法を用いた機能解析

中山啓子, 畠山鎮次, 嘉村巧

2002年～ 2003年

詳細を見る詳細を閉じる

Gemininは、mitosisの間にだけに分解される分子を網羅的にスクリーングすることによつて発見された分子である。G1期には全く存在しないが、S期からG2期、M期の開始にかけて蓄積し、有糸分裂の中期(metaphase)から後期(anaphase)への移行期に急速に消失する。このタンパク量の急激な変化はAPC/Cによるユビキチン化によって分解を受けるためである。また、Gemininを過剰発現するとDNA複製が抑制されることから、DNA複製のライセンシングに関与する分子であると考えられてきた。このように細胞周期の進行に強く関わっていると考えられる分子Gemininのノックアウトマウスを作製することによって、そのin vivoでの生物学的役割を検討することが本研究の目的である。 Geminin遺伝子をクローニングし遺伝子構造を明らかにした後、Cdt1結合領域をコードするエクソンをネマイシン耐性遺伝子に置換するターゲティングベクターを作製し、定法に則りノックアウトマウスを作製したところ、胎生早期に致死であることが確認された。現在までの解析では、ノックアウト胚は胎生7.5日には観察されていない。このような胎生初期の死亡からも細胞の正常な分裂に必須の分子であることが予想される。一方、2004年には、Gemininは、Polycomb遺伝子との相互作用によって、Hox遺伝子を制御することが報告された。今後は、分化におけるHox遺伝子との相互作用も検討したいと考えている。
プロテアソームへのユビキチン化基質のターゲッテング機構の解析

嘉村巧, 中山敬一, 中山啓子, 畠山鎮次

2002年～ 2002年

詳細を見る詳細を閉じる

ユビキチン・プロテアソーム系を介したタンパク質分解は細胞周期・シグナル伝達・脳変性疾患等に中心的な役割を果たしている。タンパク質へのユビキチン化反応には、E1,E2,E3の酵素群が関与し、この分野に関する研究は急速に進んでいるが、その後のステップであるポリユビキチン化タンパク質のプロテアソームへのターゲッテング機構に関してはほとんど明らかになっていない。最近、我々は生化学的手法を用いて、p140 (C末側にRINGフィンガー配列を持つ)とp50 (N末側にUBL配列、C末側に2つのUBA配列を持つ)の2量体からなる複合体を、CDKインヒビターp27Kip1に対する新たなE3として細胞抽出液より分離・精製した。近年UBLおよびUBA配列をもつタンパク質の機能解析が盛んに行われているが、我々が同定したp50に関する報告はいまだなされていない。そこで本研究ではp50のユビキチン・プロテアソーム系に対する影響を生化学的、細胞生物学的方法を用いて解析することを目的とする。現在までに、試験管内および細胞内でp50がプロテアソームおよびユビキチンと結合することを確認している。また試験管内でのp27のユビキチン化反応に対してp50が抑制的に作用することも確認している。そしてp27の分解に対する影響をp50の過剰発現あるいはp50に対するRNA干渉法をもちいて検討中である。さらにはp50のノックアウトマウスの作製中であり、個体レベルでのp50の影響を検討する予定である。p50/p140複合体とプロテアソームとの関係が明らかになれば、ポリユビキチン化タンパク質のプロテアソームへのターゲッテング機構解明の手がかりとなると考えられる。
2種類のサイクリンE分解機構の細胞周期進行における役割

中山啓子

2002年～ 2002年

詳細を見る詳細を閉じる

サイクリンEは380番目のスレオニン(スレオニン380)がリン酸化されると、タンパクの安定性が低下することから、以前より知られていた。そこで、このリン酸化を認識するF-boxタンパクをスクリーニングすることによって、F-boxタンパクFbw7を含むがユビキチンリガーゼとしてSCF^<Fbw7>が報告された。我々も、細胞内でFbw7とサイクリンEとの結合がリン酸化依存的に生じ、Fbw7は、少なくとも過剰発現することによってサイクリンEの存在量を制御していることを確認した。そこでFbw7のin vivoにおける役割を検討するためにノックアウトマウスを作製した。Fbw7ノックアウトマウスは胎生10日付近で致死であり、その際、特に頭蓋内出血が多くの個体で認められた。これを詳細に調べるとFbw7ノックアウトマウスでは原始血管叢は正常に形成されるが、リモデリングが起こらず、正常の血管が形成されないことが判明し、Fbw7の胎生致死にいたる原因は血管形成不全による出血死であると考えられた。Fbw7の線虫における相同遺伝子Sel-10は、Notch1及びNotch4に結合しユビキチン化することが報告されていた。そこでこのマウスでのNotchの発現量を調べたところ、Notch4の発現量が有意に増加しており、Fbw7がNotch4のユビキチン化を通じてその発現量をコントロールしている可能性が高く、Notch4-HRT-1系が過剰となり、その結果血管系の分化に障害をきたしていると考えられた。一方サイクリンEはノックアウトマウスにおいても量的に変化せず、その活性も不変であった。
異常蛋白質の特異的分解機構を応用した神経変性疾患に対する遺伝子治療法の開発

畠山鎮次, 山下順範, 中山啓子, 中山敬一, 山下順範囲

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

研究機関：Kyushu University

2001年～ 2002年

詳細を見る詳細を閉じる

細胞内タンパク質分解は、細胞周期や転写調節やシグナル伝達などの生物学上重要な現象の調節に関与している。ユビキチン介在性蛋白分解は、ユビキチン活性化酵素(E1)、ユビキチン結合酵素(E2)、ユビキチンリガーゼ(E3)の酵素カスケードによりユビキチンの基質へのイソペプチド結合と、その後のプロテアソームによる分解によって構成される。E3に基質特異性が担われていると想像され、現在まで、HECT型E3とリングフィンガー型E3の2種類のE3群が発見されている。最初、U-ボックスタンパク質は4つ以上のポリユビキチン鎖を基質に伸長させるE4 (Ufd2)として、出芽酵母の人工基質の分解システムの解析から同定された。Ufd2のC末端に存在する約70アミノ酸配列(U-ボックスドメイン)を有するタンパク質は、酵母からヒトに至るまで、各々の生物種に複数存在することが判明し、我々はヒト及びマウスからU-ボックスドメインを含むタンパク質のcDNAをクローニングし、そのE3活性を証明した(U-ボックス型E3)。ほとんどのU-ボックスタンパク質は分子シャペロンとの関係が認められ、U-ボックス型E3はシャペロン依存型E3である可能性が高い。異常蛋白の蓄積は対応するために、正確な蛋白フォールディングを起こすためには分子シャペロンが、一方、異常タンパク質を分解する場合はU-ボックス型E3が関与している可能性を示した。機能レベルでは、哺乳類のUfd2ホモログであるUFD2aが、ポリグルタミン病のひとつであるマシャド-ジョセフ病の原因遺伝子産物である、神経細胞内に蓄積されるMJD1タンパク質を認識し分解できることを見いだした。また、他のU-ボックス蛋白であるCHIPが、他の神経変性疾患であるパーキンソン病に関与していることを報告した。現在、遺伝子治療的応用に向けて、U-ボックス型E3の機能および細胞生物学的解析を遂行中である。
細胞内蛋白の特異的分解制御による癌治療法の確立 -人工受容体を有するユビキチンリガーゼの作製と応用-

中山敬一, 山下順範, 中山啓子, 畠山鎮次

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

研究機関：Kyushu University

2001年～ 2002年

詳細を見る詳細を閉じる

この研究課題では、ユビキチンリガーゼを人工的に改変することによって、新しい基質特異性を有するユビキチンリガーゼを創出し、生体にとって有害な分子を除去するシステムを構築することを目的としている。本研究では特にモデルとして癌遺伝子産物のMycを対象にしている。Mycには特異的に結合する分子Maxがあるので、このMaxとユビキチンリガーゼとのキメラ分子を作製し、Mycがこのキメラ分子によってユビキチン化を受け、プロテアソームによって分解される系を構築することを目指した。われわれはまずHECT型ユビキチンリガーゼであるNedd4、F-boxタンパク質β-TrCP1、Uボックス型ユビキチンリガーゼであるCHIPを用いて、Max/Nedd4、Max/β-TrCP1、Max/CHIPの3種類のキメラタンパクを作製し、その効果を検討した。これらのキメラタンパクは、in vitroでMycとの結合を確認した後、哺乳動物細胞への発現ベクターを用いて、過剰発現細胞を作製し、そのような細胞におけるMycの存在量や半減期を測定し、キメラタンパクの効果判定を行った。その結果、Max/CHIPが最も効率的にMycの生物学的効果を抑制できることがわかった。また、プラークアッセイやコロニーアッセイを使用し、Max/CHIPキメラ型ユビキチンリガーゼが存在した場合にMycが過剰発現させても、細胞の癌化能の低下が認められるかを検討した。少なくとも軟寒天培養実験では、Max/CHIPキメラ型ユビキチンリガーゼを存在させると、Myc誘導性の増殖が明らかに阻害された。さらに、Max/CHIPキメラ型ユビキチンリガーゼを発現させた場合、癌細胞が個体レベルでの造腫瘍性を検討するために、ヌードマウスへの移植実験を現在行っている。
ポリグルタミン病における異常タンパク質の新規クリアランスシステムの研究

中山敬一, 中山啓子, 畠山鎮次

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

研究機関：Kyushu University

2001年～ 2002年

詳細を見る詳細を閉じる

多くの神経変性疾患においては封入体タンパク質の分解機構に破綻がある可能性があることが示唆されている。本研究ではMJD1の分解機構が分子レベルで理解し、それを制御するような遺伝子治療法や低分子化合物の探索することによって、全く新しい作用機序に基づく治療法の閉発を期待したものである。またヒトの疾患に類似したモデル動物を作出できることが予想され、根本的治療法の確立に寄与することも目指し、本研究を行っている。異常MJD1タンパク質のクリアランス機構に関与する二つのタンパク質VCPとUFD2がどのようにMJD1をユビキチン・プロテアソーム系によって分解へ導くかという分子メカニズムを明らかにすると同時に、モデルマウスの作製を今年度は行った。 VCPやUFD2はMJD1の分解に関与する分子であるので、細胞内におけるMJD1の過剰蓄積が予想される。そこでこれらノックアウトマウスを観察した。小脳性失調等の神経学的異常の発症を中心に長期観察を行うと共に、発生期から成体までの全身病理検索を行う。さらにノックアウトマウスから初代培養細胞を作製し、その細胞を用いてMJD1のユビキチン化と分解が実際に阻害されているかどうかを検討した。また、それらの細胞に凝集体形成を起こすような変異MJD1を発現したトランスジェニックマウスを作製し、小脳性失調等の神経学的異常の観察を行うと同時に、UFD2ノックアウトマウスとMJD1トランスジェニックマウスを交配することによって、その凝集体形成能や細胞傷害性を検討している。
中心体過剰複製と染色体倍数性異常の発がんにおける役割の研究

中山啓子

2001年～ 2001年

詳細を見る詳細を閉じる

私達は、サイクリンEやp27^<Kip1>のユビキチン依存性をつかさどるユビキチンリガーゼのコンポーネントSkp2をクローニングし、そのノックアウトマウス作製した。Skp2ノックアウトマウスにおいてはユビキチン化の障害の結果1)サイクリンEとp27^<Kip1>の異常な蓄積、2)染色体多倍体化や中心体過剰複製などの異常が観察されたが、個体としての発癌は認められなかった。さらに次の段階として、Skp2ノックアウトマウスを以前に作製したp27^<Kip1>ノックアウトマウスと交配することによってSkp2/p27ダブルノックアウトマウスを作製し、過剰なサイクリンEの蓄積とp27^<Kip1>の消失という癌細胞にしばしば認められる生化学的な異常を再現したが、この個体もやはり発癌は認めなかった。驚いたことに、このSkp2/p27ダブルノックアウトマウスでは、染色体多倍数体化や中心体過剰複製などSkp2ノックアウトマウスでみられた表現型は消失した。このようにSkp2ノックアウトマウスとSkp2/p27ダブルノックアウトマウスは、細胞周期関連蛋白の生化学的特徴は非常に癌細胞と類似しているものの、個体レベルでの発癌はみられず、癌誘発のためにはさらなる異常が必要であることが判明した。また、Skp2ノックアウトマウスより調製されたリンパ球細胞及び胎仔線維芽細胞では、細胞周期のG0期からG1期ではp27は野生型細胞と同様に分解されることが判明した。これによって、p27^<Kip1>タンパク質の量的な調節はSkp2だけではなく、他の因子によっても調節されていることが判明した。
ノックアウトマウスを用いたユビキチンリガーゼの機能解析

中山啓子, 畠山鎮次, 中山敬一, 北川雅俊, 小南欽一郎

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

研究機関：KYUSHU UNIVERSITY

2000年～ 2001年

詳細を見る詳細を閉じる

1)私達は、これまでにIKBやβ-Cateninの分解において、FWD1というF-box蛋白がCul-1、Skp1、Rbx1とともにSCF複合体を構成しユビキチンを付加するユビキチンリガーゼとして働くことを示してきた。本研究ではこれらSCF複合体の構成成分であるCul-1、Skp1や他のF-box蛋白であるSkp2のノックアウトマウスを作製し、ユビキチン-プロテアゾーム系蛋白分解機構の中で一つの大きなグループを構成しているSCF複合体による蛋白分解機構の生物学的意義を知ることを目的とした。 2)Skp2ノックアウトマウスは、サイクリンEとP27のユビキチンリガーゼであるSkp2を欠失するマウスであり、サイクリンEとp27の過剰蓄積が観察された。それにともない染色体の倍数性異常、核の増大、中心体の過剰複製が認められた。 3)このマウスをさらにp27ノックアウトマウスと交配しSKp2/p27ダブルノックアウトマウスを作製した。このマウスはp27遺伝子が破壊されているためにp27の蓄積はなく、サイクリンEのみが過剰蓄積したマウスとなる。このマウスではSkp2単独ノックアウトマウスでみられた、染色体倍数性の異常や中心体の過剰複製はみられず、むしろ正常に戻っており、有意な発癌率の上昇も認められなかった。 4)Cul-1ノックアウトマウス及びSkp1ノックアウトマウスはいずれも胎生初期に発生を停止することが判明した(胎生5.5日〜6.5日に死亡)この初期胚にはサイクリンEの過剰蓄積が認められた。Cul-1、Skp1はSCF複合体の共通コンポーネントであり多くの基質蛋白の分解に関わることが予想される。胎生初期の死亡はそれを裹付ける結果であった。
Cyclin E過剰蓄積とp27の欠損を伴うマウスを用いた発がん機構の研究

中山啓子, 小南欽一郎

2000年～ 2000年

詳細を見る詳細を閉じる

これまでに様々な発癌モデルマウスが作製されてきたが、その多くがリンパ腫など肉腫を好発し、ヒト悪性腫瘍の大部分を占める癌腫を好発するものは少ない。ヒト癌では、細胞周期の進行に必須なサイクリンEが過剰発現し、細胞周期の進行を負に制御するCDKインヒビターp27の発現が低下している例が多くみられる。そこで私達は、細胞周期関連蛋白の生化学的状態をがヒト癌と類似した環境であるp27を持たずサイクリンEが過剰に発現しているマウスを作出し、ヒト発癌のメカニズムの解明とモデルマウスとしての可能性を検討した。昨年、われわれが報告したSkp2ノックアウトマウスは、サイクリンEとp27のユビキチンリガーゼであるSkp2を欠失するマウスであり、サイクリンEとp27の過剰蓄積が観察された。それにともない染色体の倍数性異常、核の増大、中心体の過剰複製が認められた。このマウスをp27ノックアウトマウスと交配しSKp2/p27ダブルノックアウトマウスを作製した。このマウスはp27遺伝子が破壊されているためにp27の蓄積はなく、サイクリンEのみが過剰蓄積したマウスとなる。このマウスではSkp2単独ノックアウトマウスでみられた、染色体倍数性の異常や中心体の過剰複製はみられず、むしろ正常に戻っており、有意な発癌率の上昇も認められなかった。Skp2ノックアウトマウスより調整された胎児線維芽細胞の細胞抽出液を用いて生化学的特性を調べたところ、Skp2ノックアウト細胞ではCdc2活性が低下していることが判明した。このことよりp27の分解抑制による過剩積によるCdc2活性の抑制が染色体倍数性の異常や中心体の過剰複製の原因になっていると結論された。
神経変性疾患における封入体物質のユビキチン化に関わる因子の単離同定と解析

中山敬一, 畠山鎮次, 中山啓子, 北川雅敏, 小南欽一郎

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (B).

研究機関：Medical Institute of Bioregulation, Kyushu University

1999年～ 2000年

詳細を見る詳細を閉じる

神経変性疾患における封入体を構成している物質は、ほとんどがユビキチン化されていることが知られている。そこで私達はその物質のユビキチン化機構の詳細を調べるために、それらの物質に特異的にユビキチン化を起こす酵素の精製及び遺伝子の単離同定を試みた。まず培養細胞内で封入体形成を引き起こすことのできるポリグルタミン病をモデルシステムとして選び、ポリグルタミン病の中で我が国の研究者によって原因遺伝子が発見されたMJD1蛋白質を中心に解析を進めた。 MJD1を培養細胞内に発現させると強力にユビキチン化されることが明らかとなった。私達はその反応を組換えMJD1蛋白質をウサギ網状赤血球抽出液を適当な条件下で混合することによって、試験管内無細胞系で再現することに成功した。そこでこの無細胞系を用いて、ウサギ網状赤血球抽出液に含まれると推定されるユビキチン化酵素を精製することを試みた。数段階の精製後、ゲル濾過カラムを用いて分子量の推定を行ったところ、このユビキチン化活性は>1,000kDaの分画に回収された。この分画をMJD1アフィニティーカラムに通すと、分子量90〜100kDaの蛋白質が特異的にMJD1に結合することが明らかとなった。さらに精製を進めてマイクロシークエンシングによってその部分アミノ酸配列を決定し、遺伝子をクローニングすることに成功した。現在この遺伝子産物の生物学的重要性並びに神経変性疾患における封入体形成への関与を検討している。
細胞周期調節分子の分解制御に関する研究-マウスSCF複合体の遺伝子クローニングと解析-

畠山鎮次, 中山啓子, 北川雅敏, 中山敬一

1999年～ 2000年

詳細を見る詳細を閉じる

細胞内に存在する分子の分解制御は、多方面にわたる医学生物学領域の蛋白分子の機能に重要な働きを果たしている。今まで、いくつかの蛋白分解機構が報告されているが、特に、酵母におけるユビキチン依存性プロテアソーム介在性蛋白分解に関する研究により、Skp1、Cul-1、F-box蛋白複合体(SCF複合体)と言われるユビキチン化を実行する酵素複合体は、細胞周期をはじめ、さまざまな細胞機能に関与する分子の発現調節(分解調節)を行っていることが明らかになった。この構成成分のなかで、F-box蛋白が基質分子をユビキチン化させるための基質特異性を担っていることが推定されている。我々は、酵母におけるアナロジーを利用して、マウスにおけるSkp1、Cul-1及び複数のF-box蛋白を同定した。特に、我々がFWD1/β-TrCP(1つのF boxと7つのWD40リピートを有する)として同定したF-box蛋白は、免疫学上重要であるNF-κBの抑制分子であるIκBαと、細胞接着もしくは癌の分野で注目されるβ-cateninのユビキチン化、及び分解に関与していることが判明した。IκBαとβ-cateninの発現量にかかわるアミノ酸配列に存在するセリン/スレオニンをリン酸化する上流のシグナル及びキナーゼは異なるが、そのモチーフ自体は非常に似ており、リン酸化が起こった場合、FWD1/β-TrCPは、IκBαとβ-cateninのどちらにも結合し、ユビキチン化を遂行する。つまり、SCF^<FWD1/β-TrCP>は、IκBαとβ-cateninに分解されるべきシグナルが入った場合に、それらの分子の分解を実行する中心的なシステムであることがわかった。この結果は、酵母以外の真核細胞におけるSCF複合体によるユビキチン化介在性分解の初めての報告となる。
サイクリン依存性キナーゼ阻害分子p27の分解因子の同定及び解析

小南欽一郎, 中山啓子

1999年～ 1999年

詳細を見る詳細を閉じる

CDK阻害分子p27の分解には、ユビキチン-プロテアソーム系の関与が示されているが、どのような分子がそのユビキチン化の特異性を決定するか明らかにされていない。そこで本研究では、p27/Rum1(酵母におけるP27の機能的ホモログ)の分解に関与する因子を取得する目的で、pop1変異株を含む酵母を用いた遺伝学的方法によりそれらの遺伝子群の同定を試みた。 1.p27の分解因子の取得 (1)p27をpop1+変異株中で高発現すると致死の表現型を示すことを見いだした。 (2)酵母で発現するマウス胸腺由来のcDNAライブラリーを作成した。 (3)p27高発現による致死性を抑圧する遺伝子を(2)のcDNAライブラリーより8クローン取得した。 (4)これらには遺伝子発現の抑圧活性が無いことを確かめた。 (5)これらには、ユビキチン遺伝子、60SリボソームL23遺伝子、さらに6つの未知の遺伝子が含まれていた。 (6)現在、それらのp27に対するin vivoでの直接的影響を解析中である。 2.Rum1分解に関わる変異株および阻害因子の取得 (1)rum1+遺伝子とオーレオバシジン耐性遺伝子を融合させることにより、酵母内でのRum1タンパク質の安定性検出用モニターシステムを構築した。 (2)上記遺伝子を発現している酵母細胞を変異源処理し、11株のRum1安定性に関わる変異株を取得した。 (3)これらの変異株から現在までに6クローン取得し、トランスポゾンシステムにより対応する遺伝子を特定中である。 (4)Rum1分解の阻害分子として、SUMO1に対するE2として知られているHus5、SCF複合体のSkp1に結合する分子Sgt1、その他未知の分子4つが取得された。 (5)現在これらと、Rum1のユビキチン化に関わるSCF複合体との関係を、遺伝学的生化学的に検討中である。
細胞周期制御因子の分解機構の解明とノックアウトマウスを用いた発がん研究

中山啓子, 小南欽一郎, 畠山鎮次, 北川雅敏

1999年～ 1999年

詳細を見る詳細を閉じる

細胞周期進行に不可欠であると考えられているサイクリンEの分解機構の解明をめざし、サイクリンEのユビキチンリガーゼの同定を試みた。酵母ですでに知られている、ユビキチンリガーゼのマウス相同遺伝子を単離し、サイクリンEへの結合及び蛋白の安定性への効果を調べ、サイクリンEのユビキチンリガーゼである複合体を同定することができた。その複合体を構成するSkp2、Skp1、Cul1のノックアウトマウスを作製し、その表現型を解析することによって、生物学的機能を知るとともに、サイクリンEの分解が発がんに果たす役割を検討した。 1.サイクリンEはSCF複合体をE3とするユビキチン/プロテアゾーム系によって分解された。 2.SCF複合体を構成するF-boxタンパクはSkp2であった。 3.Skp2ノックアウトマウスは発生段階では体重が少ないこと以外に肉眼的な以上は認めないが、肝細胞や気管上皮細胞などで細胞および核の腫大が認められ、肝細胞では染色体倍数性が異常となり、4倍体、8倍体の核が多数観察された。 4.Skp2ノックアウトマウスの胎仔線維芽細胞は増殖が遅く、正常に比しアポトーシスが多く見られた。 5.Skp2ノックアウトマウスでは生後1年までで明らかな発がん傾向を認めていない。 6.Skp1及びCul1ノックアウトマウスはいずれも胎生6.5〜7.5日目に死亡する早期の胎生致死であった。 7.Skp1及びCul1ノックアウトマウスにはサイクリンEおよびβ-カテニンの蓄積が見られた。
サイクリン分解関連酵素Cdc53(Cul-1)の単離とノックアウトマウスの作製

中山啓子

1998年～ 1999年

詳細を見る詳細を閉じる

酵母ですでに知られている、ユビキチンリガーゼのマウス相同遺伝子を単離し、その生物学的機能を知るためにノックアウトマウスを作製した。 1.酵母SCF複合体のマウス相同遺伝子を、ESTdatabase上で検索し、マウスCul1のcDNA塩基配列の一部を得ることができた。 2.上記のcDNAの一部をプローブとして、マウス胸腺cDNAライブラリーをスクリーニングし、マウスCul1のcDNA上タンパクコード領域全長を得ることができた。 3.cDNA全長をプローブとし、129マウスゲノムライブラリーをスクリーニングし、9個の独立したクローンを得た。 4.上記クローンを解析することによって、マウスCul1遺伝子は少なくとも、60kbpに及ぶ大きな遺伝子であることが分かった。 5.翻訳開始コドンをコードするエクソンを含む遺伝子領域、約1kbpをネオマイシン耐性遺伝子で置換したターゲティングベタターを構築し、ES細胞にトランスフェクションし、相同組み換え体を得た。 6.相同組み換えES細胞をブラストシストにインジェクションして、キメラマウスを得、さらに交配を繰り返し、cul1ヘテロノックアウトマウスを得ることができた。 7.ヘテロノックアウトマウス同士を交配したが、ホモノックアウトマウスは産まれず、胎生致死であることが判明した。 8.Cul1ノックアウトマウスはいずれも胎生6.5〜7.5日目に死亡し、サイクリンEおよびβ-カテニンの蓄積が見られたので、致死の原因はSCF複合体によって蛋白分解を受けるべき様々な蛋白の以上蓄積に寄るものであると考えられた。
癌治療を目指したCDK阻害蛋白質p27Kip1の分解抑制の研究

北川雅敏, 中山敬一, 畠山鎮次, 中山啓子, 平井愛山

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

研究機関：KYUSHU UNIVERSITY

1998年～ 1999年

詳細を見る詳細を閉じる

癌細胞の無限増殖能は細胞周期制御機構の破綻によるところが大きく、細胞周期のG1期からS期への進行を制御しているG1サイクリン依存性キナーゼ(G1-CDK)の異常な活性化がその原因のひとつである。G1-CDKの活性はその阻害タンパク質(CKI)によって制御されている。今回我々はCKIのひとつであるp27^<Kip1>の存在量を肺癌組織において検討した。非小細胞癌を調べた結果、adenocarcinomaおよびsquamus cell carcinomaのいずれも、正常肺組織に比べてp27^<Kip1>の存在量が低いことがわかった。さらにそれらの組織抽出液ではp27^<Kip1>の分解活性が優位に高いことを見い出した。他のグループからの結果を総合すると、ヒトの大腸癌、胃癌、乳癌や肺癌の悪性度とCKIであるp27^<Kip1>の分解活性が正の相関を示すと考えられる。そこで我々はp27^<Kip1>の分解メカニズムを解明することを目的に、分子生物学的、生化学的手法を用いて解析した。その結果、p27^<Kip1>の分解はユビキチンープロテアソーム系と限定分解というふたつの経路で実行されることを突き止めた。p27^<Kip1>のユビキチン化はSCF^<Skp2>というSCFユビキチンリガーゼが実行し、ユビキチン化されたp27^<Kip1>はプロテアソームによって分解される。一方でp27^<Kip1>はサイクリンと結合する領域内で限定分解され、失活することがわかった。いずれの分解機構もG1後期からS期にかけて活性が高く、細胞周期のS期への進行に寄与していると考えられる。今後は各種の癌においての分解がどちらのメカニズムに寄与しているかの解析を行うこと、および限定分解酵素の同定が急務である。さらにp27^<Kip1>分解阻害剤、分解抵抗性p27^<Kip1>の作成による遺伝子治療への応用が期待される。
哺乳動物のS期形成促進因子の同定と発生工学的手法を用いた機能解析

北川雅敏, 中山敬一, 畠山鎮次, 中山啓子

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

研究機関：KYUSHU UNIVERSITY

1998年～ 1999年

詳細を見る詳細を閉じる

細胞増殖および細胞周期進行に関与する因子の分解機構の解明をめざし、特にG1からS期の進行に関与するユビキチンリガーゼ複合体の解析を試みた。今回は特に、大腸癌の発生およびその細胞増殖に関与するβ-カテニンのユビキチンリガーゼの同定とそれによるβ-カテニンの分解機構の解析を行い次の結果を得た。1.酵母ですでに知られているSCFユビキチンリガーゼの構成因子Skp1、Cul1のマウス相同遺伝子を単離した。2.ショウジョウバエの研究からSlimb変異がβ-カテニンの蓄積を伴うことから、そのマウス相同遺伝子を単離しFWD1と命名した。3.細胞内でFWD1はそのC末端側のWD40領域でリン酸化型β-カテニンと特異的に結合し、さらに、GSK3、Axin、APCを加えた複合体を形成していることを見い出した。4.FWD1のN端側のF-boxではSkp1、Cul1とユビキチンリガーゼ複合体SCF^<FWD1>を形成し、β-カテニンのユビキチン化を実行することが判明した。APCの変異のある大腸癌ではβ-カテニンのリン酸化が低下することにより、SCF^<FWD1>が形成できずにβ-カテニンの蓄積が引き起こされると考えられる。5.一方でFWD1はGSDXXSのふたつのSerがリン酸化された場合それを認識するが、同様の配列をもつIκBαもIKKのリン酸化を受けると、このSCF^<FWD1>複合体が形成されて、ユビキチン化されることも見い出した。6.さらにSkp1、Cul1のノックアウトマウスを作製し、その表現型を解析した。Skp1及びCul1ノックアウトマウスはいずれも胎生6.5〜7.5日目に死亡する早期の胎生致死であり、β-カテニンの蓄積が見られた。以上の研究成果よりβ-カテニンの分解機構が明らかになり、大腸癌の診断治療に応用が期待される。
細胞周期調節分子の分解制御に関する研究 - Yeast three-hybrid法の確立と応用 -

畠山鎮次, 中山啓子, 北川雅敏, 中山敬一

1998年～ 1998年

詳細を見る詳細を閉じる

細胞周期を調節するサイクリンとサイクリン依存性キナーゼ(CDK)に直接結合し、機能抑制するCDK阻害分子(CDK inhibitors;CKI)であるP27はユビキチン化を受けることにより、その発現レベルが調節されている。本研究は、p27のユビキチン化に関与するE3が存在すると仮定し、p27とUBC3と3分子複合体を形成する新たなる遺伝子を同定することを目的とした。さらに、本研究では、3分子が複合体を形成するときに、目的とする第3の遺伝子をクローニングする方法であるYeast three-hybrid法を開発した。また、p53、p27を始め、細胞周期を調節する分子(サイクリン、CKIなど)の発現が合成のみならず、分解(特にユビキチン化)により制御されていることが報告され始めている。特に、酵母における先駆的研究により、Skp1/CUl-1/E-box蛋白複合体(SCF複合体)は、CKIを含む細胞周期調節分子をはじめ、さまざまな細胞機能に関与する分子の発現調節を行っていることが報告されている。我々は、酵母におけるアナロジーを利用して、マウスにおけるSkp1、Cul-1及び複数のF-box蛋白を同定した。我々がFWD1として同定したF-box蛋白は、免疫学上重要であるNF-κBの抑制分子であるIκBαと、大腸癌に関与するβ-cateninのユビキチン化、及び分解に関与していることが明らかとなった。この結果は、酵母以外の真核細胞におけるSCF複合体によるユビキチン化介在性分解の初めての報告となる。
サイクリン依存性キナーゼ阻害分子の分解機構の解明

中山啓子, 畠山鎮次, 北川雅敏, 中山敬一

1998年～ 1998年

詳細を見る詳細を閉じる

p27などCDKインヒビターと呼ばれる分子群は、CDK/Cyclin複合体に結合し酵素活性を阻害することから細胞周期調節に直接関わる重要な因子と考えられる。p27の蛋白量は蛋白分解に規定されていることが既に報告されていたがその分子機構はは不明であった。そこでその分解のメカニズムの解明を試み以下の点が明らかとなった。 1. 培養細胞(NIH3T3)を用い接触阻害によって細胞周期を同調させ、細胞周期によるp27の変動を観察した。p27は細胞周期依存性にG1-S移行期にもっとも強くユビキチン化された。 2. ユビキチン付加部位を特定するためp27の変異体を作製しユビキチン化を調べたところ,アミノ酸残基134番、153番、165番目のリジンをアルギニンに置換したところユビキチン化が抑制された。 3. p27をウェスタンブロットで観察すると、p27のユビキチン化と同時に22kDaの蛋白も同時に認識された。これはp27がユビキチン化以外にプロセシングを受けていることを示唆する。この反応はATP依存的であり、lactacystin、chymostatin、PMSFで抑制されたが、antipain、pepstatin、leupeptin、E64では影響を受けない。このプロセシング反応はプロテアゾームに関与しているchymotrypsin様プロテアーゼによるものと考えられた。 4. プロセシングされた22kDa蛋白(p27Δ22k)は、p27のN末端より35〜40アミノ酸が切断されたものであると予想され,この蛋白はCDK阻害活性が野生型に比べ1/100に低下していた。 5. p27Δ22kのプロセシング反応はS期に強くみられた。今回の研究の結果,p27の分解にはユビキチン化だけでなく他のプロセシング機構も関与していることが示された。ユビキチン化やプロセシングに直接関与している酵素群の同定が今後の課題である。
PKCδノックアウトマウス作成による細胞死(アポトーシス)シグナル伝達系の研究

中山敬一, 畠山鎮次, 中山啓子, 北川雅敏, 真貝洋一, 大野茂男

提供機関：Japan Society for the Promotion of Science

制度名：Grants-in-Aid for Scientific Research

研究種目：Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

研究機関：Kyushu University

1997年～ 1998年

詳細を見る詳細を閉じる

プロテインキナーゼC(PKC)ファミリーの1つであるPKCδがアポトーシスの際にカスペースによって切断され、活性型に変換されることが知られているが、本研究ではPKCδの遺伝子を人工的に破壊したマウス(PKCδノックアウトマウス;以下PKCδ-/-マウス)を作成することによりPKCδがどのようにアポトーシスの誘導に関わっているかを明らかにすることがその目的である。まずターゲティングベクターを構築し、Embryonic Stem(ES)細胞に電気的に導入して相同組換えを起こしたクローンを得た。このES細胞を用いて定法に従いPKCδ-/-マウスを作成した。PKCδ-/-マウスは正常に発生し、長期観察の結果、成長過程や寿命にも現在までのところ明らかな異常を認めない。発癌等の疾病も特に観察されなかった。病理解剖の結果、脾臓の腫大が有意に観察された。フローサイトメトリーによる解析の結果、特にリンパ球の増加(T細胞・ B細胞)が顕著であることが判明した。リンパ節においてはB細胞の増加が著しく、個体によってはB細胞の方がT細胞よりも多い場合もしばしば観察された。体外培養系における増殖実験ではT細胞は特にPKCδ+/+とPKCδ-/-マウスの間で有意な差を認めなかったが、B細胞ではPKCδ-/-マウスの方が増殖が速い結果を得た。 PKCδ-/-マウスにおけるアポトーシスに関しては、特に発生における形態異常が認められなかったことから、初期発生に関わるアポトーシスにPKCδは必須でないことが明らかとなった。さらにPKCδ-/-マウス由来の胸腺細胞や初代培養線維芽細胞におけるアポトーシスはPKCδ+/+マウス由来のものと比較して特に変化は認められなかったが、B細胞のアポトーシスについてはPKCδ-/-マウスの方が低下している傾向が認められた。

︎全件表示 ︎最初の5件までを表示

社会貢献活動 3

[日本国内] TAMRIC東北先進医療研究開発連携拠点

2010年1月～継続中

詳細を見る詳細を閉じる

拠点事務局長
[日本国内] 東北大学100周年記念祭り

2007年8月25日～

詳細を見る詳細を閉じる

講演「大きなねずみ・小さなねずみ」
[日本国内] 東北大学オープンキャンパス全学向講演会

2007年7月30日～

詳細を見る詳細を閉じる

次年度入学希望者向け講演

メディア報道 6

ＡＲＴ（東北大学大学院医学系研究科附属創生応用医学研究センター）

科学新聞

2013年7月26日

メディア報道種別: 新聞・雑誌

詳細を見る詳細を閉じる

がんコアセンターには様々な出身学部の大学院生が参画し、がん克服をめざして切磋琢磨していること、そしてその目標を共有して研究推進する経験が、研究者の育成に大きく貢献するのではないかと解説。更に具体的に進めている研究として、がん遺伝子の変異による転写やエピゲノムの変化に注目し、次世代シークエンサーを活用して網羅的な解析に取り組んでいることを紹介。
[日本国内] ラジオ番組「Crescendo」内「みんなでつくる未来の医療」コーナー

Date FM

2012年6月11日

メディア報道種別: その他

詳細を見る詳細を閉じる

「必要な新規の専門人材」というテーマで東北メディカル・メガバンク機構人材育成部門部門長として出演
[日本国内] 生命科学の先端研究拠点東北大ART がん医学コアセンター

週刊科学新聞

2012年4月20日

メディア報道種別: 新聞・雑誌

詳細を見る詳細を閉じる

がん医学コアセンターの研究内容紹介等
[日本国内] 女性医師の視点美言大義

医科同窓会会報（東京医科歯科大学お茶の水会同窓会）

2012年2月28日

メディア報道種別: その他

詳細を見る詳細を閉じる

「家庭の役割・男女の役割」というタイトルで女性医師の視点でのエッセイ
[日本国内] ヒトのメカニズム

東日本放送

2009年4月9日

メディア報道種別: テレビ・ラジオ番組

詳細を見る詳細を閉じる

「東北大学の新世紀」
[日本国内] 東北大学オープンキャンパス

2008年7月

メディア報道種別: テレビ・ラジオ番組

︎全件表示 ︎最初の5件までを表示

その他 24

第１９回学際ライフサイエンスシンポジウムにおける座長
第５回山形肝炎ウイルスセミナー基調講演「次世代シークエンサーを用いた臨床研究の展開」
市民公開講演会「東北地方の復興・新生に向けて：アカデミアの果たす役割」の講演（「ゲノム科学から新しい医療に向けて」）
第１２回ＧＩリサーチフォーラム特別講演講師「臨床材料を用いた次世代シークエンサーによる新しい研究展開の可能性」
AB SCIEX プロテオミクスセミナー〜最新技術SWATHを用いたバイオマーカーの最前線〜の司会
シンポジウム『データ駆動型生命情報科学の挑戦-スーパーコンピュータ「京」と生命情報科学の接点-』での講演（「PCRから次世代シークエンサーへ：Wet研究者の奮闘」）
がん遺伝子産物RASによる広範な染色体領域にわたる転写抑制機構の解明

詳細を見る詳細を閉じる

がん遺伝子産物RASによる広範な染色体領域にわたる転写抑制機構の解明
第4回がん・エピゲノム研究会における座長
ユビキチンシステムの網羅的解析基盤の創出

詳細を見る詳細を閉じる

ユビキチンシステムの網羅的解析基盤の創出
組織特異的発がん機構の解明

詳細を見る詳細を閉じる

組織特異的発がん機構の解明
ユビキチンリガーゼCdc4/Fbw7の発がんに果たす役割の検討

詳細を見る詳細を閉じる

ユビキチンリガーゼCdc4/Fbw7の発がんに果たす役割の検討
発がんにおけるユビキチンリガーゼCdc4/Fbw7基質分子の役割

詳細を見る詳細を閉じる

発がんにおけるユビキチンリガーゼCdc4/Fbw7基質分子の役割
ｃ-Mycの分解異常が発がんに果たす役割

詳細を見る詳細を閉じる

ｃ-Mycの分解異常が発がんに果たす役割
マウス発生に関わるKPCの役割の研究

詳細を見る詳細を閉じる

マウス発生に関わるKPCの役割の研究
発生工学プロテオミクスを用いたPKC-δによる免疫寛容成立のメカニズムの解明

詳細を見る詳細を閉じる

発生工学プロテオミクスを用いたPKC-δによる免疫寛容成立のメカニズムの解明
細胞周期の再活性化による再生能力の賦活化の研究

詳細を見る詳細を閉じる

細胞周期の再活性化による再生能力の賦活化の研究
Mycの分解制御機構の解明

詳細を見る詳細を閉じる

Mycの分解制御機構の解明
神経変性疾患の発症機序の解明と遺伝子治療への応用

詳細を見る詳細を閉じる

神経変性疾患の発症機序の解明と遺伝子治療への応用
神経変性疾患における封入体物質のユビキチン化に関わる因子の単離同定と解析

詳細を見る詳細を閉じる

神経変性疾患における封入体物質のユビキチン化に関わる因子の単離同定と解析
神経再生に関する基礎的研究及び脳移植への応用

詳細を見る詳細を閉じる

神経再生に関する基礎的研究及び脳移植への応用
神経細胞における増殖制御機構の解明

詳細を見る詳細を閉じる

神経細胞における増殖制御機構の解明
リンパ球の増殖を制御する分子機構に関する研究

詳細を見る詳細を閉じる

リンパ球の増殖を制御する分子機構に関する研究
細胞周期制御分子の調節機構解明による新しい対癌戦略の開発

詳細を見る詳細を閉じる

細胞周期制御分子の調節機構解明による新しい対癌戦略の開発
PKCdノックアウトマウス作製による細胞死（アポトーシス）シグナル伝達系の研究

詳細を見る詳細を閉じる

PKCdノックアウトマウス作製による細胞死（アポトーシス）シグナル伝達系の研究

︎全件表示 ︎最初の5件までを表示